大化所代谢酶特异性探针底物研发取得新进展

近日,我所药用资源开发研究组(1806组)杨凌研究团队采用计算机辅助筛选及酶催化位点局部改造的策略成功设计研发了首个细胞色素P450 1A1亚酶的高特异性荧光探针底物,相关研究成果发表在Chemical Science上(DOI:10.1039/C6SC03970G)。 酶是生物体内分布的具有催化活性的一类蛋白质。人体内分布了数千种代谢酶,其可催化6000余种生化反应并在内源性代谢和外源物代谢处置中发挥着至关重要的作用。长期以来,设计开发亚型特异性的探针底物一直是生物医药领域的一大挑战。该研究中,研发人员以细胞色素P450 1A(CYP1A)家族为研究对象,基于CYP1A1与CYP1A2在催化活性空腔上的微小差别,采用酶催化位点局部改造的策略,并借助计算机辅助筛选及代谢表型筛选设计合成了首个CYP1A1亚型选择性的荧光探针底物。该探针对目标酶具有极高的特异性,不仅可实现CYP1A1与CYP1A2等相似亚型酶间的区分,同时其......阅读全文

Chemical-Science:-酶特异性探针底物研发新策略

  近日,中科院大连化学物理研究所杨凌团队探索出酶特异性探针底物的研发新策略,该团队采用计算机辅助筛选及酶催化位点局部改造的策略成功设计研发了首个细胞色素P450 1A1亚酶的高特异性荧光探针底物。相关研究成果以“A practical strategy to design and develop

中国学者J-Med-Chem发文:-胆红素代谢酶特异性荧光探针底物

  近日,上海中医药大学交叉科学研究院葛广波、杨凌团队研发了一种全新的胆红素代谢酶(UGT1A1,又称尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A1)特异性荧光探针底物,并将其用于人肝细胞/组织制备物中UGT1A1的活性检测以及UGT1A1抑制剂和诱导剂的高通量筛选等研究,相关工作在线发表在美国化学会著名学术刊物

大连化物所代谢酶特异性探针底物研发取得新进展

  近日,中国科学院大连化学物理研究所药用资源开发研究组杨凌研究团队采用计算机辅助筛选及酶催化位点局部改造的策略成功设计研发了首个细胞色素P450 1A1亚酶的高特异性荧光探针底物,相关研究成果发表在《化学科学》(Chemical Science,DOI:10.1039/C6SC03970G)上。 

大化所代谢酶特异性探针底物研发取得新进展

  近日,我所药用资源开发研究组(1806组)杨凌研究团队采用计算机辅助筛选及酶催化位点局部改造的策略成功设计研发了首个细胞色素P450 1A1亚酶的高特异性荧光探针底物,相关研究成果发表在Chemical Science上(DOI:10.1039/C6SC03970G)。  酶是生物体内分布的具有

如何设计特异性荧光原位杂交探针

  1.探针分为好多种,你要先决定你用何种,是RNA探针还是DNA探针,杂交时,RNA-RNA结合的稳定性要比DNA-RNA好,所以RNA探针具有结合牢固、背景低等优点;DNA探针背景稍微深一些,不过也可以,标记方法比前者简单一些,另外还有寡核苷酸探针,此类探针分子量小,通透性好,但就是标记的敏感性

荧光底物有哪些

(一)荧光色素   许多物质都可产生荧光现象,但并非都可用作荧光色素.只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料.常用的荧光色素有:  异硫氰酸荧光素2.四乙基罗丹明  3.四甲基异硫氰酸罗丹明4.藻红蛋白(二)其他荧光物质   1.酶作用后产生荧光的物质:某

靶向CEACAM5的NIRII荧光探针实现结直肠癌高特异性识别

  结直肠癌是全球发病率和死亡率都位居前列的恶性肿瘤,手术是结直肠癌治疗的主要方式,完全切除肿瘤 (R0) 与更好的总生存期和更低的复发率相关。然而,进展期结直肠癌具有较高的不完全切除率,缺乏实时的术中影像技术来辅助外科医生区分恶性和良性组织,R0 切除在许多患者中仍然具有挑战性。近红外二区(nea

钙离子荧光探针:比值型荧光探针

前面我们介绍了荧光指示剂法可以将Ca2+检测的实验与其他技术结合使用,如可以与流式细胞仪、荧光分光光度计、或者荧光显微镜进行联合检测 。紫外光型主要包括Quin-2、Indo-1、Fura-2等,数量较少,可见光型数目较多,包括Fluo-3、钙黄绿素、Rhod-2等。荧光指示剂根据测光原理和数据

