杜仲橡胶颗粒结合蛋白的分离、纯化及抗体制备
摘 要: 采用重复漂洗P离心法分离纯化了杜仲橡胶颗粒,SDS- PAGE 分析发现杜仲橡胶颗粒含有十几种蛋白,其中以56 ku、30 ku 2 种蛋白的丰度较高, 分别称之为EuRPP56和EuRPP30 。对杜仲雌雄株的比较表明,杜仲雌株叶片、雌株树皮及果皮中橡胶颗粒蛋白均是EuRPP30 含量高于EuRPP56 ,而雄株叶片、雄株树皮中正相反。进一步分离纯化了杜仲橡胶颗粒中丰度较高的30 ku 蛋白,并制备了该蛋白的抗体。免疫细胞化学分析结果表明,在叶片的含胶细胞中有阳性反应,而其它细胞无阳性反应。以上工作为研究杜仲胶粒结合蛋白功能以及阐明杜仲胶生物合成机制奠定基础。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文
日立研发杜仲提取橡胶技术-将在华生产橡胶造船
日立造船将生产以杜仲为原料的橡胶。最近已经确立生产技术,并在中国建立了年产50吨的小型工厂。今后将携手原材料厂商等展开共同研究,不断扩大用途,力争10年后达到年产1000吨的目标。 杜仲为中国原产树木,生长于降雨量少的中国高原地带等。日立造船开发出了高效从杜仲种子外皮中提取橡胶成分的技术。
抗体结合部位修饰法制备催化抗体的方法介绍
将催化基团或辅助因子引入到抗体的抗原结合部位,一般可采用两种方法:即选择性化学修饰法和基因工程定点突变法。抗体酶和酶一样也可以用化学修饰的方法加以改造。对抗体酶进行结构修饰的关键,是找到一种吻合的方法在抗体结合位置或附近引入酶的催化基团或辅助基团,如果引入的催化基团与底物结合部位取向正确空间排布
抗体结合部位修饰法制备抗体酶的介绍
将催化基团或辅助因子引入到抗体的抗原结合部位,一般可采用两种方法:即选择性化学修饰法和基因工程定点突变法。抗体酶和酶一样也可以用化学修饰的方法加以改造。对抗体酶进行结构修饰的关键,是找到一种吻合的方法在抗体结合位置或附近引入酶的催化基团或辅助基团,如果引入的催化基团与底物结合部位取向正确空间排布
免疫胶体金技术的颗粒制备及蛋白制备
颗粒制备 根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。 1.枸橼酸三钠还原法 (1)10nm胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml,加热煮沸30min,冷却至4℃,溶液呈红色。 (2)15nm胶体金颗粒的
抗体制备必须蛋白质全长吗
不需要。通常根据目标要检测的部分设计一段肽段,或者就过表达一段就行。用全长很多是为了方便,直接过表达一个蛋白,纯化一下,就去免疫动物了。如果为了提高特异性的话,还是可以有选择的确定抗原的大小的。如果非常具体是哪一段,用软件设计后,直接合成肽段,也不用表达蛋白了。把肽段再连到载体蛋白(KLH,BSA等
抗体蛋白A或蛋白G微珠层析柱的制备
蛋白A或蛋白G微珠-抗体层析柱是免疫亲和层析技术中最常用的微珠基质之一。此类层析柱容易制备,由于抗体分子是通过Fc段与微珠基质结合,抗原结合片段(Fab)可与抗原最大限度地发生作用。以下介绍的方法可用于蛋白质抗原的纯化,但类似的方案也适用于任何其他抗原。 抗体可直接与蛋白A或蛋白G结合。根据抗
TH糖蛋白的抗体制备过程
将人尿THP作为抗原,免疫新西兰白兔制备抗人THP抗体。方法:每只兔每次用抗原量lmg,与等量完全Ferund佐剂混合,皮下、肌肉多点注射,每2周加强免疫1次,共3次。所得抗血清先经盐沉淀法粗提,后经离子交换层析法纯化。一纯化的抗血清,经双向免疫扩散法鉴定,结果显示与相应抗原呈高度特异性结合呈现一条
蛋白上的标签是否会影响抗体制备?
