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非同位素分析基因活性实验——冻融裂解细胞荧光素酶分析

实验材料哺乳动物细胞试剂、试剂盒PBS仪器、耗材培养皿细胞刮子离心机实验步骤1. 用PBS分别洗3个60 mm 培养皿中的转染了荧光素酶质粒的细胞。 2. 每只培养皿中加1 ml 提取缓冲液,立即用橡胶刮子刮下细抱,移至1.5 ml 微量离心管中。离心15~30 s,弃上清。3. 在细胞沉淀中加100 μl 提取缓冲液,经3次冻融裂解细胞膜。 4. 将裂解的细胞在4℃以最大速度离心5 min,移出上清,分析其荧光素酶的活性。......阅读全文

非同位素分析基因活性实验——冻融裂解细胞荧光素酶分析

实验材料 哺乳动物细胞 试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 培养皿细胞刮子离心机 实验步骤 1.  用PBS分别洗3个60 mm 培养皿中的转染了荧光素酶质粒的细胞。   2.  每只培养皿中加1 ml 提取缓冲液,立即用橡胶刮子刮下细抱,移至1.5

基因活性的同位素分析实验——原位裂解细胞的CAT分析法

实验材料 转染细胞 试剂、试剂盒 Triton裂解液 仪器、耗材 培养皿培养箱 实验步骤 1.  60 mm 培养皿中转染了CAT表达质粒的细胞,用2 ml PBS洗1次。每培养皿加入2 ml 低渗缓冲液,在室温下温育2~5 min。 2.  吸去低

非同位素分析报道基因活性实验——萤火虫荧光素酶法

报告基因是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控,筛选得到转化体。 实验材料 转染细

报道基因活性的同位素分析实验

CAT活性的层析分析法 原位裂解细胞的CAT分析法 CAT活性的相-抽提分析法 人生长激素的放射免疫分析法            

非同位素分析报道基因活性实验

萤火虫荧光素酶法 冻融裂解的细胞的荧光素酶分析 β-半乳糖苷酶报道基因的化学发光分析             实验材料

非同位素分析报道基因活性实验

实验材料 转染细胞 试剂、试剂盒 PBS荧光素贮液Triton甘氨酰甘氨酸 仪器、耗材 橡胶细胞刮子绘图仪比色杯 实验步骤 1.  用冰冷的PBS洗涤在3个60  mm 培养皿中的转染了荧光素酶表达质粒的细胞各3次, 毎次用4  ml PBS洗后吸去洗液。   2.  每个培养皿中加

报道基因活性的同位素分析实验

实验材料 DNA 试剂、试剂盒 PBS乙酸乙酯氯仿甲醇Tris·Cl 仪器、耗材 薄层层析缸滤纸离心管离心机 实验步骤 1.  100 mm 培养皿中的转染了CAT表达质粒的贴壁细胞,用PBS洗两次,每次5 ml每培养皿加入1 ml TEN溶液。将细胞置于冰浴5 min。   2.

非同位素分析报道基因活性实验——β-半乳糖苷酶

实验材料 转染的细胞 试剂、试剂盒 PBSTriton裂解液β-半乳糖苷酶反应缓冲液光发射加速液 仪器、耗材 细胞刮子绘图仪发光计计数器 实验步骤 1.  用PBS分别洗涤两次60 mm 培养皿中的转染β-半乳糖苷酶表达质粒的细胞及模拟转染的细胞。

报道基因活性的同位素分析实验——CAT活性的层析分析法

报告基因 是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控,筛选得到转化体。 实验材料 DN

报道基因活性的同位素分析实验——CAT活性的相-抽提分析法

实验材料 转染细胞 试剂、试剂盒 氯霉素Tris·ClTMPD二甲苯 仪器、耗材 离心机离心管培养箱 实验步骤 一、来源于哺乳动物细胞 1.  按“CAT活性的层析分析法”中的步骤1~5的冻融法,制备哺乳动物细胞提取物。如果用胰蛋白酶消化或制细胞方法