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β内酰胺酶的检测

临床标本中分离金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌以及最近发现的肠球菌属少数菌株对青霉素、氨苄青霉素出现耐药。由于上述菌株产生 β-内酰胺酶水解前述抗生素。检测该酶有下列方法: (一)微生物活性消失法 此法是以一株对青霉素高度敏感的枯草芽胞杆菌的指示菌,如待检菌株产生β内酰胺酶,破坏了青霉素,则在划线两边有枯草芽胞菌生长,否则指示菌仍呈很大抑菌环。具体操作结果解释参照《微生物学和微生物学检验》第115页,刘恭植主编,人民卫生出版社,1988年。 (二)淀粉-碘测定法 β内酰胺酶破坏β内酰胺环,碘与被打开β内酰胺环结合,使蓝色的淀粉-碘复合物转变成无色。 方法:用pH6.0磷酸缓冲液配制青霉素悬液 6000μg/ml,取该液0.1 ml置于微量稀释板凹孔中,挑选检测菌株数个菌落混悬于其中,摇动30min,静置室温中1h,加淀粉液2滴,再加碘液1滴,混合,立即观察颜色变化,阳性者当加入碘液后,首先立即出现蓝色、如在......阅读全文

β-内酰胺酶单克隆抗体和多克隆抗体的制备

  β-内酰胺酶单克隆抗体和多克隆抗体的制备   目前,在我国奶牛养殖业中,青霉素和头孢菌素等β-内酰胺类抗生素对奶牛乳房炎等疾病的控制起着十分重要的作用。由于一些奶牛养殖商户滥用抗生素以及未严格遵守休药期,致使牛奶中抗生素残留超标,乳中残留的抗生素严重危害食品安全和人体健康。我国政府对超过一定限

耐药机制详解之β-内酰胺酶

β-内酰胺类抗生素是目前临床抗感染治疗最普遍应用的一类抗生素,随着这类药物的广泛使用(特别是滥用和误用)和致病菌的变迁,产生了病原菌对药物的耐药性问题,而且耐药发生率相当高。细菌产生β-内酰胺酶(β-lactamase)是80%病原菌耐药的原因之一,另外约12%和8%病原菌的耐药分别与细菌细胞外膜通

细菌耐药与临床对策

近年来由于抗生素的广泛应用,细菌的耐药问题越来越严重。历史和现实的教训告诉我们:任何一种抗生素一旦问世,很快就会产生耐药株,产生耐药株的时间周期短则几年,长则十几年(表1)。目前,细菌的耐药问题已成为全球的严重问题,为此WHO专门发表了针对细菌耐药问题的专家建议(WHO/CDS/CS

细菌耐药与临床对策

近年来由于抗生素的广泛应用,细菌的耐药问题越来越严重。历史和现实的教训告诉我们:任何一种抗生素一旦问世,很快就会产生耐药株,产生耐药株的时间周期短则几年,长则十几年(表1)。目前,细菌的耐药问题已成为全球的严重问题,为此WHO专门发表了针对细菌耐药问题的专家建议(WHO/CDS/CS

细菌耐药与临床对策

近年来由于抗生素的广泛应用,细菌的耐药问题越来越严重。历史和现实的教训告诉我们:任何一种抗生素一旦问世,很快就会产生耐药株,产生耐药株的时间周期短则几年,长则十几年(表1)。目前,细菌的耐药问题已成为全球的严重问题,为此WHO专门发表了针对细菌耐药问题的专家建议(WHO/CDS/CSR/DRS/20

细菌耐药与临床对策(一)

  近年来由于抗生素的广泛应用,细菌的耐药问题越来越严重。历史和现实的教训告诉我们:任何一种抗生素一旦问世,很快就会产生耐药株,产生耐药株的时间周期短则几年,长则十几年(表1)。目前,细菌的耐药问题已成为全球的严重问题,为此WHO专门发表了针对细菌耐药问题的专家建议(WHO/CDS/CSR/DRS/

细菌的主要耐药机制

1.产生灭活抗生素的各种酶1.1 β—内酰胺酶(β-lactamase)  β—内酰胺类抗生素都共同具有一个核心β—内酰胺环,其基本作用机制是与细菌的青霉素结合蛋白结合,从而抑制细菌细胞壁的合成。产生β—内酰胺酶是细菌对β-内酰胺类抗菌药物产生耐药的主要原因。细菌产生的β-内酰胺酶,可借助其分子中的

应用末端截切、进化、再延长技术提高酶稳定性

应用末端截切、进化、再延长技术提高酶稳定性的方法             实验材料 质粒

β-内酰胺酶单克隆抗体和多克隆抗体的制备(下)

1.7 抗体纯化1.7.1 多克隆抗体的纯化采用辛酸-饱和硫酸铵法纯化抗β-内酰胺酶的兔血清,2次滴加饱和硫酸铵的最终体积分数分别为50%和40%。将沉淀用少量PBS溶解后转入透析袋中,用PBS溶液透析48h,利用紫外分析法检测透析液直至透析完全。1.7.2 单克隆抗体的纯化采用PEG6000沉淀法

