多位中国学者合作发文:世界首个基因敲除狗模型
近日,中科院广州生物医药与健康研究院、南京大学-南京生物医药研究院和广州医药研究总院合作,利用CRISPR/Cas9技术成功培育两只肌肉生长抑制素(Myostatin)基因敲除狗,从而在世界上首次建立了狗的基因打靶技术体系,该研究成果已被国际学术期刊Journal of Molecular Cell Biology在线发表。 狗是人类最早驯化的动物之一,千百年来,狗作为人类的同伴,被用于看家护院、狩猎、导盲、警用及救援等工作。狗在营养代谢、生理解剖等方面与人类极其相似,因此狗也是研究人体生理和疾病发生机理的理想实验动物,基因敲除狗的培育将为开发人类疾病疗新的治疗手段和药物提供新的实验动物模型,也将加速培育出更多含优遗传良性状狗的新品系。 近年来,基因敲除技术,如TALEN技术和CRISPR/CAS9技术的出现,使得基因敲除在哺乳动物,特别是大型哺乳动物中变得更加有效和简便,大型哺乳动物,如牛、羊、猪、猴等都通过CRI......阅读全文
大肠杆菌基因组基因无痕敲除的优化方法
近几十年来, 大肠杆菌是基因工程、 代谢工程和合成生物学等领域的重要工具菌株,是生产重组蛋白、氨基酸、有机酸、能源物质和一些重要化工产品的主力微生物之一。为使大肠杆菌获得新的性状和生产能力, 基因敲除及基因敲入是构建新型大肠杆菌的重要手段。 近几十年来, 大肠杆菌是基因工程、 代谢工程和合成
文献中遇到的实验动物知识:基因敲除小鼠
投稿人:郭晓冲 中国医科大学动物部 写给看文献的你们: 我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识,希望对大家有帮助。为了便于理解,语言偏通俗,可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识,欢迎选修实验动物学。 第一集,关于基因敲除小鼠。 基因敲除小鼠(Knoc
基因敲除小鼠在抗体药物研发平台的应用
“千鼠万抗”计划 (Project Integrum) 是百奥赛图抗体药物研发平台的重要组成部分。目标是利用3-5年时间,在全人抗体小鼠RenMab上,逐一对上千个潜在抗体药物靶点进行基因敲除,并利用这些基因敲除小鼠制备抗体的计划。其主要内容包括: 在RenMab上完成1000多个Targets的
遗传学新动向:人类基因敲除研究
数十年来,生物学家们一直在小鼠或其他动物模型中,通过失活目的基因来进行功能研究。现在这种基因敲除(knockout)研究有了更理想的模型,那就是人类。 当然,这并不是说像处理小鼠那样,对人类进行遗传学改造。事实上,研究者们是通过分析成百上千的人类基因组,在其中寻找失活某个基因的天然突变。他们希
一步生成条件性基因敲除小鼠ESC
最近发展的基因组编辑工具,包括转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)和CRISPR/Cas9,使我们能够通过诱导双链断裂(DSBs)的非同源末端连接(NHEJ)修复,快速而有效的敲除靶向基因。然而,这种方法不能进行必需基因的功能研究,这类研究通常采用的策略是基于Cre-LoxP系统的条件性基
文献中遇到的实验动物知识:基因敲除小鼠
投稿人:郭晓冲 中国医科大学动物部 写给看文献的你们: 我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识,希望对大家有帮助。为了便于理解,语言偏通俗,可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识,欢迎选修实验动物学。 第一集,关于基因敲除小鼠。 基因敲除小鼠(Knoc
文献中遇到的实验动物知识:基因敲除小鼠
我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识,希望对大家有帮助。为了便于理解,语言偏通俗,可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识,欢迎选修实验动物学。第一集,关于基因敲除小鼠。基因敲除小鼠(Knockout Mice),人们使用复杂的方法使小鼠体内的某一个基因不表达,从而使小鼠呈现这个
基因敲除小鼠在抗体药物研发平台的应用
