Nature:癌细胞能利用精确DNA修复途径来修补自身
美国国家癌症研究所的一组研究人员发表了题为“Replication Fork Stability Confers Chemoresistance in BRCA-deficient Cells”的文章,发现乳腺癌的肿瘤细胞是通过恢复一些精确的DNA修复信号通路来修补化疗引起的DNA断裂形成化疗耐药的。 这一研究成果公布在Nature杂志上。文章的作者,美国国家癌症研究所(NCI)的Andre Nussenzweig博士表示“肿瘤细胞进化出了一些复杂的机制来绕过对精确DNA修复的需求,这构成了我们研究的基础。更深入地认识在突变肿瘤中驱动耐药的过程,将促成一些靶向肿瘤特异性脆弱点的新疗法。” 研究人员将保护和稳定DNA复制叉作为一个主要的贡献机制与BRCA1/2突变乳腺癌和卵巢癌耐药联系起来。复制是单个DNA分子生成两个无差别的DNA拷贝的一个细胞过程。这一DNA复制过程是细胞分裂中一个重要的步骤,发生在称作为复制叉的确定......阅读全文
基因组DNA的纯化与回收
实验概要质粒、噬菌体等经酶切,电泳;PCR产物经电泳后,常常需要对一些DNA电泳片段进行回收和纯化,用于亚克隆、探针标记、测序等。DNA回收和纯化常用方法有压碎法、低融点琼脂糖法、冻融法等,也有现成的试剂盒供应。主要试剂酚、氯仿、NaAc、无水乙醇、TE、Tris-HCl饱和酚、异丙醇、低融点琼脂糖
细菌中制备基因组DNA实验
小量制备 氯化铯法 实验方法原理 提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质,再用酚和氯仿
植物组织制备基因组DNA实验
实验方法原理 加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提取的目的。实验材料 植物组织试剂、试剂盒 抽提缓冲液十二烷基肌氨酸钠TE异丙醇溴化乙锭氯化铯仪器、耗材 离心机实验步骤 收取1
真核细胞基因组DNA的提取
实验概要高等动物,高等植物的基因组相当庞大,如人类细胞基因组由30亿个碱基对组成,果蝇基因组有1.4×108个碱基对,水稻基因组有1.4×109个碱基对。真核细胞基因组中,约1万-1.5万个可表达的结构基因,其它大量存在的是调控序列和内含子序列。可以说某特定物种的基因组,包含了该物种生长,发育,繁殖
抗癌新突破:-浙大发明新型生物导弹-可精确杀伤癌细胞
7月12日,国际化学类顶级刊物《先进材料》(Advanced Materials)刊登了浙江大学药学院陈枢青课题组在抗肿瘤新药设计上的重要研究成果,该论文全部研究工作均由浙大师生在国内完成,标志着该课题组的研究水平进入了国际前沿。另一篇抗肿瘤新药设计的论文也于8月1日在国际重要刊物《新药研究
自身抗体检测项目介绍抗双链DNA抗体
抗双链DNA抗体介绍: 抗双链DNA抗体(抗ds DNA)是抗DNA抗体中的一种。其反应位点位于DNA脱氧核糖磷酸框架上。抗ds DNA主要出现于SLE患者的血清中,对SLE患者的组织器官损伤有致病作用。在SLE患者血循环中,大分子的DNA浓度显著高于正常人,DNA还可与多种器官的微血管结构包括肾小
脑癌细胞系全基因组测序首次完成
其所揭示的新分子靶标将有助于开发出更具效力和更少毒性的药物 美国加州大学洛杉矶分校琼森综合癌症研究中心的科学家在1月29日的《公共科学图书馆·遗传学》(PLoS Genetics)专刊上发表论文指出,他们首次完成了脑癌细胞系全基因组测序,这也是截至目前对单个癌症细胞系所做的最为彻底的测序分析。
提取基因组dna后,怎样判断dna的纯度和质量
用紫外分光光度计测od值a260/a280正常1.8左右如果制备的dna样品a260/a2802,说明样品中rna过高,可用rnase消化后,用酚、氯仿、异戊醇抽提,再用乙醇沉淀dna
分离基因组DNA和质粒DNA有哪些不同之处
分离质粒时,可以将质粒去得很干净。方法为:先用TE之类的试剂将菌液悬浮起来,再用NaOH和SDS将菌液裂解(起裂解作用的主要是NaOH,但此时,SDS可以与蛋白很好的结合)。第三步,加入酸中合第二步中的碱,并且将SDS沉淀下来,同时,SDS和蛋白也一起沉淀下来,而基因组上面有很多的蛋白,这样基因组就
科学家绘制出人类基因组三维图像
