人红细胞冰冻干燥保存研究的进展
目前红细胞临床保存方法主要有低温(4℃)和深低温(-80℃或-196℃)保存。4℃保存时间短,而且容易受到细菌污染;深低温保存大大延长了红细胞保存时间,但需要笨重的低温设备,而且由于保护液中含有甘油等渗透性保护剂,解冻后需要反复洗涤。这些缺陷限制了常规红细胞保存方法在一些特殊情况,例如在战争和自然灾害条件下的应用。相对于常规保存方法而言,冰冻干燥具有以下优势:重量大大减轻,便于运输,适合室温保存,易于再水化。本文就冰冻干燥保存红细胞研究的进展和所面临的挑战,尤其是最近海藻糖在冰冻干燥保存过程中的应用以及其作用机制进行了综合讨论,从而为发展一种安全、简单和有效的红细胞冰冻干燥保存方法提出理论指导。红细胞是血液中含量最多的细胞,它通过其中的血红蛋白从肺部携带氧气运送到周边器官,在维持人体正常机能起着重要的作用。红细胞是一种高度分化的细胞,它没有细胞核、线粒体等复杂的细胞器,只有一层质膜包裹着血红蛋白。红细胞对于维持生命具有重要意义,......阅读全文
免疫荧光操作步骤(漂片,冰冻切片)
实验概要免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定
用于-PCR-的模板-DNA-制备实验——冰冻片
实验步骤1. 将 10 μl 冰冻切片直接放入含组织裂解液的离心管中。2. 无菌尖头刀片刮下,放入 300~900 μl 组织裂解液中,并加入 20 mg/ml 蛋白酶 K(PK)10~15 μl,封口膜封口,置 55℃ 3 h 以上。3. 其间用指轻弹离心管以利裂解。若有沉淀,再加入 5~10 μ
冰冻切片包埋剂及使用方法
冰冻切片包埋剂是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物,目前已广泛用于免疫组化实验室中,其用途是在冰冻切片时支撑组织,以增加组织的连续性,减少皱折及碎裂。又因OCT 混合物为水溶性,故在漂片时可溶于水,所以在以后的染色中不会增加背景染色。利用OCT 混合物(opti-mum cutting tempe
免疫荧光操作步骤(漂片,冰冻切片)
实验概要免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定
什么是电镜冰冻蚀刻(freezeetching)
亦称冰冻断裂(freeze-fracture)。标本置于干冰或液氮中,进行冰冻。然后用冷刀骤然将标本断开,升温后,冰在真空条件下迅即升华,暴露出了断裂面的结构。冰升华暴露出标本内部结构的步骤称为蚀刻(etching)。蚀刻后,再向断裂面上喷涂一层蒸汽碳和铂。然后将组织溶掉,把金属薄膜剥下来,此膜即为
科研检测人促红细胞生成素ELISA试剂盒
elisa试剂盒特点1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原或抗体,使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使
各种血液样品的保存方法和保存期
1、全血储存温度:2℃~6℃。保存期:含ACD-B、CPD血液保存液的全血保存期为21d;含CPDA-1(含腺嘌呤)血液保存液的全血保存期35d。使用其他血液保存液时,按其说明书规定的保存期执行。2、去白细胞全血储存温度:2℃~6℃。保存期:同1去白细胞全血应在血液采集后48h内去除白细胞。3、浓缩
输血小于4个单位者使用冰冻血浆时警惕血栓风险增加
创伤致死多数由出血造成。目前指南建议对大失血患者使用袋装红细胞、新鲜冰冻血浆和血小板按照1:1:1比例进行输血。最新前瞻性研究显示,尽早使用更高比例的冰冻血浆和血小板可以降低患者入院6小时内死亡率。 但是使用血液制品尤其是冰冻血浆也会增加静脉血栓的风险,而静脉血栓尤其是肺栓塞是导致创伤患者
半薄冰冻切片光学显微镜的使用
半薄的部分,可从cryoprotected生物材料的冷冻块切片在-90 ° C。 光学显微镜的使用这些路段的优点是subcellullar形态保存和改进的光学分辨率 。 化学固定的生物材料是cryoprotected浸泡在2.3米,蔗糖和浸泡在液氮中冷冻到标本引脚 。 切片是执行与调整,切较厚
