转基因植物的分子检测与鉴定方法（三）
3 转基因植株外源基因表达情况的检测与鉴定尽管在mRNA水平也能一定程度地研究外源基因的表达，但存在mRNA在细胞质中被特异性地降解等情况，mRNA与表达蛋白质的相关性不高(相关系数低于0.5)，基因表达的中间产物mRNA水平的研究并不能取代基因最终表达产物的研究。转基因植株外源基因表达的产物一般为蛋白，外源基因编码蛋白在转基因植物中能够正常表达并表现出应有的功能才是植物基因转化的最终目的。外源基因表达蛋白检测主要利用免疫学原理，ELISA及Western杂交是外源基因表达蛋白检测的经典方法。3.1 ELISA检测ELISA是酶联免疫吸附法(enzyme—linked immunosorbent assays)的简称，基础是抗原或抗体的同相化及抗原或抗体的酶标记，把抗原抗体反应的高度专一性、敏感性与酶的高效催化特性有机结合，从而达到定性或定量测定的目的。ELISA有直接法、间接法和双抗夹心法之分，目前......阅读全文
转基因植物的分子检测与鉴定方法（四）
4.2 试纸条技术与ELISA原理相似，不同之处是以硝化纤维膜代替聚苯乙烯反应板为固相载体。先将特异性抗体吸附在膜上，将膜放入混有样品的溶液中，蛋白质随着液相扩散，遇到抗体，发生抗原-抗体反应，通过阴性对照筛选阳性结果，并给出转基因成份含量的大致范围。试纸条方法是一种快速简便的定性检测方法，将试纸条
转基因植物的分子检测与鉴定方法（三）
3 转基因植株外源基因表达情况的检测与鉴定尽管在mRNA水平也能一定程度地研究外源基因的表达，但存在mRNA在细胞质中被特异性地降解等情况，mRNA与表达蛋白质的相关性不高(相关系数低于0.5)，基因表达的中间产物mRNA水平的研究并不能取代基因最终表达产物的研究。转基因植株外源基因表达的产物一般
转基因植物的分子检测与鉴定方法（二）
1.1.2.2 降落PCRTD-PCR是一种在一个反应管或少数几个反应管中通过一系列退火温度逐渐降低的反应循环来达到最佳扩增目的基因的PCR方案。它通过体系自身的代偿功能弥补以反应体系和并非完美的循环参数所造成的不足。此策略保证了最初形成的引物模板杂交体具最强的特异性。尽管最后一些循环采用的退火温
转基因植物的分子检测与鉴定方法（一）
随着分子生物学和植物基因工程的不断发展，越来越多的育种工作者开始利用转基因技术获得常规育种技术难以得到的新种质和新品种。植物转基因技术最大的好处在于可以打破自然界物种间原有的生殖隔离，促进基因在不同物种间的交流，极大地丰富变异类型，增大遗传多样性，为植物新品种的培育提供丰富的育种资源。通过对基因功能
转基因植物检测的探针制备过程
转基因植物检测的探针制备以含中间载体质粒的大肠杆菌材料为例进行介绍。(一)中间载体质粒 DNA 提取(略)(二)质粒 DNA 限制酶切及探针片段回收1、操作(1)限制性内切酶消化在0.5mL Eppendorf 管中,按如下顺序及用量加入试剂,建立 20μL 酶切体系:无菌蒸馏水6μL,10倍缓冲液
转基因植物Gus报告基因的检测
一、原理Gus (b-glucuronidase)基因作为一种报告基因，在植物遗传转化研究中有广泛的用途。Gus基因来自于大肠杆菌，编码b－葡聚糖苷酶（一种水解酶），可催化底物5－溴－4－氯－3－吲哚葡聚糖醛酸苷（5－bromo-4-chloro-3-indolyl-glucronide，缩写为
转基因植物产品数字PCR检测方法
转基因植物产品数字PCR检测方法 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由全国生化检测标准化技术委员会（SAC/TC 387）提出并归口 。 本标准主要起草单位 ： 中国检验检疫科学研究院、广西出入境检验检疫局检验检疫技术中心 、中国农
转基因植物产品数字PCR检测方法
前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由全国生化检测标准化技术委员会（SAC/TC 387）提出并归口 。 本标准主要起草单位 ： 中国检验检疫科学研究院、广西出入境检验检疫局检验检疫技术中心 、中国农业大学 、中国农业科学院油菜作物研
