杂交膜转印膜*纤维素膜NC膜与PVDF膜的区别

1. *纤维素膜*纤维素膜是蛋白印迹广泛使用的转移介质,对蛋白有很强的结合能力,而且适用于各种显色方法,包括同位素,化学发光(Luminol类)、常规显色、染色和荧光显色;背景低,信噪比高。NC膜的使用也很简便,比如不需要甲醛预处理,只要在无离子水面浸润排出膜内气泡,再在电泳缓冲液中平衡几分钟就可以了;比如NC膜很容易封闭,也不需要特别严谨的清洗条件。转移到NC膜上的蛋白在合适的条件下可以稳定保存很长时间,不过要注意的是纯的硝纤膜在比较脆,又容易卷,操作要小心,不适合用于需要多次重复清洗的用途--因为经不起多次“折磨”。选择硝纤膜时要注意的是选择合适的孔径,通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔径的膜,小于20KD的话建议选择0.2um的,如果小于7KD的话好选择0.1um的膜。另外还要注意选择纯的NC膜--混有含醋酸纤维(CM)的NC膜结合力会有所降低。另外提醒一句:由于NC膜上结合的蛋白会因为一些去污剂而被代......阅读全文

免疫印迹与免疫检测实验——半干转移系统转印蛋白质

实验材料蛋白质试剂、试剂盒转移缓冲液仪器、耗材半干燥转移装置滤纸实验步骤1.  制备样品,并在小型或标准尺寸的单向或双向凝胶上分离蛋白质。 2.  准备转印膜3.  拆卸凝胶夹层,除去积层胶。4.  组装转印夹层:Mylar聚酯薄膜屏蔽物3张以转移缓冲液饱和的滤纸已平衡的转印膜凝胶3张以转移缓冲液饱

如何在Western-Blot检测时提高大分子量蛋白的转印效率?

① 增加转印时间。② 在转印缓冲液中添加0.01%或0.02%的SDS以提高蛋白从胶中转出的效率。③ 减少转印缓冲液中甲醇的量。④ 使用低浓度的胶更利于转印。

企业为何“不想转”“不敢转”“不会转”?

  企业“不想转”“不敢转”“不会转”,资源要素支撑相对不足,高端化、智能化、绿色化、融合化水平参差不齐,转型升级环境尚待优化……7月4日,在“粤商·省长面对面协商座谈会”上,关于传统产业转型升级的讨论热火朝天。  习近平总书记在二十届中央财经委员会第一次会议上强调,“坚持推动传统产业转型升级,不能

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western转印的常见问题

问 题 可能原因 建议解决方法 推荐电压条件下电泳时间过长 电泳缓冲液过稀 配制新鲜缓冲液,使用1X

印媒称印天然气巨头在缅甸遭挖墙脚-便宜中国

  印度《金融快报》8月25日称,印度两大国营天然气巨头——印度石油公司和印度盖尔天然气公司在邻国缅甸遭中国“挖墙脚”,印度公司占有股份的气田以低廉的价格将能源卖给中国,印度自己却要花高价从别人手中买能源。   报道称,随着中缅天然气管道的贯通,北京方面力劝缅方与其签订独家供应天然气合同,缅

印三酮的化学特性

  茚三酮是一种用于检测氨或者一级胺和二级胺的试剂。该试剂近似为白色结晶,或浅黄色结晶粉末,微溶于乙醚及三氯甲烷,100℃以上变为红色。用于鉴定氨基酸,反应十分灵敏,是鉴定氨基酸的最简便方法。  茚三酮是一种用于检测氨或者一级胺和二级胺的试剂。当与这些游离胺反应时,能够产生深蓝色或者紫色的物质,叫做

湿转和干转,哪个方法更好?

对于一个完美的westernblot实验,蛋白在聚丙烯凝胶中根据天然分子量进行分离,蛋白被很好的从凝胶上转移到固相支持物上,然后通过特异性的抗体进行免疫检测。对于转印来说,使用湿转的方法是比较好的,因为凝胶和膜都能够完全浸没在转印buffer中,在半干转的条件下,转印是在两个电极板之间发生,这种类型

转管培养法与转瓶培养

转管培养法(roller tube culture)是Gey 提出的,实验室常用,为了扩大细胞产量,将试管改用转瓶,故称转瓶培养,其培养方法是一样的,试管或转瓶固定在支加上,倾斜度为5°~10°左右,或将转瓶放在一排排转轴之间,使转瓶随着转轴以每小时6~12 转缓慢转动。细胞贴附于玻璃壁

