蛋白质含量测定方法的比较
[ 摘要] 蛋白质与生命的起源、存在和进化都密切相关，蛋白质含量测定涉及到生产和科研的众多领域。目前常用的方法有凯氏定氮法、双缩脲法(Biuret)、紫外吸收法、考马斯亮蓝法（ Bradford）。本文总结各种方法的特点及适用条件，针对不同的待测样品以及对测定结果准确性的要求不同，我们可以采用不同的方法来测定样品中蛋白质的含量。点击这里进入下载页面：进入下载页面......阅读全文
紫外吸收法与双缩脲法测蛋白质含量相比，有什么优缺点
1．蛋白质测定的Folin-酚比色法（即Lowry法）的定量范围为5～100μg蛋白质,灵敏度高；但操作要费较长时间,且Folin试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用；不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度也稍有不同.紫外吸收法测
紫外吸收法与双缩脲法测蛋白质含量相比，有什么优缺点
1．蛋白质测定的Folin-酚比色法（即Lowry法）的定量范围为5～100μg蛋白质,灵敏度高；但操作要费较长时间,且Folin试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用；不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度也稍有不同.紫外吸收法测
蛋白质浓度测定（双缩脲法）
实验概要1．掌握本实验方法的原理和操作2．掌握标准工作（A—C）曲线的制作3．熟悉蛋白质定量测定的几种常用方法实验原理测定蛋白质的定量方法有很多，目前常用的有凯氏定氮法；比色法主要包括双缩脲法、Folin-酚试剂法及 染料结合法；紫外分光光度法等双缩脲(Biuret)法：在碱性溶液中，双缩脲(H2N
蛋白质浓度测定（双缩脲法）
实验原理测定蛋白质的定量方法有很多，目前常用的有凯氏定氮法；比色法主要包括双缩脲法、Folin-酚试剂法及 染料结合法；紫外分光光度法等双缩脲(Biuret)法：在碱性溶液中，双缩脲(H2N—CO—NH—CO—NH2)与二价铜离子作用形成紫红色的络合物，这一反应称双缩脲反应。凡分子中含二个或二个以上
蛋白质含量的定量测定——双缩脲法（Biuret法）
实验原理具有两个或两个以上肽键的化合物皆有双缩脲反应。在碱性溶液中双缩脲与铜离子结合形成复杂的紫好色复合物。而蛋白质及多肽的肽键与双缩脲的结构类似，也能与Cu2+形成紫红色络合物，其最大光吸收在540nm处。其颜色深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质的分子量及氨基酸的组成无关，该法测定蛋白质的浓度范围
蛋白质定量检测方法——双缩脲法
双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。鉴定反应蛋
蛋白质浓度测定（双缩脲法）实验
实验原理测定蛋白质的定量方法有很多，目前常用的有凯氏定氮法；比色法主要包括双缩脲法、Folin-酚试剂法及 染料结合法；紫外分光光度法等双缩脲(Biuret)法：在碱性溶液中，双缩脲(H2N—CO—NH—CO—NH2)与二价铜离子作用形成紫红色的络合物，这一反应称双缩脲反应。凡分子中含二个或二个以上
测量蛋白质的方法双缩脲法
当脲被小心地加热至150-160摄氏度时,可由两个分子间脱去一个氨分子而生成二缩脲,也叫双缩脲,双缩脲与碱及少量硫酸铜溶液作用生成紫红色的配合物,此反应称为双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有肽键,与双缩脲结构相似,故也能呈现此反应而生成紫红色配合物,在一定条件下其颜色深浅与蛋白质含量成正比,据此可用吸
双缩脲法皮尼克法测定蛋白质
1 原理： 双缩脲在碱性条件中，能与CuSO4结合成红紫色的络合物。pro分子中含有肽链与双缩脲结构相似，也呈此反应。本法直接用于测定像小麦粉等固体试样的pro含量。但作为铜的稳定剂，酒石酸钾钠比甘油好些。小麦粉中的pro能直接地一边抽出一边进行定量。 2 试剂 ⑴甘油作为稳定剂：取10m