PNAS:冰冻数百年的植物“起死回生”
日前,最新一项研究发现,数百年前“小冰期”时代封存在冰川下的植物又长出了新芽:一些“高龄”400岁的苔藓植物样本在实验室条件下蓬勃生长。研究人员表示,这样的起死回生,对研究生态系统如何从地球周期性的长期冰封中恢复过来有重要意义。 相关研究论文发表在了近期出版的《PNAS》杂志上,从事该研究
冰冻30年的水熊虫解冻后复苏
生命力顽强!冰冻30年的水熊虫解冻后复苏 日本国立极地研究所的科学家对30年前采自南极的苔藓样品进行了解冻,复苏了两只水熊虫。其中一只不仅最终存活下来,而且产下了19枚卵——有14枚成功孵化。
厦门海关查获162袋违规入境冰冻母乳
厦门机场海关25日从一名入境男性旅客的行李中查获一整箱冰冻母乳,共162袋,重达21.7千克。这是该关近年来查获的最大一批违规入境母乳。 这名男子当时携带着一个并不常见的大型保温箱选择无申报通道通关,机检图像显示箱内疑似装有大量固态冷冻品。关员打开箱子进行人工检查后,发现里面堆叠着大量袋装乳黄
徕卡冰冻式切片机切片制样方法
电镜样品制备技术直接影响样品的结构和反差。制备高质量的超薄切片,是发挥透 射电子显微镜优良性能的前提。透射电子显微镜的分辨率理论上可达到o.3nm左右, 但是六于样品制备技术的限制,分辨率很难达到理论值。对于生物样品来说,一般只能 达到2nm的水平。 高质量的超薄切片基本特征:①样品应该能耐受电子束
振动切片方法及与石蜡、冰冻切片的比较
振动切片用振动切片机,可以把新鲜组织(不固定不冰冻)切成厚片20~10μm,以漂浮法在反应板进行免疫组织化学染色,然后在解剖显微镜下检出免疫反应阳性部位,修整组织进行后固定,最后按电镜样品制备、脱水、包埋、超薄切片、染色观察等。组织不冰冻,无冰晶形成和组织抗原破坏,在免疫组化染色前避免了组织脱水、透
机采冰冻血小板的临床应用及分析
[摘要] 目的:探讨冰冻血小板在血小板减少性疾病中应用的有效性与安全性。方法:随机选择318例血小板减少症患者,204例患者给予冰冻血小板输注,114例患者给予新鲜血小板输注,输注前及输注后18 h~24 h分别测定血小板计数,比较血小板回收率及临床出血症状改善情况。结果:冰冻血小板止血有效
冰冻圈告急灾害增多-它们终成“丑样子”
2018年夏天,一篇题为《北极圈罕见32摄氏度高温,我们有生之年,或许再也看不到北极熊了》的文章刷爆朋友圈。尽管把一个地点的最高温度当作平均温度来认知是不科学的,但这个全球气候变暖的“小故事”,还是着实吓了人一跳。 几乎在同一时间,新疆连续在阿克苏温宿县和哈密出现暴雨洪水,尤其是8月中旬喀喇昆
什么是电镜冰冻蚀刻(freezeetching)技术
亦称冰冻断裂(freeze-fracture)。标本置于干冰或液氮中,进行冰冻。然后用冷刀骤然将标本断开,升温后,冰在真空条件下迅即升华,暴露出了断裂面的结构。冰升华暴露出标本内部结构的步骤称为蚀刻(etching)。蚀刻后,再向断裂面上喷涂一层蒸汽碳和铂。然后将组织溶掉,把金属薄膜剥下来,此膜即为
脑组织冰冻切片的步骤和注意事项
1.固定。大鼠或小鼠灌注取脑,取脑后用多聚甲醛浸泡固定,即能达到冲洗的目的,又不损害组织。2.脱水。先后用15%,20%,30%的PB蔗糖溶液 进行脑组织梯度脱水,脑组织沉下去就是脱水好了。3.冰冻切片,推荐瑞沃德冷冻切片机。取出脑组织,用OCT胶包埋,一层层的包埋,注意:不能有气泡,否则营销切片;
裹着坚守与希望-在历史的冰冻处呼吸
“选极地!”“进南极!”这一掷地有声的决定,他花了一生的时间来坚守——他就是被誉为我国“冰川之子”的谢自楚先生。谢自楚先生是中国冰川学界最著名的科学家之一、中国雪崩学初创者、中国南极科考的倡导者和首位赴北极考察的中国科学家。他一生致力于中国冰川冻土学和地理学研究,思想深邃、笃学严谨、学养深厚,在国际
冰冻切片实验技巧(四):脂肪组织的处理
