PNAS:调节性T细胞标记物研究进展
调节性T细胞(Treg)是机体控制自身免疫及过度的炎症反应的重要调节因子。FoxP3(transcription factor Forkhead box P3)作为一类转录因子特异性表达于Treg细胞中,因此是Treg细胞典型的标记物。FoxP3的缺失能够引起人与小鼠多种免疫紊乱疾病,内分泌腺病、肠下垂等的发生。此外,在肠炎、风湿性关节炎、多发性硬化、红斑狼疮等疾病的发生过程中Treg的功能也受到了影响。 尽管FoxP3是Treg细胞非常重要的分子,然而它具体的分子机制却仍不清楚。作为转录因子,FoxP3被发现能够与多种配体结合调控下游基因的表达,比如FoxP3可以与FoxP1结合形成异源二聚体抑制IL-2的表达。此外,FoxP3也能够与其它转录因子结合发挥功能。 最近,来自上海生科院的Bin Li等人在《PNAs》杂志发表了最新研究,揭示了DBC1(deficient in breast cancer 1)是FoxP3......阅读全文
小鼠角质细胞的分离和培养
实验步骤1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗,然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 将小鼠从尾巴至鼻子的皮肤作一简单切口,用大鼠牙齿镊轻轻将整个身体的皮肤剥下,用一把镊子夹住身体,另一把镊子拉开皮肤。4) 将
小鼠精原细胞的分离和纯化
【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布
小鼠肝细胞原代培养实验
胰酶消化法 实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。
小鼠腹腔巨噬细胞培养实验
小鼠腹腔巨噬细胞培可以:(1)吞噬与清除异物;(2)分泌生物活性物质;(3)对仿生全降解材料,降解后的无机产物与生命过程中有机物的合成作用。实验方法原理取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。实
小鼠角质细胞的分离和培养
实验试剂HBSS: NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L无水Na2PO4 47.86mg/L无水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L实验材料妊娠期BALB/c小鼠实验步骤将1~2天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠,流水彻底
小鼠精原干细胞分离培养
实验概要小鼠精原干细胞分离培养主要试剂0.1%明胶、DPBS、0.25%胰蛋白酶、400目细胞筛、精原干细胞培养液、1 mg/mL胶原酶Ⅳ、7 mg/mLDNase、细胞基础培养液、DMEM-C、精原干细胞冻存液(Kubota et. al., 2004a and 2004b)(4℃条件下可
制备小鼠T细胞杂交瘤
可通过将活化的T 细胞和肿瘤细胞融合获得T 细胞杂交瘤。异质性的杂交瘤可以通过有限稀释法克隆获得表达特异性T 细 胞 受 体 (T C R ) 的杂交瘤。杂交瘤可以在缺乏生长因子的条件下大量的扩增。研究证明,杂交瘤对研究T C R 特异性识别抗原以及C D 3-T C R 复合物的生物化学和分子生物
小鼠角质细胞的分离和培养
实验试剂HBSS: NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L无水Na2PO4 47.86mg/L无水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L实验材料妊娠期BALB/c小鼠实验步骤1. 将1~2天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠,流
小鼠精原细胞的分离和纯化
实验概要精原细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化、运动、衰老、死亡等项生命活动的调节机制的深入研究,精子发生机理的进一步阐明以及精原细胞异体、异种移植技术的实际应用,都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化,以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞,用于体外培养。资料表明,从成年啮齿类的睾丸分离粗线
小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验
目的要求1.了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2.熟悉细胞吞噬作用的基本过程基本原理细胞的吞噬作用在单细胞动物是摄取营养物质的方式,在高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能,是机体非特异性免疫功能的重要组成部分。巨噬细胞是由骨髓干细胞分化生成,当病原微生物或其他异物侵入机体时,巨
小鼠单个核细胞的分离实验
基 本 方 案 从 脾 脏 、胸腺和淋巴结制备细胞悬液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培养基新鲜分离的小鼠器官: < 6 周龄的小鼠胸腺; 6 周 至 6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结60 mmX 15 mm 培养皿剪 刀 和 镊 子(保 存 在 7 0 % 乙醇的烧杯中)装 有 19 G 针
小鼠胚胎干细胞的培养
完全培养基: 高糖DMEM (GIBCO 12430); 15%胎牛血清(BIOCHROM S0615); 0.1 mmol/L非必需氨基酸(GIBCO 11140-050); 2 mmol/L谷氨酰胺(GIBCO 25030); 0.1 mmol/L β-巯基乙醇(GIBCO 21985); 1