据美国物理学家组织网1月4日报道,美国南加利福尼亚大学多恩希夫文理学院的科学家,开发出一种绘制DNA(脱氧核糖核酸)之间接触位点的新方法,并利用计算机模型绘制出一个细胞中的完整DNA链——基因组的精确三维图像。相关论文预先发表在《自然·生物技术》网站上。 细胞内的基因组就像一碗细丝面,不同
实验电炉炉衬修补方法
当实验电炉炉衬遍地有若干的毁伤时,必需进行修补,以延伸炉衬寿命和避免因为炉衬毁伤而形成变乱实验电炉炉衬的修补部位及办法如下:1、出铁口耐火资料与炉壁接缝处开裂或毁伤的修补可用不定形耐火资料推打修补,修补局限较大时要用柴炭等烘干;2、实验电炉侧壁开裂的修补 普通在1m m以下的裂纹不需修补而可以持续
成人疝修补方法改进
近三年来,我们对成人腹股沟斜疝在修补方式上进行改进,其中手术52例,2例失访,随访最长者3年,最短4个月,平均20个月,疗效好,无复发,现介绍如下: 1、临床治疗 男性病人49例,女性病人1例,最大79岁,最小20岁;其中9例男性为复发疝。 2、手术方法 采用腹股沟斜
实时荧光定量PCR可以用来精确测定DNA浓度吗
实时荧光定量PCR可以用来精确测定DNA浓度吗实时荧光定量PCR不是用来测浓度的,可以用来做基因的拷贝数。但是如果你的产物单一,有相应的标准品,也是可以测浓度的,浓度的准确性和你的标准曲线相关。实时荧光定量PCR:实时荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitati
JCB:DNA修复关键蛋白救癌细胞于化疗!
近日,一项发表于国际杂志The Journal of Cell Biology上的研究论文中,来自加尼弗尼亚大学的研究人员通过研究发现,一种帮助维持胚胎干细胞(ESCs)身份的特殊蛋白或可促进干细胞的DNA修复,研究者表示,这种名为Sall4的蛋白质在癌细胞中也扮演着类似的角色,其可以帮助修复癌
新DNA测序技术追踪单个癌细胞的基因错误
一种新的DNA测序技术可以让科学家追踪单个癌细胞的基因错误。这是史上第一次科学家们能够重建肿瘤的生命史,并了解细胞DNA中的一个错误是如何导致肿瘤无法控制的生长的。这项新技术将帮助医生了解特定癌症是如何演变的,并为每位患者量身定制治疗方案,使其更有效、更成功。 我们是由数十亿个细胞组成的,它们
识别DNA差异-10分钟完成癌细胞检测
近日,澳大利亚研究人员提出一项能在10分钟内完成的癌细胞检测。这项检测通过识别癌细胞和健康细胞之间的DNA差异,可快速完成初步诊断。图片来源于网络 甲基基团附着到DNA上的过程(被称为甲基化)受到遗传操控。在所有“成熟”的人类细胞中,DNA都携带这些修饰。癌细胞与健康细胞的基因组信息具有显著差
Science:重磅!癌细胞通过增加DNA突变来逃避治疗
作为对抗生素治疗的回应,细菌通过增加它们的基因组中的突变率来提高它们的生存几率,从而让它们有更多机会产生耐药性。这种策略并不仅仅限于细菌。在一项新的研究中,意大利研究人员发现结直肠癌细胞同样会提高它们的突变率,从而避免靶向疗法导致的死亡。相关研究结果于2019年11月7日在线发表在Science
仿生酶切割癌细胞DNA,诊疗监测两不误
人工金属酶作为一种潜在的分子药物,有望在人体内靶向治疗癌细胞,减少癌症治疗副作用。但未搞清内部催化机制时,其应用就显得有些束手束脚。本月,北京工业大学和中科院高能物理所联合的研究团队在《科学进展》上报告了一项研究,他们阐明了一种人工金属酶的精细分子结构和能级分布特征,并揭示了这种仿生酶的催化活性机
Cell重要发现开启癌症疗法新思路
无论是树苗还是总统,每一个生物体都必须不惜任何代价来保护自身的DNA。但有关细胞区分自身DNA损伤及入侵病毒外源DNA损伤的机制却仍然是个谜。 现在,来自Salk研究所的科学家们发现了细胞反应系统区分这两种永恒威胁的一些关键细节。研究发现有可能帮助开发出一些新的癌症选择性病毒疗法,及解释衰老和
基因组精确注释新方法:增强子鉴定新技术
近日,中国农业科学院深圳农业基因组研究所动物功能基因组学创新团队研发出增强子鉴定新技术。该技术与传统技术相比,平均分辨率提高了约10倍,为基因组的精确注释提供了新方法。相关研究成果发表在《核酸研究》(Nucleic Acids Research)上。 增强子是一种基因组非编码区的顺式调控元件,