“千鼠万抗”计划 (Project Integrum) 是百奥赛图抗体药物研发平台的重要组成部分。目标是利用3-5年时间,在全人抗体小鼠RenMab上,逐一对上千个潜在抗体药物靶点进行基因敲除,并利用这些基因敲除小鼠制备抗体的计划。其主要内容包括: 在RenMab上完成1000多个Ta
CRRSPR/Cas9基因敲除系统之sgRNA设计
sgRNA设计网站介绍sgRNA的在线设计网站有:1、http://crispr.mit.edu/ ;2、http://www.e-crisp.org/E-CRISP/;等网站。这些网站虽然一定程度上满足了部分研究 者的需要,但仍然存在很多不足和缺陷。例如:1、数据分析周期长;2、无具体的脱靶数据;
基因敲除的不简单论p53基因的重要性
p53基因位于17号染色体p13,全长16-20kb,含有11个外显子,转录2.8kb的mRNA,编码一种分子量为43.7KDa的P53蛋白质,是一种核内磷酸化蛋白。因蛋白条带出现在Marker所示53KDa处,命名为P53。p53基因是人体一种肿瘤抑制基因(tumor suppressor g
科学家通过基因敲除发现了听力损伤的关键基因
最近,来自Harwell医学研究委员会(MRC Harwell)的科学家在对超过3000个小鼠基因进行试验后,发现了52个之前未被鉴定的对听力至关重要的基因。通过国际小鼠表型联盟(IMPC)领导了这一研究的科学家表示,这些新发现的基因将为人类听力损失的原因提供见解。 这项发表在Nature
基因敲除的不简单论p53基因的重要性
p53基因位于17号染色体p13,全长16-20kb,含有11个外显子,转录2.8kb的mRNA,编码一种分子量为43.7KDa的P53蛋白质,是一种核内磷酸化蛋白。因蛋白条带出现在Marker所示53KDa处,命名为P53。p53基因是人体一种肿瘤抑制基因(tumor suppressor gen
中国科学家实现灵长类动物基因定向敲除
这是两只运用CRISPRA/Cas9技术成功实现基因靶向修饰的食蟹猴(1月10日摄)。 记者从云南省科技厅获悉,经过近一年的努力,中国科学家在云南昆明成功培育了多只被去除特定基因的猴子,实现了基因靶向修饰技术在灵长类动物身上的应用,并于近期在国际权威学术刊物发表了相关成果,将为人类遗传疾病
旅美华裔学者直接参与“基因敲除小鼠”试验
70岁的意大利裔美国人卡佩基等美英三位学者本月8号获得今年的诺贝尔生理学或医学奖。旅美华裔学者邓初夏当年曾是卡佩基科研团队的成员。日前他在接受本台驻美国记者采访时,谈到了自己参与“基因敲除小鼠”试验的感受。 1986年,邓初夏考入犹他大学研究生院,师从卡佩基,成为从事“基因敲除”试验的第一个研究
Nature方法:大型单基因敲除人类单倍体细胞库
由奥地利科学院和维也纳Haplogen的研究人员领导的一个研究小组,利用一种称之为“基因捕获”( gene trap)的技术构建出了一个人类单倍体细胞库,该细胞库中包括有3000多种细胞系,每个细胞系都具有一种不同的突变基因。这项研究工作发布在8月25日的《自然方法》(Nature Me
湖北农科院用CRISPR制备基因敲除克隆猪
来自湖北省农科院畜牧兽医研究所、河南科技大学和中科院水生生物研究所的研究人员,用CRISPR/Cas9系统和Cre/LoxP,敲除了猪初生细胞中肌生成抑制蛋白(MSTN)的一个等位基因,制备了无选择标记的MSTN基因敲除克隆猪。相关研究结果发表在8月17日的《Scientific Reports
基因敲除(KO)在验证抗体特异性的应用
抗体作为基础科学研究和临床试验常用的工具之一,主要通过抗原-抗体的反应揭示蛋白质在生命活动中的变化。尽管它们被广泛的使用,但是没有相关标准以确保商业抗体特异性和质量上的一致性。这使得科学界一直存在“重现危机”,浪费了科学家们大量的时间和金钱,妨碍生命科学研究的快速发展。因此,对抗体进行敏感性和特异性
新一批敲除小鼠序列数据存入基因银行
美国得克萨斯州基因组医学研究所将其敲除小鼠库的超过275000个核苷酸序列信息存入了美国国立卫生研究院的基因银行。 以休斯敦为根据地的得克萨斯州基因组医学研究所于今年5月加入国际敲除小鼠协会。在美国国立卫生研究院号召在国际科学界广泛分享小鼠研究信息后,该研究所表示愿意向美国健康研究院提供基因序列
华人科学家首次培育出基因敲除大鼠
可能在不久的未来,大鼠将会代替小鼠,重新成为实验室里的头号“动物明星”。最近,国际顶级学术期刊《自然》发表了华人科学家的最新成果——首次培育出了基因敲除的大鼠。这一突破解开了20多年来“无法用基因敲除的方法来构建大鼠疾病动物模型”的难题,使得这种“与人类更接近”的动物能更好地为人类疾病