线粒体定位型高选择性ATP荧光探针的构建

  ATP(三磷酸腺苷)是生物体内不可缺少的生物大分子,在细胞呼吸、酶催化、能量和信号传递过程中起到关键的作用。线粒体是产生ATP的主要场所,ATP的含量变化必然会对线粒体的功能产生不可逆的影响。科学研究表明,线粒体的功能紊乱与心血管疾病、恶性肿瘤以及帕金森氏症等疾病密切相关。因此,发展一种可靠并能

消化道脂肪酶底物特异性

Ewa RogalskaS等(1990)研究了猪胰脂肪脂肪酶、兔胃脂肪酶和人胃脂肪酶对化学结构类似、但在同一甘油三酯分子中立体结构不同的酯键的立体选择性,结果表明两种胃脂肪酶对sn-3位具有立体选择性。如果由对映体过量百分率表示的话,人和兔胃脂肪酶对三辛酸甘油酯和三油精分别是54%、70%和74%、

广州大学研究发现一种新型甲醛特异性荧光探针

近日,广州大学大湾区环境研究院王平山教授团队的谢廷正教授在超分子材料领域取得进展,发现一种可循环利用的新型特异性识别甲醛的超分子荧光探针。该研究提供了一种对甲醛进行有效视觉检测和可逆吸收的新方法,可应用于环境监测领域。相关研究发表于Inorganic Chemistry。 甲醛是一种典型的挥发性

使用荧光底物的直接-ELISA-实验

实验概要使用荧光偶联一抗的直接 ELISA 测定的程序。实验步骤第 1 天:1. 在滤过的 PBS 中稀释包被抗体后,在每孔中加入 100 μl 进行包被。用封板膜覆盖酶标板,将酶标板在 4℃下孵育过夜。 第 2 天:2. 将 4 g Block ACE 粉末稀释于 100 ml 去离子水中,使用其

中科院大连化物所等研制出高选择荧光探针

  中科院大连化物所杨凌团队与大连理工大学精细化工重点实验室崔京南团队合作,在药物代谢领域取得新突破,研制出人源性细胞色素P450 1A酶的高选择荧光探针。相关研究近日发表于《美国化学会志》。  细胞色素P450 1A(CYP1A)是人体重要的药物I相代谢酶,参与多种临床药物、环境污染物及致癌物(如

荧光探针有毒吗

有毒的。在紫外-可见-近红外区有特征荧光,并且其荧光性质可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。

房建国团队开发硫氧还蛋白还原酶的快速特异性荧光探针

  开发高效可靠的工具对于探索基本的生物过程至关重要,这是一项长期的挑战。一种特别有用的工具是小分子荧光探针,这使人们越来越关注设计和开发用于生物大分子,无机离子,生物小分子和各种反应性信号物种的各种化学探针。一般而言,探针的质量对于探究复杂的生物系统以及从实验观察中得出令人信服的结论至关重要,因为

特异性检测溶酶体亚硫酸氢盐新武器:新款智能荧光探针

  文章提出了一种新的基于逻辑与的荧光探针(NY-Lyso),它由吗啉基、半花菁苷和1,8-萘二甲酰亚胺显色团组成,用于特异性检测溶酶体中的亚硫酸氢盐。该智能探针由两个功能部件组成:NY-Lyso探针上的吗啉基对细胞内溶酶体(pH 4.5-5.5)和其他细胞器之间的pH差异产生敏感反应,噻吩和花菁之

荧光原位杂交探针和荧光探针有什么区别

  荧光原位杂交探针和荧光探针有什么区别  荧光原位杂交技术问世于70年代后期,其曾多用于染色体异常的研究,近年来随着FISH所应用的探针钟类的不断增多,特别是全Cosmid探针及染色体原位抑制杂交技术的出现,使FISH技术不仅在细胞遗传学方面,而且还广泛应用于肿瘤学研究,如基因诊断基因定位等 。原

荧光探针的相关介绍

  在紫外-可见-近红外区有特征荧光,并且其荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命、偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。  与核酸(DNA或RNA)、蛋白质或其他大分子结构非共价相互作用而使一种或几种荧光性质发生改变的小分子物质。可用于研究大分子物质的性

摇核酸的荧光探针

DNA和RNA?摇核酸的荧光探针 用于共聚焦激光扫描显微镜的主要有Acridine Orange(吖啶橙,AO)、Propidium Iodide(碘化丙啶,PI)。两种染料既可标记DNA又可标记RNA,如为获得单独的DNA或RNA分布,染色前可用RNA酶或DNA酶处理细胞。PI不能进入完整的细胞膜

