“2010年中美英糖生物学研讨会”在上海召开

中美英科学家携手多糖研究“2010年中-美-英糖生物学研讨会”在上海召开 核酸、蛋白、糖是生物体内的“三驾马车”。继基因组学、蛋白质组学之后,糖生物组学又成为国际生物学领域激发新一轮“生命革命”的热点,吸引了世界各国科学家的目光。然而,无论是快速有效地进行糖的分离纯化和结构确定还是糖链的合成依然是摆在科学家面前的“世界级”难题。10月14日,中美英多糖研究领域的科学家齐集中科院上海药物研究所参加“2010年中-美-英糖生物学研讨会”。“多糖:从分子到功能到应用”是本次大会的主题,各国科学家围绕糖链对多种疾病的功能机制研究和方法学研究,带来了精彩纷呈的报告,共同搭建“中美英”三国多糖研究的交流桥梁,在交流中携手共进,共同推动多糖研究的发展。 越来越多的证据表明,无论是糖蛋白或蛋白聚糖,它们在一些重大疾病如肿瘤、神经退行性疾病、心血管病、代谢性疾病、免疫性疾病及感染性疾病的发生或发展中担任一些重要或关键角色。英......阅读全文

蛋白质的分离纯化根据蛋白质带电性质进行分离

蛋白质在不同pH环境中带电性质和电荷数量不同,可将其分开。1、电泳法各种蛋白质在同一pH条件下,因分子量和电荷数量不同而在电场中的迁移率不同而得以分开。值得重视的是等电聚焦电泳,这是利用一种两性电解质作为载体,电泳时两性电解质形成一个由正极到负极逐渐增加的pH梯度,当带一定电荷的蛋白质在其中泳动时,

现代生物分离技术在多肽蛋白质分离纯化中的应用

摘要:蛋白质是生物体的重要组成部分,在现代生物制药领域有着重要的作用,本文介绍了现代生物分离技术反胶束萃取、双水相萃取和电泳在多肽蛋白质分离中的应用和现状。关键词:蛋白质  反胶束萃取  双水相萃取  电泳一、前言随着基因工程和细胞工程的发展,尽管传统的分离方法(如溶剂萃取技术)已在抗生素等物质的生

ELISA方法学

ELISA方法用于杂交瘤和噬菌体展示筛选是最为广泛的高通量的抗体发现的筛选方法,其实质是亲和力测定方法的一种变种,其目的是需要建立ELISA信号值和样品亲和力大小之间的正相关性。相对于采用ELISA进行抗体的亲和力测定方法,用于杂交瘤和噬菌体展示筛选的ELISA方法有以下难点:待测样本极具多样性,且

细胞分离纯化—Ficoll密度梯度离心法分离外周血单核细胞

实验方法原理常用来分离人外周血单个核细胞(PBMC)的分层液比重是 1.077±0.001 的 聚 蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F/H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体,呈中性,水性高,平均分子量为400000,当密度为1.2 g/ml仍未超出正常生理性渗透压,也不穿过生

微生物酯酶的常规分离纯化技术

1超滤 超滤是应用压力或离心力,使小分子溶质和溶剂穿过必然孔径的特制的薄膜而使大分子溶质不能透过,留在膜的一边,从而使大分子物质得到了部分的纯化,按照蛋白质分子大小的不同而选择不同分子量的膜上,以达到浓缩和脱盐的目标,从而使蛋白质得到分离。  2盐析法  盐析一般是指溶液中加进无机盐类,蛋白质在低盐

如何进行质粒DNA的分离,纯化和鉴定

分离质粒时,可以将质粒去得很干净。方法为:先用TE之类的试剂将菌液悬浮起来,再用NaOH和SDS将菌液裂解(起裂解作用的主要是NaOH,但此时,SDS可以与蛋白很好的结合)。第三步,加入酸中合第二步中的碱,并且将SDS沉淀下来,同时,SDS和蛋白也一起沉淀下来,而基因组上面有很多的蛋白,这样基因组就