湿转和干转,哪个方法更好

  对于一个完美的westernblot实验,蛋白在聚丙烯凝胶中根据天然分子量进行分离,蛋白被很好的从凝胶上转移到固相支持物上,然后通过特异性的抗体进行免疫检测。   对于转印来说,使用湿转的方法是比较好的,因为凝胶和膜都能够完全浸没在转印buffer中,在半干转的条件下,转印是在两个电极板之间发

做western转膜,用湿转电泳,还是半干转电泳好

半干转要用专门的半干转膜仪,而湿转用电泳仪配附件即可;半干转所需时间较短,但控制不好,中间发热比较大容易把膜和胶烘坏;而湿转耗时较长,尤其对大分子量的蛋白转膜效果较好。相对来讲,还是湿法转膜的实验室多一些。

Western-转膜时用干转还是湿转效果比较好?

关键看效果怎么细分,干转,速度快,效率稍低,湿转,速度比较慢,转移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量为主,干转就挺好的,效率非常高,几分钟就做完了。分子量特别大,又没有其他人的方案做参考,可以先试试湿转。就是几个小时等得比较痛苦。好几个人做的话,真是等到花儿也谢了。至于说效果,不是

Western-转膜时用干转还是湿转效果比较好

关键看效果怎么细分,干转,速度快,效率稍低,湿转,速度比较慢,转移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量为主,干转就挺好的,效率非常高,几分钟就做完了。分子量特别大,又没有其他人的方案做参考,可以先试试湿转。就是几个小时等得比较痛苦。好几个人做的话,真是等到花儿也谢了。至于说效果,不是

印俄加强能源与安全合作

   俄罗斯总统普京12月10日抵达印度首都新德里,11日与印度总理莫迪举行了第十五届印俄首脑会晤。这是莫迪就任印度总理以来两人举行的第三次会晤。此前,普京与莫迪曾先后在今年的金砖国家峰会和二十国集团峰会上两次会晤。   为了向普京释放善意,莫迪特地在自己的社交账户上用俄语推送欢迎词。莫迪说,两国曾

环境宣教如何踏石留印?

  在日前召开的《全国环境宣传教育行动纲要(2011~2015年)》部际联席会暨全国生态文明宣传教育工作绩效评估试点工作会议上,作为试点省的山东省从能力建设、宣教效果、特色创新等方面对生态文明宣传教育工作进行了展示,受到了来自环境保护部、中宣部、中央文明办、教育部、共青团中央、全国妇联 6部委的

如何诊断膀胱印戒细胞癌?

  根据膀胱印戒细胞癌的临床表现及检查诊断一般无困难,但早期膀胱印戒细胞癌的诊断并不容易,要注意病史的特点与有关的辅助检查相结合综合判断,争取早期诊断。  原发性膀胱印戒细胞癌的诊断标准:  ①肿瘤多发生在膀胱的侧壁和底部;  ②常伴有腺性或囊性膀胱炎;  ③癌与正常膀胱上皮间有移行病变;  ④无其

电泳、转膜

转膜是把DNA从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物(一般是尼龙膜)上固定,是进行各种后续研究(如RFLP分析,阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究)的前提。实验目的:掌握Southern blotting的原理及操作步骤。实验原理:1. 转膜的方式:  向上的毛细管转移  向下的毛细管转移  同时向

印日盯上东非天然气资源

  印度《经济时报》10月26日报道称,国有公司印度石油(Oil India)正在同东非国家莫桑比克谈判,希望参与莫境内Rovuma-1超大海上气田的开发,获得该项目的部分权益。据透露,莫桑比克正在修改能源政策,根据新政策,参与该国油气资源开发的外国公司将有权利把属于自己的权益油气运回母国。

印红:我国湿地生态功能继续退化

  在今天召开的全国湿地保护管理工作会议上,国家林业局副局长印红指出,我国湿地生态退化的趋势仍在继续,湿地保护面临严峻挑战。   印红介绍说,通过对比分析首次全国湿地资源调查和已经完成第二次调查的6个省情况发现,北京、吉林和广东的湿地面积在进一步减少,黑龙江、江苏和天津虽然湿地面积没有减少,但湿地

印遇龙院士:“养猪”自有大学问

  在长沙市马坡岭,从一条小路进去,拐弯处有一个院子——中国科学院亚热带农业生态研究所。  当院子里只有3栋员工宿舍时,第一批来所里的湖南桃源小伙子印遇龙在宿舍后面建起了一栋猪舍。  “要研究猪,必须自己养一头猪。”几乎没有人料到,这一“养”就是30多年,“养”出了一个国际知名的畜禽健康养殖中心,“