转基因植物产品数字PCR检测方法
转基因植物产品数字PCR检测方法 前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由全国生化检测标准化技术委员会（SAC/TC 387）提出并归口 。本标准主要起草单位 ： 中国检验检疫科学研究院、广西出入境检验检疫局检验检疫技术中心 、中国农业大学 、中国农业科学院油菜作物研究所。本
转基因植物NPTⅡ基因PCR检测试剂盒流程步骤
1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。 2. 为避免RNA降解，样本处理过
关于转基因植物的介绍
转基因植物(Genetically modified plants)是拥有来自其他物种基因的植物。该基因变化过程可以来自不同物种之间的杂交，但今天该名词更多的特指那些在实验室里通过重组DNA技术人工插入其他物种基因以创造出拥有新特性的植物。 转基因作物的种类主要有大豆、玉米、棉花和油菜，其性状
说说转基因植物“那点事儿”
设想，你要把一台机器，从生产厂里运输到需要这台机器的工厂里，并让它顺利工作，要通过几个步骤呢？首先呢，我们要先把这台机器生产出来，然后打包，装到汽车上并运输到目的工厂内，安装机器，最后经过一系列调试，才能让工厂使用这台新机器进行新产品的生产。和这一过程相似，生产转基因植物，也需要上面一系列步骤。在一
转基因植物疫苗的概念
转基因植物疫苗 将编码某一病原保护性抗原的基因转入植物并在植物中表达，吃这些植物性食物的同时，就完成了一次预防接种.
关于转基因植物的发展介绍
在国家“863”高新技术研究与发展计划及国家科技攻关计划的资助下，中国转基因植物的研究和开发取得了显著的进展，有些研究已经达到国际先进水平。据1996年国生物技术学会统计，中国投入研究和开发的转基因植物达47种，涉及各类基因103种有近20种转基因植物进入了田间试验或环境释放阶段。至1999年，
转基因植物的直接转入法
这是将裸露的DNA直接导入植物细胞，然后将这些细胞在体外培养再生出植株。裸露的DNA的转化效率较低，因而要辅之以高效率的组织培养系统。 植物细胞有一层很厚的细胞壁，因此需先去除植物细胞壁，使之成为原生质体，然后用来直接转入外源DNA。当然，也可用机械的方法将DNA直接注入植物细胞而毋须去除细胞
转基因植物疫苗的功能特点
将编码某一病原保护性抗原的基因转入植物并再植物中表达，吃这些植物性食物的同时，就完成了一次预防接种。
转基因植物技术的研究目的
转基因植物是基因组中含有外源基因的植物。通过原生质体融合、细胞重组、遗传物质转移、染色体工程技术获得，改变植物的某些遗传特性，培育优质新品种，或生产外源基因的表达产物，如胰岛素等。 在过去的二十年里，随着分子生物学各领域的不断发展，植物基因的分离、基因工程载体的构建、细胞的基因转化、转化细胞的
转基因植物中的筛选基因
基因工程（DNA重组技术）是在离体条件下对不同生物的遗传物质（DNA）进行人为“加工”，并按照人们的意愿重新组合，以改变生物的性状和功能，然后再通过适当的载体将重组DNA转入生物体或细胞内，并使其在生物体内或细胞中表达，从而获得新的生物机能。这种利用基因工程技术获得的植物一般称为“基因工程植物”。自
转基因植物的GUS表达分析
实验概要本实验对转基因拟南芥进行了GUS组织化学染色分析及GUS活性测定。主要试剂X-Gluc，丙酮，乙醇，BSA，考马斯亮蓝溶液主要设备显微镜(BX50 OLYPUS)，研钵，高速离心机，Nano drop核酸蛋白测定仪实验材料转基因拟南芥实验步骤1. 转基因植物的GUS组织化学染色分析 1)
以大肠杆菌为材料探讨转基因植物检测的探针制备方法
以含中间载体质粒的大肠杆菌材料为例进行介绍。(一)中间载体质粒 DNA 提取(略)(二)质粒 DNA 限制酶切及探针片段回收1、操作(1)限制性内切酶消化在0.5mL Eppendorf 管中,按如下顺序及用量加入试剂,建立 20μL 酶切体系:无菌蒸馏水6μL,10倍缓冲液2μL,质粒 DNA10