脂肪组织无疑是冰冻切片者的绊脚石,道理很简单脂肪不会结冰,把温度降低让脂肪变硬可以切出较薄的片子,但是这个温度对同一组织中的其他成分来说显得太低而不合适切片,当脂肪破碎影响切片时这个问题就变得明显,下面是一些我的经验总结。1.尽可能的削掉不需要的脂肪组织当我准备切淋巴结时,我会先检查一遍,小心翼翼地
什么是电镜冰冻蚀刻(freezeetching)技术
亦称冰冻断裂(freeze-fracture)。标本置于干冰或液氮中,进行冰冻。然后用冷刀骤然将标本断开,升温后,冰在真空条件下迅即升华,暴露出了断裂面的结构。冰升华暴露出标本内部结构的步骤称为蚀刻(etching)。蚀刻后,再向断裂面上喷涂一层蒸汽碳和铂。然后将组织溶掉,把金属薄膜剥下来,此膜即为
深低温保存Rh阴性RBC的质量控制
目前国内冰冻红细胞常规解冻去甘油的方法多为手工制备,制备过程复杂,不易操作,常常由于人为原因导致红细胞制品的质量极不稳定(融化后的红细胞回收率只有60%左右),进而影响疗效,甚至引起病人严重的输血不良反应。为了及时向临床提供Rh阴性血液,本中心于2005年4月开展了Rh阴性血液深低温保存,利用Mll
减压干燥的干燥原理
减压干燥的干燥原理是湿物料表面处水分气化的结果,使物料内部与表面之间产生水分浓度差,从而使物体干燥。减压干燥湿物料在进行干燥处理时,同时进行着两个过程:1、热量由热空气传递给湿物料,使物料表面上的水分立即气化,并通过物料表面处的气膜,像气流主体中扩散。2、由于湿物料表面处水分气化的结果,使无物料内部
减压干燥的干燥原理
减压干燥的干燥原理是湿物料表面处水分气化的结果,使物料内部与表面之间产生水分浓度差,从而使物体干燥。减压干燥湿物料在进行干燥处理时,同时进行着两个过程:1、热量由热空气传递给湿物料,使物料表面上的水分立即气化,并通过物料表面处的气膜,像气流主体中扩散。2、由于湿物料表面处水分气化的结果,使无物料内部
减压干燥的干燥原理
减压干燥的干燥原理是湿物料表面处水分气化的结果,使物料内部与表面之间产生水分浓度差,从而使物体干燥。减压干燥湿物料在进行干燥处理时,同时进行着两个过程:1、热量由热空气传递给湿物料,使物料表面上的水分立即气化,并通过物料表面处的气膜,像气流主体中扩散。2、由于湿物料表面处水分气化的结果,使无物料内部
Rh阴性患者输血引发的思考
【案例经过】 我院为一位“O”型Rh阴性“主动脉夹层”男性患者施行了“Bentall”术,考虑到手术的复杂性和术中出血的可能性很大,为其备了5U Rh阴性冰冻解冻红细胞(血站无Rh阴性红细胞)。 手术中,这名患者出血很多,输注了术前备的5U红细胞之后,仍然满足不了要求,继续分几
大量出血患者如何输血?
大量输血方案(Massive Transfusion Protocols,MTP)是指在大出血时,按照预先制定的血液成分方案予以输血,需要妇产科医师、麻醉医师及输血科医师及血库共同努力完成输血协议。 随着剖宫产率的增加,胎盘前置及植入的发生率增加,产后出血已成为围产期孕妇死亡的主要原则。
手把手教你大量出血患者如何输血
大量输血方案(Massive Transfusion Protocols,MTP)是指在大出血时,按照预先制定的血液成分方案予以输血,需要妇产科医师、麻醉医师及输血科医师及血库共同努力完成输血协议。随着剖宫产率的增加,胎盘前置及植入的发生率增加,产后出血已成为围产期孕妇死亡的主要原因。当下
血液制品保存温度和时间
血液制品贮存温度(℃)贮存时间全血2~621d(ACD)红细胞制剂2~635d(CDPA-1)洗涤红细胞2~624d浓缩血小板20~247d浓缩粒细胞20~2424h新鲜冰冻血浆、冰冻血浆、冷沉淀物<-301年低温冷冻红细胞<-6510年
北半球冰冻圈变化项目课题验收会在京召开
10月13日,由中国科学院寒区旱区环境与工程研究所承担的全球变化研究国家重大科学研究计划2010年项目“北半球冰冻圈变化及其对气候环境的影响与适应对策”课题验收会在北京召开。秦大河院士、孙鸿烈院士、郑度院士、姚檀栋院士、傅伯杰院士等相关专家和项目主管部门、依托部门代表以及项目研究成员参加了会议