替普瑞酮(施维舒)分离纯化报告

替普瑞酮别名施维舒,是萜烯的衍生物,具有广谱抗溃疡作用,主要用作胃炎和胃溃疡的治疗。易溶于各种有机溶剂,分子量330。常用的检测方法是气相色谱法。采用HPLC 对样品进行分析,以205nm为检测波长,可以缩短分析时间,方便简单、准确。原样分析:分析方法:色谱柱:Kromasil 4.6*250mm

蛋白质特性与分离纯化技术的选择

摘要:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异,利用一种同时多种性质差异,在兼顾收率和纯度的情况下,选择蛋白质提纯的方法。关键词:蛋白质 分离纯化前言    蛋白质在组织或细胞中一般都是以复杂

蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定(2)

二、氯霉素酰基转移酶重组蛋白的分离,纯化 1. NTA层析柱的准备:在层析柱中加入1mL NTA介质,并分别用8mL 去离子水,8mL上样缓冲液洗涤。 2. 重组蛋白的变性裂解:在冰浴中冻融菌体沉淀,加入5mL上样缓冲液, 用吸管抽吸重悬,超声波破裂菌体,用振荡器等轻

蛋白质的表达、分离、纯化实验——层析法

蛋白质表达、分离、纯化可以:(1)探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理;(2)供作结构与功能的研究;(3)作为催化剂、营养剂等。实验方法原理携带有目标蛋白基因的质粒在大肠杆菌BL21中,在 37℃,IPTG诱导下,超量表达携带有6个连续组氨酸残基的重组氯霉素酰基转移酶蛋白,该蛋白可用一种通过共

蛋白质特性与分离纯化技术的选择

摘要:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异,利用一种同时多种性质差异,在兼顾收率和纯度的情况下,选择蛋白质提纯的方法。 关键词:蛋白质 分离纯化 前言 蛋白质

蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定(1)

第一部分 蛋白质的表达、分离、纯化目的要求(1)了解克隆基因表达的方法和意义。(2)了解重组蛋白亲和层析分离纯化的方法。实验原理克隆基因在细胞中表达对理论研究和实验应用都具有重要的意义。通过表达能探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理,同时克隆基因表达出所编码的蛋白质可供作结构与功能的研究。大肠

高速逆流色谱法分离纯化绿原酸研究

摘 要:利用高速逆流色谱技术分离纯化金银花中的绿原酸。选择正丁醇- 冰乙酸- 水(4:1:5,V/V)系统来分离,分离结果经高效液相(HPLC)检测纯度达到98.1%,绿原酸的得率为95%。关键词:绿原酸;高速逆流色谱;分离    绿原酸(chlorogenic acid)为多酚类化合物,具有抗菌、

盐析萃取偶联柱层析分离纯化血浆蛋白

血浆蛋白由数百种具有广泛生理功能的蛋白质组成,其中白蛋白与免疫球蛋白占据着血液制品中主要的市场份额。血浆成分十分复杂,目前工业上血浆蛋白的分离方法主要采用有机溶剂沉淀法、盐析法和柱层析,但这些方法尚存在着分离环境要求低温、分离纯化步骤繁琐、纯度和收率低等缺点。本论文开展了亲水性有机溶剂盐析萃取偶合柱

微生物酯酶的常规分离纯化技术

微生物酯酶的常规分离纯化技术  1.1超滤 超滤是利用压力或离心力,使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜而使大分子溶质不能透过,留在膜的一边,从而使大分子物质得到了部分的纯化,根据蛋白质分子大小的不同而选择不同分子量的膜上,以达到浓缩和脱盐的目的,从而使蛋白质得到分离。  1.2盐析法  盐析

蛋白质分离纯化的5种方法

蛋白质分离纯化常用方法有:1、沉淀,2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动.根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等.3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法.4、层析:a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离性质,在某一特定PH时,各蛋

蛋白质分离纯化的一般程序

  1、材料的预处理及细胞破碎  分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中稀释出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有:  1.1、机械破碎法  这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎。常用设备有,高速组织捣碎机、匀浆器、

如何从土壤中分离纯化某种微生物

先取土样,然后提纯稀释,放在选择培养基上.例如分离纯化能分解纤维素的微生物,就放在以纤维素为唯一碳源的培养基上.能存活的就是你要的了.