小鼠胚胎干细胞的培养
实验概要了解小鼠胚胎干细胞的培养方法。主要试剂1. 贮存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺(200mM) MEM NEAA(10mM) HEPES(1M) β-巯基乙醇(55Mm) 转铁蛋白50mg/ml 胰岛素5mg/ml 亚硒酸钠300μM 黄体酮(20μM) 腐
小鼠腹腔巨噬细胞原代培养
实验方法原理 巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。 巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P331、S774A.1、RAW309
小鼠腹腔巨噬细胞培养实验
细胞培养技术 实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百
小鼠肝细胞原代培养实验
胰酶消化法 实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。
小鼠单个核细胞的分离实验
实验步骤基 本 方 案 从 脾 脏 、胸腺和淋巴结制备细胞悬液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培养基新鲜分离的小鼠器官: < 6 周龄的小鼠胸腺; 6 周 至 6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结60 mmX 15 mm 培养皿剪 刀 和 镊 子(保 存 在 7 0 % 乙醇的烧杯中)装 有 19
小鼠多能ES细胞的增殖实验
试剂、试剂盒 PBS 胰酶溶液 仪器、耗材 MEF 滋养板 巴斯德吸管 ES 生
小鼠角质细胞的分离和培养
实验概要本实验是根据Hennings等(1980)的方法改进而来的。该方案也适用于原代大鼠角质细胞的分离。主要试剂HBSS: NaCl 8g/L KCl 400mg/L KH2PO4 60mg/L 无水Na2PO4 47.86mg/L 无水葡萄糖 1000mg/L NaHCO3 350mg/L实验
小鼠肝细胞原代培养实验
小鼠肝细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法胰酶消化法实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEM 无血清DMEM
小鼠神经干细胞的分离
实验概要小鼠神经干细胞的分离主要试剂0.05% Trpsin、神经干细胞的分离溶液Ⅰ、神经干细胞的分离溶液II、神经干细胞的分离溶液III、神经干细胞培养液主要设备15 mL、50 mL离心管,10%FBS包被的玻璃巴斯德管,70 μm细胞滤膜,4℃低温离心机实验步骤(1)用10%FBS(vol/v
大鼠、小鼠心脏干细胞(祖细胞)分离培养方法
心脏病是引起人类死因的一种代表性疾病,如果失去了心肌细胞,就会引起心力衰竭等心脏疾病。心肌细胞几乎没有再生能力,一旦失去就不能再生。从前认为心脏当中没有干细胞,所以心肌没有再生能力,但是近年的研究表明,成体心脏内部也会存在一些心肌干细胞。细胞培养操作:1.摘取出心脏,去掉心脏包膜,把心尖部分剪下来(
小鼠肝细胞培养实验——细胞培养技术
实验方法原理直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研
小鼠神经干细胞分化为星形胶质细胞
实验概要小鼠神经干细胞分化为星形胶质细胞主要试剂无菌水、DPBS、0.05%胰蛋白酶胰蛋白酶、细胞基础培养液、 PDL、laminin、小鼠神经分化培养液(Neuron M)、小鼠神经干细胞向星形胶质细胞分化培养液主要设备4孔板、12mm细胞培养玻片实验步骤 在4孔板每个孔中放置一块12mm细胞培养
细胞技术专题:小鼠腹腔巨噬细胞培养实验
小鼠腹腔巨噬细胞培可以:(1)吞噬与清除异物;(2)分泌生物活性物质;(3)对仿生全降解材料,降解后的无机产物与生命过程中有机物的合成作用。实验方法细胞培养技术实验方法原理取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬
流式细胞术急性分离小鼠小胶质细胞
实验步骤1. 小鼠用pH值7.4,0.1M PBS彻底穿心灌注。2. 用剪刀去头。3. 剥开头骨的软组织。4. 除去下颌骨。5. 除去头骨延髓到上颌骨之间的组织。6. 手术剪刀,取出头骨顶部,顺时针方向切割,开始和结束于右后鼓膜钩。7. 舀出大脑,维持组织的完整性。8. 立即将脑组织置于预冷的流式细
流式细胞术急性分离小鼠小胶质细胞
实验概要本文主要讲述了:从成年小鼠脑中分离单细胞,制成单细胞悬液,我们一个单细胞分离成单细胞悬液,除去髓鞘碎片,然后染色标记,以确定小胶质细胞的成分。细胞被固定,在多色流式细胞仪上读取。实验步骤1. 小鼠用pH值7.4,0.1M PBS彻底穿心灌注。 2. 用剪刀去头。 3. 剥开头骨的软组织。 4
磁珠法分离小鼠T细胞和B细胞
PriCells: 磁珠法分离小鼠T细胞和B细胞 基本方案用AUTOMACS系统进行总T细胞、CD4+细胞或CD8+T细胞的自动分离 实验材料1、小鼠2、HBSS洗涤缓冲液3、MACS缓冲液4、磁珠5、RPMI-10完全培养基6、AUTOMACS系统和分选柱7、30μm尼龙网或40μm预分离滤膜 实
小鼠骨髓细胞染色体标本制作[细胞遗传]
一、实验目的和要求 通过这一实验,要求学生了解哺乳动物染色体标本的制作方法,并对动物染色体进行观察。 二、实验原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中
小鼠肌肉原代细胞的分离和生长(没有细胞分类)
实验材料新生的小鼠试剂、试剂盒乙醇PBS胶原蛋白酶 分散酶 氯化钙溶液F-10肌肉原代细胞培养基分化培养基仪器、耗材用于断头术的器具或者是用于二氧化碳吸人的装置锋利的弯手术剪(灭菌)组织培养板灭菌的剃刀刀片尼龙网桌面离心机胶原包被的组织培养板带相位光轴的倒置显微镜实验步骤1.用断头术或者二氧化碳吸入