细菌蛋白能当领鞭虫“春药”
美国研究人员在研究单细胞生物如何进化成多细胞生物时,偶然发现了一个奇怪现象:一种叫做领鞭虫的单细胞真核生物,开始进行有性繁殖以响应由细菌产生的蛋白质。领鞭虫是与动物最接近的近亲,但科学家还不清楚为何在自然环境中会发生这种情况,不过他们推测这可能会帮助领鞭虫容易与同类交配。该发现于8月31日刊登在《细胞》杂志。 领鞭虫是一种原生生物,也是被用作研究动物进化起源的模型生物。加州大学伯克利分校和哈佛医学院的研究人员计划研究一种细菌是如何影响领鞭虫的,但他们观察到意想不到的副作用。 “我们知道费氏弧菌并不能诱导多细胞发育,但当添加该细菌后,我们看到领鞭虫出现非常奇怪的群集行为。结果发现这是交配的前奏。”加州大学伯克利分校细胞生物学和遗传学家Nicole King说。 成群的单细胞生物通常会在有性繁殖之前繁殖,因为这能迅速增加一个小区域内的生物密度,而两个领鞭虫也会自然相遇并交配,但这非常罕见。而研究人员使用基因型分型确定了它......阅读全文
细菌总蛋白和膜蛋白提取方法
一、从新鲜样品中提取总蛋白(简易法)1、自配裂解液(pH 8.5-9.0):50 mM Tris-HCl,2 mM EDTA, 100 mM NaCl,0.5% Triton X-100,调pH值至8.5-9.0备用;用前加入100 μg/ml 溶菌酶,1μl/ml 的蛋白酶抑制剂PMSF。该裂解液
细菌总蛋白和膜蛋白提取方法
实验概要本实验介绍了几种提取细菌总蛋白和膜蛋白的方法。主要试剂裂解液(pH 8.5-9.0):50 mM Tris-HCl,2 mM EDTA, 100 mM NaCl,0.5% Triton X-100,调pH值至8.5-9.0备用;溶菌酶;蛋白酶抑制剂PMSF;1% SDS溶液;Trizol裂解
细菌总蛋白和膜蛋白提取方法
细菌总蛋白和膜蛋白提取方法实验试剂裂解液(pH 8.5-9.0):50 mM Tris-HCl,2 mM EDTA, 100 mM NaCl,0.5% Triton X-100,调pH值至8.5-9.0备用;溶菌酶;蛋白酶抑制剂PMSF;1% SDS溶液;Trizol裂解液;无水乙醇;异丙醇;0.3
细菌胞外蛋白含量测定
Folin—酚试剂法(Lowry法)(一)实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一.过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代.此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了
细菌膜蛋白的分离
实验概要本实验对细菌膜蛋白进行了分离。主要试剂1. Tris-Mg 缓冲液 10mM Tris-Cl 5mM MgCl2 pH 7.3,4℃保存 2. 2%(w/v)十二烷基肌氨酸钠 (SLS)实验步骤1. 于20ml 营养肉汤中过夜培养细菌,37℃,200rpm。 2. 1000
细菌蛋白能当领鞭虫“春药”
美国研究人员在研究单细胞生物如何进化成多细胞生物时,偶然发现了一个奇怪现象:一种叫做领鞭虫的单细胞真核生物,开始进行有性繁殖以响应由细菌产生的蛋白质。领鞭虫是与动物最接近的近亲,但科学家还不清楚为何在自然环境中会发生这种情况,不过他们推测这可能会帮助领鞭虫容易与同类交配。该发现于8月31日刊登
细菌胞外蛋白含量测定实验
(一)实验原理这种蛋白质测定法是最ling敏的方法之一.过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代.此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度.这两种显色
细菌噬菌体蛋白质结构介绍
无尾部结构的二十面体:这种噬菌体为一个二十面体,外表由规律排列的蛋白亚单位——衣壳组成,核酸则被包裹在内部。 有尾部结构的二十面体:这种噬菌体除了一个二十面体的头部外,还有由一个中空的针状结构及外鞘组成的尾部,以及尾丝和尾针组成的基部。 线状体:这种噬菌体呈线状,没有明显的头部结构,而是由壳
细菌蛋白提取与纯化的实验手册
不同的蛋白质分离纯化的方法不同,但蛋白质分离纯化的操作步骤基本类似,那么如何进行细菌蛋白的提取呢?这里总结细菌蛋白的提取的实验试剂、操作步骤以及一些注意事项。实验试剂采用T7• Tag Affinity Purification KitT7•Tag抗体琼脂。B/W缓冲液:4.29mM Na2HPO4
细菌表达蛋白质和样本制备
一般直接用SDS凝胶加样缓冲液裂解,具体方法如下:[试剂与设备](1)表达待检测蛋白质的细菌。(2)50mmoL/LTris-HCl(pH7.4)。(3)2xSDS凝胶加样缓冲液:100mmol/L Tris—HCl(pH6.8)200mmol/L 二硫苏糖醇(DTT)4% SDS(电泳级)0.2%
《Nature》破案:杀死雄果蝇的细菌蛋白
“据我们所知,Spaid是迄今为止第一种以性别特异性方式影响宿主的细菌功能蛋白,”Harumoto说。“而且,在我们的认知范围内,这也是第一篇报道昆虫内共生因子导致雄性死亡的论文。我们期望它能对共生、性别决定和进化等领域产生重大影响。” 50年代,遗传学家们遇到了一个谜题:当2个相同品种的果蝇
细菌胞外蛋白含量的测定方法!