设计cas9条件性基因敲除小鼠
其关键是构建带有两个Loxp位点的小鼠,即flox(flanked by loxP)小鼠。今天我们就来详细介绍一下如何设计。共分三步:第一步,选择外显子。第二步,设计sgRNA。第三步,设计SSODN。听起来蛮简单的哈?下面我们详细讲讲。第一步,选择外显子。1. 尽量选择敲除所有转录本共用的外显子。
世界首例利用锌指核酸酶技术培育的内源性基因敲除猪诞生
中国科学院广州生物医药与健康研究院赖良学教授领导的研究团队与美国密歇根大学心血管研究中心陈育庆教授领导的研究团队合作,首次将锌指核酸酶基因打靶技术应用于猪内源性基因敲除研究,成功敲除了猪内源性PPARγ基因。此研究在世界上首次建立了对糖尿病和心血管并发症的研究有重要应用价值的PPARγ基因敲除猪
广州生物院等建立世界首个基因敲除狗模型
近日,中国科学院广州生物医药与健康研究院和南京大学-南京生物医药研究院、广州医药研究总院等合作,利用CRISPR/Cas9技术成功培育两只肌肉生长抑制素(MSTN)基因敲除狗,在世界上首次建立了狗的基因打靶技术体系。该成果于10月12日在线发表于Journal of Molecular Cell
Nature关注遗传学新动向:人类基因敲除研究
数十年来,生物学家们一直在小鼠或其他动物模型中,通过失活目的基因来进行功能研究。现在这种基因敲除(knockout)研究有了更理想的模型,那就是人类。 当然,这并不是说像处理小鼠那样,对人类进行遗传学改造。事实上,研究者们是通过分析成百上千的人类基因组,在其中寻找失活某个基因的天然突变。他们希
条件性基因敲除的基本原理Flp/FRT系统
条件性基因敲除的基本原理 Flp / FRT 系统该系统与Cre/loxP系统相同,也是由一个重组酶 和一段特殊的DNA序列组成。从进化的角度上考虑,Flp/FRT系统是Cre/loxP系统在真核细胞内的同源系统。其中.重组酶Flp是酵母细胞内的一个由423个氨基酸组成的单体蛋白。与Cre相似,Fl
斑马鱼的基因敲除定制(Cas9KO)法介绍
利用 CRISPR/Cas9 技术,针对靶基因序列设计 sgRNA, 指导 Cas9 蛋白在特定基因位点引起 DNA 双链断裂,在非同源性末端接合修复断裂 DNA 的过程中,靶基因碱基突变或缺失被引入到斑马鱼基因组中,最终导致靶基因无法正常转录翻译,达到基因敲除的目的。目前我们利用 CRISPR
斑马鱼的基因敲除定制(Cas9KO)法介绍
利用 CRISPR/Cas9 技术,针对靶基因序列设计 sgRNA, 指导 Cas9 蛋白在特定基因位点引起 DNA 双链断裂,在非同源性末端接合修复断裂 DNA 的过程中,靶基因碱基突变或缺失被引入到斑马鱼基因组中,最终导致靶基因无法正常转录翻译,达到基因敲除的目的。目前我们利用 CRIS
利用I型CRISPRCas系统实现大片段基因敲除
CRISPR-Cas系统是细菌和古细菌中广泛存在的一种由RNA介导抵抗外援病毒或者核酸入侵的“获得性免疫系统”。CRISPR-Cas系统主要分为两大类:I类(Class I)利用多亚基效应复合物来实现对靶标序列的识别和切割过程;而II类(Class 2)则由单一蛋白来执行相关功能,作用机制相对简
朱强课题组建立麻竹内源基因的敲除的基因编辑系统
福建农林大学教授朱强课题组以东南亚地区广泛种植的麻竹为材料,建立了适合麻竹内源基因的敲除的基因编辑系统,实现了对麻竹基因的定点敲除。相关成果近日发表于《植物生物技术杂志》。该研究为竹子分子生物学的发展及通过分子育种方法进行竹子农艺性状的改良提供了有力的技术支撑。图片来源于网络 目前,世界上约有
如何让基因敲除效率提升3倍,价格降低一半?
CRISPR/Cas9基因编辑技术以它效率高、操作简便、成本低等特点被广泛应用于基因敲除小鼠实验中,但是在将RNAs注入受精卵的环节中,传统的显微注射技术需要借助显微操作系统人工逐个进行受精卵注射,十分耗时。同时,想要提高基因敲除的成功率,需要获得更多受精卵,再加上人工设计基因打靶方案耗时费力,
研究热点常用明星小鼠资料分享Fgf21基因敲除小鼠
赛业生物CRISPR-AI敲除小鼠精子库推出两年多来,已推动2000+个课题组加速研究进展,帮助300+家企业在药物研发上争分夺秒。我们统计分析了最畅销的十种CRISPR-AI敲除小鼠品系,或许这反映了目前的一些研究热点。这些品系涵盖了代谢疾病、神经科学、免疫和炎症、肿瘤、m6A甲基化修饰及相关