通常重组蛋白上的GST(谷胱甘肽S-转移酶)或MBP(麦芽糖结合蛋白)标签分子量较大,含有许多抗原位点,在免疫时会成为抗原从而影响特异性抗体的制备。所以作为抗原的重组蛋白最好不带有GST或MBP标签。一些小分子量的标签,如His、Myc、Flag基本不会影响特异性抗体的制备。NovoPro用于制备抗
TATA结合蛋白
TBP用β-折叠结合到DNA双螺旋的小沟上,能使TATAbox弯曲80°。主要结合在A、T碱基上,因为这样有利于扭曲使小沟开放。
抗体的制备
为了研究抗体的理化性质、分子结构与功能,以及应用抗体于临床疾病的诊断、治疗及预防都需要人工制备抗体。目前,根据制备的原理和方法可分为多克隆抗体、单克隆抗体及基因工程抗体三类。 一、多克隆抗体 大多数抗原是由大分子蛋白质组成,但只是抗原上有限部位的特殊分子结构能与其相应抗体结合,称此部位为抗原
酶免蛋白(及酶)—小分子半抗原结合物的制备
在临床实验室中,我们常常会遇到有关小分子物质如激素、治疗药物和毒品等的测定问题,而这些小分子通常分子量小于1 000,只是半抗原,仅有反应原性,没有免疫原性,如像蛋白大分子一样,将其直接免疫动物,不能得到小分子的抗体,只有将其先与载体蛋白相连接,组成完全抗原免疫动物,才能得到特异的抗小分子抗体,
抗原和抗体结合的部位
抗体和抗原结合的部位是重链和轻链的V区
关于TH糖蛋白的抗体制备介绍
将人尿THP作为抗原,免疫新西兰白兔制备抗人THP抗体。方法:每只兔每次用抗原量lmg,与等量完全Ferund佐剂混合,皮下、肌肉多点注射,每2周加强免疫1次,共3次。所得抗血清先经盐沉淀法粗提,后经离子交换层析法纯化。一纯化的抗血清,经双向免疫扩散法鉴定,结果显示与相应抗原呈高度特异性结合呈现
杜仲的概述
杜仲(学名Eucommia ulmoides Oliver),又名胶木,为杜仲科植物。 杜仲游离氨基酸极少,含有的少量蛋白质是和绝大多数食品类似的完全蛋白,即能够水解检出对人体必需的8种氨基酸。经测定,杜仲所含的15种矿物元素,其中有锌、铜、铁等微量元素,及钙、磷、钾、镁等宏量元素。 药用杜
杜仲的功效
杜仲主要功效之补益肝肾。 杜仲主要功效之强筋壮骨 杜仲主要功效之调理冲任 杜仲主要功效之固经安胎 杜仲具有清除体内垃圾,加强人体细胞物质代谢,防止肌肉骨骼老化,平衡人体血压,分解体内胆固醇,降低体内脂肪,恢复血管弹性,利尿清热,广谱抗菌,兴奋中枢神经,提高白血球数量,增强人体免疫力等显着
杜仲的简介
杜仲(学名Eucommia ulmoides Oliver),又名胶木,为杜仲科植物。 杜仲游离氨基酸极少,含有的少量蛋白质是和绝大多数食品类似的完全蛋白,即能够水解检出对人体必需的8种氨基酸。经测定,杜仲所含的15种矿物元素,其中有锌、铜、铁等微量元素,及钙、磷、钾、镁等宏量元素。 药用杜
杜仲的介绍
杜仲(学名Eucommia ulmoides Oliver),又名胶木,为杜仲科植物。 杜仲游离氨基酸极少,含有的少量蛋白质是和绝大多数食品类似的完全蛋白,即能够水解检出对人体必需的8种氨基酸。经测定,杜仲所含的15种矿物元素,其中有锌、铜、铁等微量元素,及钙、磷、钾、镁等宏量元素。 药用杜
杜仲的作用
性味甘、微辛;性温。入肝经、肾经。主治腰脊酸疼,风湿痹痛,胎动不安,习惯性流产等。 具补肝肾、强筋骨、降血压、安胎等诸多功效。适宜高血压患者、习惯性流产妇女、小儿麻痹后遗症患者、肾气不足者。但是阴虚火旺者慎服。 杜仲具有安胎的功效,能够用于治疗孕妇在怀孕期间漏血、胎动不安等症状,也常被用于妇女
怎样制备荧光抗体?