转基因植物TETR基因PCR检测试剂盒样品DNA的制备
1.用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。。也可以选购本公司的一管式病毒DNAOUT或其升级版柱式病毒 DNAOUT。本试剂盒免费赠送15次DNA病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAOUT的成分)。稀释阳性对照(以10E2-10E7这6个10倍稀释度为例。由于标
单分子荧光检测
单分子检测被称为分析化学的极限，近年来取得了重要进展。其中，单分子荧光分析是实现单分子检测最灵敏的光分析技术。单分子荧光检测的关键在于确保被照射的体积中只有一个分子与激光发生作用以及消除杂质荧光的背景干扰。通常采用高效滤光片，利用共焦、近场合消失波激发，可以达到此目的。单分子荧光检测可提供单分子水平
转基因植物的潜在危害有哪些？
随着人类认识的发展，转基因植物的种种潜在危害也逐渐被认识。 1、具有高产、抗性强的转基因植物品种不断地被推广，势必导致品种的单一化和贫化。 2、转基因植物的目的基因发生逃逸，亦即通过异花授粉与野生近缘种杂交，可能产生新的杂草。 3、转基因植物由于抗性强，能适应各种恶劣环境，其中有些作物，它
转基因植物清除有毒污染潜力大
美国华盛顿大学研究人员莎伦•多蒂在最新一期的《美国国家科学院院刊》发表报告称，经过基因工程改良的白杨树苗可以吸收三氯乙烯等有毒物质，并能将其分解或经过代谢转化成无毒的副产物，其速度是正常树苗的100倍。该研究揭示了利用基因改良的植物来清除有毒污染物的极大潜力。 十多年来，科学家不断试验用植物
关于转基因植物的意义有哪些？
植物转基因技术是指把从动物、植物或微生物中分离到的目的基因，通过各种方法转移到植物的基因组中，使之稳定遗传并赋予植物新的农艺性状，如抗虫、抗病、抗逆、高产、优质等。随着现代生物技术的迅速发展，植物转基因技术方兴未艾。自从1983年首次获得转基因植物后，至今已有35科120多种植物转基因获得成功。
农业农村部发转基因植物产品检测标准－涉DNA、PCR定性方法
分析测试百科网讯 近日，中华人民共和国农业农村部发布《转基因植物及其产品成分检测 基因组DNA标准物质制备技术规范》的标准公告。据悉，此次公告17项标准业经专家审定通过，涉及转基因植物及其产品成分检测，基因组DNA标准物质制备技术规范、PCR定性方法等。现批准发布为中国人民共和国国家标准，自20
简述转基因植物的农杆菌介导法
农杆菌的Ti质粒可以作为载体。Ti质粒上有两个区域，一个是T-DNA区，这是能够转移并整合进植物受体的区段；另一个是Vir区，它编码实现质粒转移所需的蛋白质。将待转化的外源基因先克隆在大肠杆菌质粒上，然后将此质粒转入不会引起冠瘿瘤的农杆菌（这种菌的Ti质粒已除去了T-DNA），使外源基因通过同源
转基因植物的由来和优点的介绍
由来 转基因植物的研究主要在于改进植物的品质，改变生长周期或花期等提高其经济价值或观赏价值；作为某些蛋白质和次生代谢产物的生物反应器，进行大规模生产；研究基因在植物个体发育中，以及正常生理代谢过程中的功能! 优点 以植物作为生物技术的实验材料有其特定的优点，那就是植物细胞大部分都有全能性(
转基因植物的简介和重要作用
转基因植物是基因组中含有外源基因的植物。通过原生质体融合、细胞重组、遗传物质转移、染色体工程技术获得，改变植物的某些遗传特性，培育优质新品种，或生产外源基因的表达产物，如胰岛素等。 在过去的二十年里，随着分子生物学各领域的不断发展，植物基因的分离、基因工程载体的构建、细胞的基因转化、转化细胞的
分子杂交——Northern基因检测
实验概要Northern杂交采用琼脂糖凝胶电泳，将分子量大小不同的RNA分离开来，随后将其原位转移至固相支持物（如尼龙膜、硝酸纤维膜等）上，再用放射性（或非放射性）标记的DNA或RNA探针，依据其同源性进行杂交，最后进行放射自显影（或化学显影），以目标RNA所在位置表示其分子量的大小，而其显影强度则