一、实验原理这种蛋白质测定法是的方法之一.过去此法是应用泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难,近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代.此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度.这两种显色反应产生深兰色的原因是:在碱性条件下
膜蛋白和细菌总蛋白提取的三大方法
一、从新鲜样品中提取总蛋白(简易法)1、自配裂解液(pH 8.5-9.0):50 mM Tris-HCl,2 mM EDTA, 100 mM NaCl,0.5% Triton X-100,调pH值至8.5-9.0备用;用前加入100 μg/ml 溶菌酶,1μl/ml 的蛋白酶抑制剂PMSF。该裂
细菌中重组蛋白的大量提取实验
实验方法原理利用细菌获得用于纯化的重组蛋白是非常方便的。适用于细菌细胞蛋白提取的方法包括超声波处理、玻璃珠研磨、钒土或石英砂研磨、French加压罐高压剪切细胞和溶菌酶处理。这些方法适用于从各种革兰阴性菌和革兰阳性菌中制备蛋白提取物。通常是使用酶的方法破坏细胞,因为细胞在悬浮液中能获得相对均一的处理
细菌中重组蛋白的大量提取实验
实验方法原理 利用细菌获得用于纯化的重组蛋白是非常方便的。适用于细菌细胞蛋白提取的方法包括超声波处理、玻璃珠研磨、钒土或石英砂研磨、French加压罐高压剪切细胞和溶菌酶处理。这些方法适用于从各种革兰阴性菌和革兰阳性菌中制备蛋白提取物。通常是使用酶的方法破坏细胞,因为细胞在悬浮液中能获得相对均一的处
Cell:细菌有助发现人体中的致癌蛋白
人细胞会产生蛋白致癌物。癌症是一种突变疾病。在特定基因中积累了多种突变的正常细胞很可能变成癌细胞。导致癌症的突变是DNA损伤的结果。香烟烟雾和阳光等外部因素能够破坏DNA,但大多数DNA损伤似乎是由细胞内发生的事件引起的,并且是由细胞组分(包括蛋白)介导的。尽管这些事件很重要,但是它们并未得到广
细菌中重组蛋白的大量提取实验
基本方案 实验方法原理 利用细菌获得用于纯化的重组蛋白是非常方便的。适用于细菌细胞蛋白提取的方法包括超声波处理、玻璃珠研磨、钒土或石英砂研磨、French加压
《科学》:古老蛋白塑造细菌紧凑基因组
该发现可能有助于开发其它标靶Rho的抗生素 与人类相比,细菌不携带过多的“垃圾DNA”,它们的基因组要“整洁”得多。比如大肠杆菌大约90%的基因组都包含编码蛋白质的DNA,而人类基因组的90%都是非编码的“垃圾DNA”。 美国科学家近日研究发现,细菌基因组的这种“整洁”可能要归功于一种名为R
细菌对糖和蛋白质的分解
1.细菌对糖的分解 细菌一般不能直接利用多糖,必须经胞外酶分解成单糖后才能利用。细菌分解葡萄糖可经多途径产生丙酮酸。丙酮酸再进一步分解时需氧菌和厌氧菌则有所不同,需氧菌将丙酮酸通过三羟酸循环分解为CO2和H2O,并产生ATP及其他代谢产物;厌氧菌则发酵丙酮酸产生各种酸、醛、醇、酮等多种产物。
细菌中蛋白质的提取与纯化技术
实验试剂采用T7? Tag Affinity Purification KitT7?Tag抗体琼脂。B/W缓冲液:4.29mM Na2HPO4,1.47 mM KH2PO4,2.7 mM KCl, 0.137mM NaCl,1%吐温-20,pH7.3 洗脱缓冲液: 0.1M柠檬酸,pH2.2
鸭嘴兽乳汁蛋白可助抗衡超级细菌