荧光探针的功能介绍

在紫外-可见-近红外区有特征荧光,并且其 荧光性质(激发和发射波长、 强度、寿命、 偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。

荧光探针的分类检测

  常用的荧光探针有荧光素类探针、无机离子荧光探针、荧光量子点、分子信标等。荧光探针除应用于核酸和蛋白质的定量分析外,在核酸染色、DNA电泳、核酸分子杂交、定量PCR技术以及DNA测序上都有着广泛的应用。  检测荧光探针的方法主要有单点测定和电荷耦合装置(CCD)荧光成像(包括用于微区分析的激光共聚

荧光探针技术的概念

受到激发光激发后,从激发态单重态回到基态,在紫外-可见-近红外区有特征发光,称之为荧光。荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命、偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子,被称为荧光探针。荧光探针分类很多,可以根据材料属性分为有机和无机探针,可以根据探针尺寸分为

溶酶体荧光探针原理介绍

溶酶体荧光探针溶酶体为单层膜蛋白包围的内含一系列酸性水解酶的小体。溶酶体中含有多种酶,如糖苷酶、酸性磷酸酶、弹性蛋白酶、组织蛋白酶等等,是物质代谢的场所。弱碱性胺选择性聚集在胞内低pH值的小室中,可用于研究溶酶体的生物合成和发病机理。其中最常用的就是DAMP,它不发荧光,需要和抗DNP的抗体共同使用

使用荧光底物的直接-ELISA-实验方案

实验概要使用荧光偶联一抗的直接 ELISA 测定的程序。实验步骤第 1 天:1. 在滤过的 PBS 中稀释包被抗体后,在每孔中加入 100 μl 进行包被。用封板膜覆盖酶标板,将酶标板在 4℃下孵育过夜。 第 2 天:2. 将 4 g Block ACE 粉末稀释于 100 ml 去离子水中,使用其

关于角蛋白酶的底物特异性作用介绍

  角蛋白酶作用的底物除了角蛋白外,它还可水解多种蛋白质底物,包括可溶和不可溶的蛋白质。角蛋白酶可以降解如酪蛋白、明胶、牛血清白蛋白等可溶的蛋白质。也可以降解包括羽毛、羊毛、角质、人发、指甲等不可溶的蛋白质。个别角蛋白酶的底物范围很窄,例如鸡毛癣菌角蛋白酶只能降解鸟类羽毛,较难降解其它种类的角蛋白。

蛋白质的内源荧光与荧光探针

利用荧光光谱法研究蛋白质一般有两种方法。一是测定蛋白质分子的自身荧光(内源荧光),另一种是当蛋白质本身不能发射荧光时,通过非共价吸附或共价作用向蛋白质分子的特殊部位引入外源荧光(也称荧光探针),然后测定外源荧光物质的荧光。  蛋白质的内源荧光 含有芳香族氨基酸(色氨酸(tryptophan ,Trp

我国科研人员开发出新型高灵敏钙信号荧光蛋白探针

近日,北京师范大学认知神经科学与学习国家重点实验室教授章晓辉团队、北师大生命科学学院教授王友军团队与中国科学技大学教授唐爱辉团队合作开发构建了一类新型的检测钙信号的荧光蛋白探针“尼莫”(NEMO),该探针具有更强和更精准的定量测定性能。近日,该成果在线发表于期刊《自然-方法》。生命体的许多活动都离不

pcr荧光探针法是什么

实时定量聚合酶链反应 (Quantitative Real-time PCR,qPCR) 是一种分子生物学技术,用于放大和同时检测或量化靶向 DNA 分子。程序遵循 PCR 的一般原则。在 PCR 反应过程中,随着循环次数的增加,PCR 产物的积累导致荧光信号的增强。因此,通过监测荧光强度,在"实时

pcr荧光探针法是什么

pcr荧光探针法是是SYBRGreen掺入到双链DNA中的量。SYBRGreen掺入到双链DNA中后会发出荧光。但是只要是双链,它都掺。而探针法是当探针结合到目标序列上以后,聚合酶降解探针后,探针上自带的荧光基团离开淬灭基团,从而发出荧光。

检测酶活性的荧光探针

检测酶活性的荧光探针 共聚焦激光扫描显微镜除了具备荧光显微镜检测荧光酶细胞化学的作用以外,在检测活细胞酶活性动态变化方面有着无可比拟的优势。通过对细胞施予不同的处理因素可检测细胞内相应的酶被激活或灭活的动态变化过程。有的酶荧光探针是自身就可发出荧光、有的是与酶结合后发出荧光、有的则是被酶分解后发出荧