WIKI资讯
WIKI资讯
实验材料 基因组DNA试剂、试剂盒 PCR 混合液仪器、耗材 96孔透明板和盖子水平离心机ABI PRISM 7700 测序系统热循环仪统计软件包实验步骤 1.96孔透明板B到H行每孔加2ul (30ng）基因组DNA，保留A行作对照—其中4孔只加2ul缓冲液作为「无 DNA」对照，余下8孔每孔加24基因组DNA作为阳性对照，两种纯合子各加4孔。2.每孔加23ul PCR混合液，盖上透明盖，在水平离心机上短暂离心，用ABI PRISM 7700测序仪得到一个PCR反应前荧光读数。使用「PlateRead」形式，确保选中Use Spectral Compensation forEndpoint 项（在Advanced Optionsinthe Instrument and Diagnostics菜单下）。3.用下面的条件在热循环仪上开始PCR。1个循环：2 min 50°C1个循环：10min 95°C(变性）40个循......阅读全文
感染性疾病有病原微生物引起，致病的病原微生物主要有病毒、细菌、衣原体、支原体和螺旋体等。这些病原体的传统检测方法通常采用形态学检查，体外培养和免疫学试验。但对某些难以培养的病原体，抗原抗体检测不能判断体内病原体 DNA 或 RNAde 复制情况，或存在检测灵敏度低等问题。自聚合酶链反应（ PCR ）