蛋白质含量测定法双缩脲法
本法系依据蛋白质分子中含有的两个以上肽键在碱性溶液中与Cu2+形成紫红色络合物，在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比，以蛋白质对照品溶液作标准曲线，采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。 本法快速、灵敏度低，测定范围通常可达1～10mg。本法干扰测定的物质主要有硫酸铵、三羟甲基氨基甲烷缓冲液
蛋白质浓度测定（双缩脲法）实验介绍
实验原理测定蛋白质的定量方法有很多，目前常用的有凯氏定氮法；比色法主要包括双缩脲法、Folin-酚试剂法及 染料结合法；紫外分光光度法等双缩脲(Biuret)法：在碱性溶液中，双缩脲(H2N—CO—NH—CO—NH2)与二价铜离子作用形成紫红色的络合物，这一反应称双缩脲反应。凡分子中含二个或二个以
凯氏定氮仪与双缩脲法的比较分析
蛋白质是生命的物质基础，是有机大分子，是构成细胞的基本有机物，是生命活动的主要承担者。虽然蛋白质在副食中含量较高，且并不是我们每天热量的主要来源，但是我们却离不开蛋白质。由于蛋白质是直接参与人体生理活动的物质，是人体必需的营养物质，所以无论是在粮食、乳制品还是饮料中人们对蛋白质的要求都是十分高的。因
双缩脲法的试验原理简介
双缩脲（NH2CONHCONH2）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与二价铜离子形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能够以一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。 紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成
简述双缩脲法的操作方法
1、标准曲线的测定：取12支试管分两组，分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升的标准蛋白质溶液，用水补足到1毫升，然后加入4毫升双缩脲试剂。充分摇匀后，在室温（20~25℃）下放置30分钟，于540nm处进行比色测定。用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液。取两组测定的平均值
关于双缩脲法的名词解释
双缩脲反应产生的紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。 双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜，而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境，因此它可被其他碱，如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾，可延长试剂的使用寿命。
双缩脲法血清总蛋白测定实验
实验方法原理 凡分子中含有两个甲酰胺基（－CONH2－）的化合物都能与碱性铜溶液作用，形成紫红色化合物这一反应称双缩脲反应蛋白质分子中有许多肽健（－CONH2－）都能起此反应，而且各种血浆蛋白显色程度基本相同．实验步骤 一、实验操作：按表进行混匀，置25℃30min。（37℃10min）在波长540
双缩脲法血清总蛋白测定实验
实验方法原理凡分子中含有两个甲酰胺基（－CONH2－）的化合物都能与碱性铜溶液作用，形成紫红色化合物这一反应称双缩脲反应蛋白质分子中有许多肽健（－CONH2－）都能起此反应，而且各种血浆蛋白显色程度基本相同．实验步骤一、实验操作：按表进行混匀，置25℃30min。（37℃10min）在波长540nm
双缩脲法和凯氏定氮法测定饲料中蛋白质含量的比较...