核酸分离与纯化过程中材料与方法

 (一)费氏弧菌发光杆菌材料与方法的选择临床常见的标本有血液、尿液、唾液、组织及培养细胞等;核酸分离与纯化的方法非常多,如何恰当地收集与准备材料,选择适宜的分离与纯化方法是一个首要的问题。首先我们应当明确核酸的分离与纯化并不是zui终的目的,不同的实验研究与应用对核酸的产量、完整性、纯度和浓度可能有

溶菌酶分离纯化及酶活力、蛋白浓度测定1

一、实验目的和内容目的:1. 通过本次实验的学习和操作,要求学生掌握离子层析的原理以及离子交换层析的操作方法;2. 掌握离子交换树脂的再生和保存;3.掌握比色法测定溶菌酶的酶活。内容:采用离子交换层析对实验二获得的初提液,进行进一步的分离纯化以得到较高纯度的溶菌酶。具体来说包括:1.离子交换层析分离

蛋白质分离纯化的一般程序

蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有:1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎。常用设备有

微生物接种、分离纯化和培养技术(二)

(二)分离纯化含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物(Mixed culture)。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养(Pure culture)。在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化,方法有许多种。1、倾注平

溶菌酶分离纯化及酶活力、蛋白浓度测定3

同时,为了监测分离纯化的效果,我们必须对相应的结果进行检测。对于酶而言,主要通过其催化特异的反应进行监测。溶菌酶对革兰氏阳性菌的细胞壁有明显的破坏作用,可利用这一特性进行溶菌酶活性的监测,以便我们区分在纯化过程中,含有溶菌酶的组分。类似的采用 DEAE- 纤维素对抗体进行精制,特别是经过初步纯化后的

蛋白质特性与分离纯化技术的选择

摘要:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异,利用一种同时多种性质差异,在兼顾收率和纯度的情况下,选择蛋白质提纯的方法。关键词:蛋白质 分离纯化前言    蛋白质在组织或细胞中一般都是以复杂

带你走进中药药学研究(技术)——分离纯化与测试

随着中药科技的不断发展,近年来出现了诸多新技术、新方法,如中药分离纯化技术与测试、仿生提取法、高速离心分离技术等。这些新技术和方法的应用,使得中药分离既符合传统的中药理论;又能达到高效分离和纯化的目的,本文简要介绍了该方法原理及具体的实操方式(实例),这些技术在中药分离纯化的研究方面有着重要的参考价

分离纯化厌氧菌大概需要什么设备和仪器

(1)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,表格中能充当碳源的成分是牛肉膏.(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是平板划线法和稀释平板涂布法,在接种过程中,接种针或涂布器的灭菌方法是 灼烧灭菌.(3)如果培养基上细菌数目过多连成一片,可能的原因是菌液浓度过高或操作过程不是无

生物分离纯化:难跑的最后一棒

科学家利用层析系统开发高效的蛋白分离介质   注射疫苗出现副作用,使用血液制品感染疾病,热销的生物制品紧急召回……这样的消息接连见诸报端。这在国家生化工程技术研究中心(北京)首席科学家苏志国看来,出现上述问题的背后,可能都是生物分离纯化技术不过关在“捣鬼”。   “生物制药对纯度要求颇高,需要通

蛋白质分离纯化研讨班举办通知

  近年来中国生物工程杂志社(中国生物工程学会、中国生物技术发展中心、中国科学院文献情报中心主办)围绕蛋白质分离纯化与抗体制备、生物工程下游技术、蛋白组学技术与应用等主题多次成功举办了专题研讨班,受到了国内生物技术研发与产业界的普遍欢迎。应广大参会代表的要求,现定于2009年10月24-25日在北京

溶菌酶分离纯化及酶活力、蛋白浓度测定2

2.加样蛋白浓度低于20 mg/mL,上样体积小于柱体积的1/3。3. 在整个实验过程中,流速必须得到一定的控制。过大,会使填料压缩紧密,导致流速过低,层析柱有可能堵塞而实验失败,流速过小,实验时间过长,引起酶的活性变化。对于CM Sepharose FF填料,最适流速在100cm/h以下。

信使核糖核酸的提取、分离和纯化介绍

  真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。这种结构为真核mRNA的提取,提供了极为方便的选择性标志,寡聚(dT)纤维素或寡聚(U