(一)抗体要求将荧光素与特异性抗体以化学共价键的方式结合而成。一般需经纯化提取IgG后再作标记。(二)荧光素要求 异硫氰酸荧光素最常用要求:①应具有能与蛋白质分子形成共价键的化学基团,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除;②荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率;③
荧光抗体的制备
1 荧光素与抗体结合(标记) 2 荧光抗体的纯化 3 荧光抗体的鉴定 1.荧光素与抗体结合方法: ⑴ 透析法:①适用于蛋白质含量低、样品体 积小的抗体溶液的标记 ②标记较均匀,非特异荧光较低 ⑵ 搅
酶免疫测定的酶—大分子蛋白结合物的制备
酶结合物可以说是酶免疫测定试剂盒的核心组成部分。通常酶免疫测定试剂盒的有效使用期限即是根据酶结合物的稳定性而定的。因为在酶免疫测定试剂盒中,最易受外环境影响的组成试剂即是酶结合物。此外,酶结合物的质量亦是影响试剂盒质量的很重要的因素之一,可见酶结合物的制备对于酶免疫测定来说,是非常关键的一个环节。
世界首个杜仲全基因组精细图绘出
记者从位于郑州的中国林科院经济林研究开发中心了解到,该研究中心副主任杜红岩研究员主持的项目“杜仲育种群体建立与综合利用技术研究”取得重大突破,日前通过国家林业局验收。项目选育出的10个杜仲良种通过国家林木良种审定,获得国家发明ZL14项,荣获国家和省部级科技进步奖5项;绘制完成杜仲全基因组精细图
ELISA(EIA)酶结合物的制备
免疫酶技术(immunoenzymatic technique)又称酶免疫测定法(enzyme immunoaay,EIA),是继免疫荧光技术和放射免疫技术之后发展起来的又一种免疫标记技术。它是把抗原抗体的特异性反应和酶的高效催化作用相结合而建立的。该技术通过化学方法将酶与抗体或抗抗体结合
颗粒剂的制备实验_感冒退热颗粒剂的制备
实验材料大清叶板蓝根连翘拳参试剂、试剂盒纯化水乙醇蔗糖粉糊精仪器、耗材烧杯玻璃棒天平旋蒸仪圆底烧瓶桑皮纸实验步骤一、准备 1. 原辅料的处理: 根据药材的有效成分不同,可采用不同的溶剂和方法进行提取,一般多用煎煮法提取有效成分,用等量乙醇精制时放置的时间、回收乙醇后放置的时间可根据实验安排情况,适
酶标抗体结合物的纯化
在酶标记的溶液中,出现的是各种交联物的混合物,有酶-抗体、酶-抗体-酶、抗体-抗体、酶-酶,甚至还有游离的酶和抗体。在这中间,除了抗体-酶和酶-抗体-酶外,其它都应该给予除去。1、50%饱和硫酸铵沉淀法。此法只能除去游离的酶及酶-酶聚合体。而不能除去其它不需要者。但是此法对酶标抗体的损耗少。2、过S
药典委关于复方杜仲健骨颗粒国家药品标准草案公式
关于复方杜仲健骨颗粒国家药品标准草案的公示编号:Zg2025-0010号我委拟修订复方杜仲健骨颗粒国家药品标准,标准编号:WS3-057(Z-009)-2006(Z)。为确保标准的科学性、合理性和适用性,现将拟修订的复方杜仲健骨颗粒国家药品标准公示征求社会各界意见(详见附件)。公示期自发布之日起一个
人工制备抗体制备方法有哪些
抗体在疾病的诊断和免疫防治中的重要作用,使人们对抗体的需求越来越大。人工制备抗体是大量获得抗体的重要途径。早年人工制备抗体的方法主要是以相应抗原免疫动物,获得抗血清。由于抗原常常含有多种不同的抗原表位,加之所获得的抗血清也未经免疫纯化,因此,获得的抗血清实际上是含多种抗体的混合物,即多克隆抗体(po
western-blot-的蛋白质一定要变性才能和抗体结合吗
不一定。取决于选择的抗体识别的表位是什么样的。有些抗体会标明验证过哪些实验,例如WB,ELISA等,如果标有ELISA,IHC之类的,说明抗体可以识别天然状态下的蛋白,不用变性也可以检测。但是如果抗体只标注做过WB就需要当心,因为很可能这个抗体只能检测到变性以后的线性表位,如果蛋白没有变性,有高级结
western-blot-的蛋白质一定要变性才能和抗体结合吗
不一定。取决于选择的抗体识别的表位是什么样的。有些抗体会标明验证过哪些实验,例如WB,ELISA等,如果标有ELISA,IHC之类的,说明抗体可以识别天然状态下的蛋白,不用变性也可以检测。但是如果抗体只标注做过WB就需要当心,因为很可能这个抗体只能检测到变性以后的线性表位,如果蛋白没有变性,有高级结
颗粒剂的制备
实验材料 大清叶板蓝根连翘拳参试剂、试剂盒 纯化水乙醇蔗糖粉糊精仪器、耗材 烧杯玻璃棒天平旋蒸仪圆底烧瓶桑皮纸实验步骤 一、准备 1. 原辅料的处理: 根据药材的有效成分不同,可采用不同的溶剂和方法进行提取,一般多用煎煮法提取有效成分,用等量乙醇精制时放置的时间、回收乙醇后放置的时间可根据实验安排