饲料蛋白质含量的测定通常采用国标规定的凯氏定氮法, 但用双缩脲比色法测定饲料中蛋白质含量也有报道( 陈革, 2003) 。本实验对多种饲料样品采用双缩脲比色法进行蛋白质含量测定,并将结果与凯氏定氮法进行对比和分析, 为实际工作中选择合理的方法进行饲料中蛋白质含量的测定提供科学依据。1 双缩脲法原理当
双缩脲法测蛋白质中该如何校正实验结果
具有两个或两个以上肽键的化合物皆有双缩脲反应。在碱性溶液中双缩脲与铜离子结合形成复杂的紫红色复合物。而蛋白质及多肽的肽键与双缩脲的结构类似，也能与铜离子形成紫红色配位化合物，其最大光吸收在540nm处。其颜色深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质的相对分子质量及氨基酸的组成无关，该法测定蛋白质的浓度范围
关于双缩脲法的试验器材相关介绍
1. 试剂： （1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（BSA）或标准酪蛋白，配制成10mg/ml的标准蛋白溶液，可用BSA浓度1mg/ml的A280为0.66来校正其纯度。如有需要，标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，计算出其纯度，再根据其纯度，称量配制成标准蛋白质溶液。
蛋白质含量的测定方法有哪些
蛋白质含量测定的方法有微量凯氏定氮法、双缩脲法、folin―酚试剂法、考马斯亮兰法、紫外吸收法等。1、微量凯氏定氮法：含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸铵。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。2、双缩脲法：双缩脲是两个分子
蛋白质含量的测定方法有哪些
蛋白质含量测定的方法有微量凯氏定氮法、双缩脲法、folin―酚试剂法、考马斯亮兰法、紫外吸收法等。1、微量凯氏定氮法：含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸铵。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。2、双缩脲法：双缩脲是两个分子
蛋白质常见的四种测定方法之双缩脲法原理
常见的蛋白质检测方法很多，包括凯氏定氮法、双缩脲法、酚试剂法、紫外吸收法等。 蛋白质常见的四种测定方法之双缩脲法原理： 具有两个或两个以上肽键的化合物皆有双缩脲反应。在碱性溶液中双缩脲与铜离子结合形成复杂的紫好色复合物。而蛋白质及多肽的肽键与双缩脲的结构类似，也能与Cu2+形成紫红色络合物，
紫外吸收法测蛋白质含量
蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm 处，其吸光度（即光密度值）与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的
关于蛋白定量的分析方法双缩脲法的简介
双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。鉴定反
Biuret法测定蛋白质含量逐渐隐退的原因分析
蛋白质含量测定法，是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。蛋白质的测定在不断的更新以及替换，但是不论时代如何的进步，蛋白质测定仪就有四种较为经典的检测 方法，凯氏定氮法（可以直接使用自动型凯氏定氮仪来进行替代），双缩尿法（Biuret法 ）、Folin－酚试剂法（Lowry法）和紫外吸
蛋白质定量检测方法——紫外吸收法
大多数蛋白质在280nm波长处有特征的最大吸收，这是由于蛋白质中有酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸存在，可用于测定0.1～0.5mg/mL含量的蛋白质溶液。取9支试管分别标号，前8支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液，1号试管不加标准蛋白溶液，最后一支试管加待测蛋白质溶液，而不加标准蛋白溶液，每支试管液体总
测量蛋白质的方法紫外吸收法
蛋白质及其降解产物的芳香环残疾,在紫外区内对一定波长的光具有选择性吸收作用。在次波长下(280nm),光吸收程度与蛋白质浓度成直线关系,因此,通过测定蛋白质溶液的吸光度,并参照事先用凯氏定氮法测定蛋白质含量的标准样所做的标准曲线,即可求出样品蛋白质含量。考马斯亮蓝G-250是一种蛋白质染料,与蛋白质
常用的测定蛋白质含量方法的比较
蛋白质定量是生物化学、食品检验和其它生命学科zui常涉及的分析内容，是临床诊断的重要指标，也是许多生物制品、药物、食品质量检测的重要指标。生化实验中，在对生化药品，特别是蛋白质、酶、某些多肽或蛋白质激素的分离纯化时，对蛋白质进行准确可靠的定量分析是非常重要的。 紫外分光光度法是根
浅谈食品中蛋白质测定方法的研究进展
蛋白质是构成生物体细胞组织的重要成分。食物中的蛋白质是人体中氮的惟一来源, 具有糖类和脂肪不可替代的作用。蛋白质与营养代谢、细胞结构、酶、激素、病毒、免疫、物质运转和遗传等密切相关, 其分离与定性、定量分析是生物化学和其他生物学科、食品检验、临床检验、诊断疾病、生物药物分离提纯和质量检验中最重要的工