简述膀胱印戒细胞癌的预防

  膀胱癌的预防有5个方面:  ①针对病因采取预防措施,如已经肯定在外来致癌因素中,染料、橡胶、皮革等工种能引起膀胱癌的发生,吸烟和服用某些药物,膀胱癌的发病率明显增高,这就要求改善染料、橡胶、皮革等工业的生产条件,提倡禁止吸烟,避免大量、长期服用可致膀胱癌的药物。  ②高度重视血尿患者的密切随访,

“养猪院士”印遇龙的四十年

  一双球鞋,一身运动服,一辆自行车,这是印遇龙每个上班日的标配;走起路来健步如飞,说话大嗓门;喜欢游泳、打乒乓球、跑步,智能手机玩得娴熟。已过花甲之年的印遇龙,生活中充满了朝气与活力。  与生活中的随意不同,科研中的印遇龙又是个十分严谨的人。他的科研哲学很简单:深入第一线,在生产中发现问题、解决问

垂直转印电泳槽的特点

 电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。电泳是指带电粒子在电场中的运动,不同物质由于所带电荷及分子量的不同,在电场中运动速度不同。   垂直转印电泳槽特点   1.采用进口高透明度聚碳酸酯抗划耐磨材质注塑成型,缓冲液无渗漏,方便观察电泳进程。   2.安全限位功能,开盖断电设计,避免操作安

光子嫩肤怎么会留下痘印

蓝宝石是激光的一种,波长不同而已。长痘痘的原因有很多,主要和内分泌有关,建议你先找准你长痘痘的原因,然后对症下药。而光子只是改善毛孔粗大,对长出来的痘痘没什么效果。

海藻酸钠在印纺工业的应用

  海藻酸钠在印染工业中用作活性染料色浆,优于粮食淀粉和其它浆料。印出的纺织品花纹鲜艳,线条清晰,给色量高,得色均匀,渗透性与可塑性均良好。海藻胶是现代印染业的最佳浆料,现已广泛应用于棉、毛、丝、尼龙等各种织品的印花,特别适用于配制拨染印花浆。  中国纺织部门以海藻胶与淀粉混合或代替淀粉配制经纱浆料

western-blot-试验中蛋白转膜总转不上去

当然,首先要考虑的问题是你转过头了,蛋白质跑出去了。其次你的电流有点大,你也没说转了多久?用的干转还是湿转?是不是拿出来的时候很热?这种情况有可能使蛋白质降解。我们一般是湿转用100mA转2小时, 干转所需电流更小。

转决定的概念

一般胚胎细胞一旦决定, 沿着特定类型进行分化的方向是稳定的, 但在果蝇中发现了某种突变体或培养的成虫盘细胞中有时会出现不按已决定的分化类型发育, 而生长出不是相应的成体结构, 这种现象叫转决定。

大气“推着”金星转

  金星的“超级旋转”大气层也许为其自转“添了一把柴”。6月18日,《自然—地球科学》在线发表的一项研究报告称,金星的自转速度,会随着其密集、快速流动的大气与其表面山脉之间的相互作用而发生改变。  金星自转缓慢,自转1周需要大约243个地球日。然而,金星探测器的测量尚未就1个金星日的精确长度达成一致

西红柿基因转殖

随着生物科技的发展,利用遗传工程,藉由 DNA 载体把外来基因导入植物体内,已经成功且高效率地育成传统育种法无法获得的作物新品种,改良作物承受逆境的能力,以减少损失或提高单位面积的产量,并减缓土地无限开发及农药肥料的滥用,省工又省成本。在各种植物基因转殖法中,比较常用的是基因枪转植、农杆菌转殖及电穿

转肽酶的介绍

  转肽酶(sortase)功能:在蛋白质生物合成过程中肽键的形成具有必须的作用。转肽酶识别特异多肽,催化不同的转肽反应。  在体内分布很广,如肾、肝、胰等脏器均有些酶。但血清中GGT主要来自肝脏,具有较强的特异性。所以当肝胆系统病变的时候,GGT活性升高,临床上测定此酶活性来协助诊断肝胆疾病。  

Western转膜步骤

下面的步骤适用于通过Xcell Ⅱ转印系统进行蛋白印记的大部分应用。为达到最佳效果,用户的优化是必要的。I. 所需材料:•Xcell SureLock™或Xcell Ⅱ™ Mini-Cell以及Blot Module(Cat. Nos. EI10001, EI9001及EI9051)•电泳后的迷你胶