细菌耐药性及其临床意义

当前医院内外的新的耐药菌在不断出现,常导致手术治疗失败、并发症增多、感染复发、住院时间延长、昂贵抗生素及其它药物的使用增加等。耐药株还随着国际贸易及旅游业的高速发展而在全球蔓延。由于新抗生素的广泛使用,各个细菌对抗生素的耐药谱不断在发生变化,特别是耐药性经常以多重耐药为特点,有时甚至找不到可治之药。

细菌耐药性及其临床意义

当前医院内外的新的耐药菌在不断出现,常导致手术治疗失败、并发症增多、感染复发、住院时间延长、昂贵抗生素及其它药物的使用增加等。耐药株还随着国际贸易及旅游业的高速发展而在全球蔓延。由于新抗生素的广泛使用,各个细菌对抗生素的耐药谱不断在发生变化,特别是耐药性经常以多重耐药为特点,有时甚至

细菌耐药性及其临床意义

当前医院内外的新的耐药菌在不断出现,常导致手术治疗失败、并发症增多、感染复发、住院时间延长、昂贵抗生素及其它药物的使用增加等。耐药株还随着国际贸易及旅游业的高速发展而在全球蔓延。由于新抗生素的广泛使用,各个细菌对抗生素的耐药谱不断在发生变化,特别是耐药性经常以多重耐药为特点,有时甚至

细菌耐药性及其临床意义

当前医院内外的新的耐药菌在不断出现,常导致手术治疗失败、并发症增多、感染复发、住院时间延长、昂贵抗生素及其它药物的使用增加等。耐药株还随着国际贸易及旅游业的高速发展而在全球蔓延。由于新抗生素的广泛使用,各个细菌对抗生素的耐药谱不断在发生变化,特别是耐药性经常以多重耐药为特点,有时甚

细菌耐药性及其临床意义

当前医院内外的新的耐药菌在不断出现,常导致手术治疗失败、并发症增多、感染复发、住院时间延长、昂贵抗生素及其它药物的使用增加等。耐药株还随着国际贸易及旅游业的高速发展而在全球蔓延。由于新抗生素的广泛使用,各个细菌对抗生素的耐药谱不断在发生变化,特别是耐药性经常以多重耐药为特点,有时甚至找不到可治之药

β-内酰胺酶单克隆抗体和多克隆抗体的制备(上)

β-内酰胺酶单克隆抗体和多克隆抗体的制备目前,在我国奶牛养殖业中,青霉素和头孢菌素等β-内酰胺类抗生素对奶牛乳房炎等疾病的控制起着十分重要的作用。由于一些奶牛养殖商户滥用抗生素以及未严格遵守休药期,致使牛奶中抗生素残留超标,乳中残留的抗生素严重危害食品安全和人体健康。我国政府对超过一定限量抗生素的原

β-内酰胺类抗生素

第三十六章  β-内酰胺类抗生素                 第一节  抗菌机制、作用类型及耐药

乳及乳制品中舒巴坦敏感β-内酰胺酶类药物检验方法

1 范围本标准规定了乳及乳制品中舒巴坦敏感β-内酰胺酶类药物的检验方法。本标准适用于乳及乳制品中舒巴坦敏感β-内酰胺酶类物质的检验。本方法的检出限为4U/mL。 2 原理该方法采用对青霉素类药物绝对敏感的标准菌株,利用舒巴坦特异性抑制β-内酰胺酶的活性,并加入青霉素作为对照,通过比对加入β

乳及乳制品中舒巴坦敏感β-内酰胺酶类药物检验 杯碟法

  1 范围   本标准规定了乳及乳制品中舒巴坦敏感β-内酰胺酶类药物的检验方法。   本标准适用于乳及乳制品中舒巴坦敏感β-内酰胺酶类物质的检验。   本方法的检出限为4U/mL。   2 原理   该方法采用对青霉素类药物绝对敏感的标准菌株,利用舒巴坦特异性抑制β-内酰胺酶的活性,

乳及乳制品中舒巴坦敏感β-内酰胺酶类药物检验方法

1 范围 本标准规定了乳及乳制品中舒巴坦敏感β-内酰胺酶类药物的检验方法。 本标准适用于乳及乳制品中舒巴坦敏感β-内酰胺酶类物质的检验。 本方法的检出限为4U/mL。 2 原理 该方法采用对青霉素类药物绝对敏感的标准菌株,利用舒巴坦特异性抑制β-内酰胺酶的活性,并加入青霉素

应用末端截切、进化、再延长技术提高酶稳定性的方法实验

实验材料质粒试剂、试剂盒DNase 缓冲液EDTA 溶液TBE 缓冲液丁醇转化盐储液氨芐储液悬浮缓冲液硼酸缓冲液仪器、耗材水浴锅分光光度仪分光荧光计实验步骤本章主要介绍提高蛋白质热稳定性的常规方法,而不需要在高温下筛选酶活性。介绍完 β 内酰胺酶模型系统(见 16.3.1 ),我们描述末端截切(见