澳大利亚科学家近日成功破译鸭嘴兽乳汁中的蛋白质结构。这种独特的蛋白质有望在抗衡超级细菌方面发挥重要作用。 澳联邦科学与工业研究组织在其官网发布新闻公报介绍说,早在2010年,科学家就发现鸭嘴兽的乳汁具有独特的抗菌性,或许可用来对抗超级细菌。 此次该机构研究人员与迪金大学同行合作,在实验室
细菌中蛋白质的提取与纯化技术
实验试剂 采用T7• Tag Affinity Purification KitT7•Tag抗体琼脂。B/W缓冲液:4.29mM Na2HPO4,1.47 mM KH2PO4,2.7 mM KCl, 0.137mM NaCl,1%吐温-20,pH7.3 洗脱缓冲液: 0.1M柠檬酸,pH2.2. 中
细菌中蛋白质的提取与纯化技术
实验试剂采用T7• Tag Affinity Purification KitT7•Tag抗体琼脂。B/W缓冲液:4.29mM Na2HPO4,1.47 mM KH2PO4,2.7 mM KCl, 0.137mM NaCl,1%吐温-20,pH7.3 洗脱缓冲液: 0.1M柠檬酸,pH2.2
细菌“注射器”将蛋白输入人体细胞
针对性的蛋白质递送装置问世。 图片来源:麻省理工与哈佛博德研究所 【总编辑圈点】 科技日报北京3月29日电(记者张梦然)《自然》杂志29日报道一项生物科技重要成果:一种蛋白质递送装置,它可利用细菌“注射器”将蛋白质注射到人类细胞中。这种方法可能对未来人类生物医学疗法的应用非常有用,例如基因
Cell:新型PROTAC,首次实现细菌内靶蛋白降解
细菌感染每年导致数十万人死亡,尤其在中低收入国家。考虑到过去50年来仅有少量抗生素获批,新抗生素的发展还面临着细菌包膜的低渗透性以及特异性靶标少的挑战。病原体对现有药物产生耐药性的速度进一步加剧了寻找有效抗菌剂的困难。鉴于这种不平等的军备竞赛,细菌性流行病的卷土重来是一个很大的威胁,迫切需要对抗
细菌中蛋白质的提取与纯化技术
实验概要大肠杆菌表达蛋白以可溶和不溶两种形式存在,需要不同的纯化策略。现在,许多蛋白质正在被发现而事先并不知道它们的功能,这些自然需要将蛋白质分离出来后,进行进一步的研究来获得。分析蛋白质的方法学现已极大的简化和改进。必须承认,蛋白质纯化比起DNA克隆和操作来是更具有艺术性的,尽管DNA序列具有异乎
靶蛋白的放射标记实验—酵母和细菌蛋白质代谢放射标记
实验材料细胞仪器、耗材基本培养基实验步骤1. 接种细胞于只含有必需氨基酸和辅因子的已知成分的基本培养基,于合适温度中度振荡培养过夜。2. 用新鲜的基本培养基稀释培养物,继续温育至 107 细胞/ml (酵母)或对数期中期(细菌)。3. 5000 g 室温离心 10 分钟收集细胞,用无硫酸盐基本培养基
抑制细菌转录终止检测技术筛选RNA结合蛋白实验
实验方法原理 一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。 实验材料 N-表达质粒 E.coi
抑制细菌转录终止检测技术筛选RNA结合蛋白实验
一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。实验材料N-表达质粒E.coil N567 感受态细菌试剂、试剂盒储
用于外源蛋白质生产的细菌表达系统
实验方法原理 实验步骤 一、使用大肠杆菌生产外源蛋白 有越来越多的细菌表达系统可用于外源蛋白的生产。影响选择某个表达系统的因素包括目标蛋白质的天然性质、使用者的经