上海植物逆境中心建立植物基因组精确定点修饰技术
中科院上海植物逆境生物学研究中心朱健康课题组近日通过模仿和改造微生物中的一种抵御外源侵染的防护机制,成功开发出一种能对植物基因组进行精确定点修饰的技术,从而使高效植物分子改良性状成为可能。这一适用于植物的CRISPR/Cas技术就像一把剪刀可以对基因组任意感兴趣的位置进行编辑,它的成功开发将革命
单头昆虫基因组DNA的提取
实验概要一种简单快速提取单头小型昆虫基因组DNA的方法。主要试剂1. 蛋白酶K[美国Merck公司]2. 三羟甲基氨基甲烷(Tris)[美国Amresco公司]3. Taq DNA聚合酶及dNTP[NEB公司]4. 琼脂糖及溴化乙锭(EB)[美国Amresco公司]5. 乙二胺四乙酸钠(Na2EDT
基因组DNA甲基化分析方法
早期的基因组DNA甲基化分析技术,如SssI甲基转移酶分析法、氯乙醛反应法、免疫学抗体技术等,已经不能满足现代表观遗传学研究的需求。今年来常用的基因组甲基化的方法有以下两种。1. 甲基化敏感扩增多态性实验甲基化敏感扩增多态性实验技术被用于检测双向型真菌的DNA甲基化,它是在扩增片段长度多态性技术的基
提取基因组DNA的方法有哪些
1、苯酚氯仿抽提法优点是采用了实验室常见的试剂和药品,做起来成本比较低廉。缺点是由于使用了苯酚、氯仿等试剂,毒性较大,长时间操作对人员健康有较大影响,而且核酸的回收率较低,损失量较大,由于操作体系大,不同实验人员操作重复性差,不利于保护RNA,很难进行微量化的操作。 2、离心柱法离心柱法DNA提取它
酵母基因组DNA简易高效提取方案
1. 10ml菌液过夜培养至饱和(OD600值为2-3) 2. 离心沉降细胞(Sorvall中以2000rpm的速度),然后以冷的、等体积的无菌蒸馏水洗涤 3. 将细胞沉淀在200μl 裂解缓冲液中重悬浮,然后加入约300μl 玻璃珠和200μl的1:1苯酚:氯仿混和液 4. 漩涡摇匀1-2min
利用CTAB法提取植物基因组DNA
一、实验原理 CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)是一种去污剂,可溶解细胞膜并能与核酸形成复合物,该复合物在高离子强度(0.7mol/L)的溶液里是可溶的,通过离心可将复合物同蛋白质、多糖类物质分开。在酚仿变性的条件下,去除残留的CTAB和蛋白质等杂质,然后利用异戊醇或无水乙醇将DNA分
基因组DNA文库构建的基本流程
基因组 DNA文库有十分广泛的用途,如用于分析、分离特定的基因片段,用以基因表达调控、人类及动植物基因组工程的研究。通常情况下,基因组文库构建的基本流程可以归为4大步骤:分离基因组DNA、对基因组DNA作相关的处理、将基因组DNA片段连接入载体、将重组载体转入宿主细胞。 一、分离基因组DN
动物基因组DNA-的分离纯化实验
实验方法原理 根据核糖核蛋白与脱氧核糖核蛋白在一定浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同进行分离, 然后用蛋白质变性沉淀剂去除蛋白,使核酸释放出来, 再利用核酸不溶于乙醇的性质将核酸析出, 达到分离提纯的目的。在0 . 14 mol/ L 的氯化钠溶液中, RNA 核蛋白(RNP) 溶解度大, 而DNA
基因组DNA提取与PCR扩增技术
一、基因组DNA提取实验目的基因组DNA的制备是基因分析的前提。 本实验要求掌握基因组DNA提取的基本方法。实验原理 DNA在生物体内是与蛋白质形成复合物的形式存在的。核酸与蛋白质之间的结合力包括离子键、氢键、范德华力等,破坏或降低这些结合力就可把核酸与蛋白分开。 DNA、RNA所含有的嘌呤环和嘧啶
动物组织细胞基因组DNA提取
一、实验原理真核生物的一切有核细胞(包括培养细胞)都能用来制备基因组 DNA.真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内,因此,制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离,又要保持DNA分子的完整。提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液