应用末端截切、进化、再延长技术提高酶稳定性的...(三)

3.7 全长突变体的构建优化的 N△5-S3/6 被再延长来研究突变对被截切后的不稳定蛋白质的互补作用。根据图 16.2A,被截切的氨基酸重新被加上,从而得到全长基因——被命名为 FL-S3/6 的克隆。这个突变体定位在细胞间质,在 E.coli XL-1 Blue 中表达来检测体内功能。让

应用末端截切、进化、再延长技术提高酶稳定性的方法实验2

3.8 蛋白质表达及纯化 β-内酰胺酶突变体(野生型间质定位的、野生型胞质定位的、N△5、优化的 N△5-S3/6、N△5- S5/S7 和 FL-S3/6 胞质定位的突变体)在 lac 启动子下于 E.coli 细胞中带 His -tag 融合表达(见 16.3.8.1)。通过两步纯化反

解读第二批食品中违法添加的四种物质

      近日,卫生部公布了第二批“食品中可能违法添加的非食用物质名单”,其中包括:皮革水解物、溴酸钾、β—内酰胺酶、富马酸二甲酯。那么这四类“非食用物质”究竟是什么?常出现在哪些食品中?对人体有何健康危害?让我们来看看这些物质的真面目。    ■皮革水解物    可能添加的食品:乳制品、含乳饮料

细菌耐药性的产生机制及检测方法

一、细菌耐药性和产生机制1、细菌耐药性的概念:细菌的耐药性是指致病微生物对于抗菌药物作用的耐受性和对抗性。它是抗菌药物、细菌本身及环境共同作用的结果。它可分为天然耐药和获得性耐药,前者通过染色体DNA突变而致,后者大多是由质粒、噬菌体及其他遗传物质携带外来DNA片段导致的耐药性的产生。 2

你知道什么是ESBLs肺炎克雷伯菌吗?

肺炎克雷伯菌是肠杆菌科克雷伯菌属中非常重要的菌种之一,广泛分布于自然界的水和土壤中,是人类鼻咽部和肠道常居菌,也是常见的条件致病菌,可引起人类肺炎、脑膜炎、泌尿系统感染、脓毒症等各种感染性疾病,也是医院感染的重要病原菌之一。这些感染很多无明显特征,其严重性可能被低估。   肺炎克雷伯

你知道什么是ESBLs肺炎克雷伯菌吗?

肺炎克雷伯菌是肠杆菌科克雷伯菌属中非常重要的菌种之一,广泛分布于自然界的水和土壤中,是人类鼻咽部和肠道常居菌,也是常见的条件致病菌,可引起人类肺炎、脑膜炎、泌尿系统感染、脓毒症等各种感染性疾病,也是医院感染的重要病原菌之一。这些感染很多无明显特征,其严重性可能被低估。   肺炎

你知道什么是ESBLs肺炎克雷伯菌吗?

  肺炎克雷伯菌是肠杆菌科克雷伯菌属中非常重要的菌种之一,广泛分布于自然界的水和土壤中,是人类鼻咽部和肠道常居菌,也是常见的条件致病菌,可引起人类肺炎、脑膜炎、泌尿系统感染、脓毒症等各种感染性疾病,也是医院感染的重要病原菌之一。这些感染很多无明显特征,其严重性可能被低估。  肺炎克雷伯菌最重要的耐药

应用末端截切、进化、再延长技术提高酶稳定性的...(一)

实验材料 质粒试剂、试剂盒 DNase 缓冲液EDTA 溶液TBE 缓冲液丁醇转化盐储液氨芐储液悬浮缓冲液硼酸缓冲液仪器、耗材 水浴锅分光光度仪分光荧光计实验步骤 本章主要介绍提高蛋白质热稳定性的常规方法,而不需要在高温下筛选酶活性。介绍完 β 内酰胺酶模型系统(见 16.3.1 ),我们描述末

esbls菌是什么

肺炎克雷伯菌是肠杆菌科克雷伯菌属中非常重要的菌种之一,广泛分布于自然界的水和土壤中,是人类鼻咽部和肠道常居菌,也是常见的条件致病菌,可引起人类肺炎、脑膜炎、泌尿系统感染、脓毒症等各种感染性疾病,也是医院感染的重要病原菌之一。这些感染很多无明显特征,其严重性可能被低估。   肺炎

博纳艾杰尔提供粮油、乳品、 饲料检测新方案

        三聚氰胺、地沟油、麦乐鸡….食品安全已经日益引起我们的重视,如何更进一步了解我们日常所接触的食品?知道它们之中有哪些我们需要的成分和我们不需要的成分?博纳艾杰尔为您提供粮油、乳品、饲料检测新方案,有