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利用I型CRISPRCas系统实现大片段基因敲除

CRISPR-Cas系统是细菌和古细菌中广泛存在的一种由RNA介导抵抗外援病毒或者核酸入侵的“获得性免疫系统”。CRISPR-Cas系统主要分为两大类:I类(Class I)利用多亚基效应复合物来实现对靶标序列的识别和切割过程;而II类(Class 2)则由单一蛋白来执行相关功能,作用机制相对简单【1】,其中Cas9, Cas12以及Cas13 已被开发成高效的基因编辑工具或者核酸检测工具,并被广泛应用。I类中的Type I系统是在细菌中分布最广泛的CRISPR-Cas,约占目前已发现CRISPR-Cas系统的近一半。以Type I系统中研究最为清楚的I-E亚型为例,该亚型对靶标DNA的识别依赖于一个由5个不同蛋白组成的超大复合物Cascade,对靶标DNA的切割则是由一个有解旋酶核酸酶双重功能的特征性蛋白Cas3来执行。只有当CRISPR RNA和靶标DNA完全互补配对(32 bp)且最终形成R-loop时,Cas3才会特......阅读全文

基因编辑crispr原理

ZFNZFN,即锌指核糖核酸酶,由一个 DNA 识别域和一个非特异性核酸内切酶构成。DNA 识别域是由一系列 Cys2-His2锌指蛋白(zinc-fingers)串联组成(一般 3~4 个),每个锌指蛋白识别并结合一个特异的三联体碱基。锌指蛋白源自转录调控因子家族(transcription fa

基因编辑crispr原理

ZFNZFN,即锌指核糖核酸酶,由一个 DNA 识别域和一个非特异性核酸内切酶构成。DNA 识别域是由一系列 Cys2-His2锌指蛋白(zinc-fingers)串联组成(一般 3~4 个),每个锌指蛋白识别并结合一个特异的三联体碱基。锌指蛋白源自转录调控因子家族(transcription fa

基因编辑crispr原理

ZFNZFN,即锌指核糖核酸酶,由一个 DNA 识别域和一个非特异性核酸内切酶构成。DNA 识别域是由一系列 Cys2-His2锌指蛋白(zinc-fingers)串联组成(一般 3~4 个),每个锌指蛋白识别并结合一个特异的三联体碱基。锌指蛋白源自转录调控因子家族(transcription fa

研究发现I型Crispa系统用于“切割”-“粘贴”基因

  修复有缺陷的基因以预防和治愈疾病是研究人员多年努力的方向。尽管2类CRISPR系统作为人类细胞中的基因编辑工具显示出巨大的希望。然而,在本月发表于《Nature Communications》杂志上的一项研究中,由大阪大学领导的日本研究人员描述了一种新的基因组编辑方法:基于Cas3的1类CRIS

抗铜绿假单胞菌I-E型CRISPR-Cas的噬菌体蛋白质结构

  本研究首次对铜绿假单胞菌抗I-E型CRISPR/Cas系统蛋白AcrE1进行了结构解析,分析了AcrE1作用的机理,并且利用AcrE1蛋白将铜绿假单胞菌內源的I-E型CRISPR系统变成了基因组调控工具。   image.png   CRISPR/Cas广泛存在于细菌和古细菌中,是细胞保护自

利用I型CRISPR-Cas系统实现大片段基因敲除

  CRISPR-Cas系统是细菌和古细菌中广泛存在的一种由RNA介导抵抗外援病毒或者核酸入侵的“获得性免疫系统”。CRISPR-Cas系统主要分为两大类:I类(Class I)利用多亚基效应复合物来实现对靶标序列的识别和切割过程;而II类(Class 2)则由单一蛋白来执行相关功能,作用机制相对简

Nucleic Acids Research:CRISPR实现可逆的基因沉默

  北卡罗莱纳州立大学的研究人员利用细菌和古生菌自身的免疫系统,开发了可逆的基因沉默技术。这一成果发表在近期的Nucleic Acids Research杂志上,为相关领域的研究提供了一个强大的工具。  “这一技术不仅能够加快科研发现,还能帮助我们更好的改造微生物,”文章的资深作者,北卡罗莱纳州立大

Mol Cell:可爱龙团队开发出高效快速核酸分子诊断工具

  CRISPR-Cas 系统是原核生物一种抵御外来入侵核酸的免疫系统,已被广泛用于真核细胞的基因组编辑。目前基于 CRISPR-Cas 的基因编辑技术已广泛应用于遗传育种、新药开发、疾病治疗、动物模型构建、转录调控以及分子诊断等各领域。被誉为在后基因组时代开创了遗传疾病精准治疗的新时代。  CRI

浙江大学Nature子刊聚焦CRISPR–Cas的抑制系统

  来自浙江大学生命科学研究院的研究人员揭示出了,噬菌体蛋白AcrF3抑制Cas3的结构基础。他们的研究结果发布在7月25日的《自然结构与分子生物学》(Nature Structural & Molecular Biology)杂志上。  浙江大学生命科学研究院的朱永群(Yongqun Zhu)教授

国际期刊评论CRISPR基因疗法

  在医疗领域,基因编辑技术可以更加准确、深入地了解疾病发病机理和探究基因功能,可以改造人的基因,达到基因治疗的目的等。今年五月份,来自中山大学的遗传学,在世界上首次尝试使用CRISPR–Cas9基因组编辑技术,修改来自人类胚胎的疾病相关DNA,从而引发了科学界的激烈争论。这篇论文发表在五月份的《P