细胞提取物中β半乳糖苷酶的测定实验
本方案介绍报道分子载体（请见图 17-5) 转染哺乳动物细胞后，测定表达的β-半乳糖苷酶活性。本方法既简单快速，又可以用可见光分光光度计进行测定。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料转染了感兴趣 DNA 的哺乳动物培养细胞试剂、试剂盒大肠杆菌β-半乳糖苷酶Tris-Cl磷酸钠ONPGNa2CO3β-巯基乙醇MgCl2实验步骤材料缓冲液和溶液贮存液稀释到适当浓度。100XMgCl20.1mol/L MgCl24.5mo1/L β-巯基乙醇临用前，加入适量的 14.7mol/Lβ-巯基乙醇贮存液。Na2CO3(1mol/L)10.6 g 无水固体溶于 100 ml 水中。1xONPGONPG 溶于 0.1mol/L 磷酸钠（pH7.5) 中，浓度为 4 mg/ml。磷酸钠（0.1mol/L，pH7.5）混合 41 ml 0.2mol/L Na2HPO4•2H2O(Mt=......阅读全文
酵母提取物的制备实验
基本方案 实验方法原理 酵母细胞的裂解方法有很多种，包括自溶、压力破碎（如French加压罐）、研磨（玻璃珠振荡）和酶裂解（如Zymolase)等。本方案讨论
酵母提取物的制备实验
实验方法原理 酵母细胞的裂解方法有很多种，包括自溶、压力破碎（如French加压罐）、研磨（玻璃珠振荡）和酶裂解（如Zymolase)等。本方案讨论的振荡玻璃珠研磨，是最简便的方法之一。这对于小体积（如＜1mL的）和数升体积都很有效。经相差显微镜检测，细胞破碎率一般＞95%。实验材料 新鲜培养的酵母
卤素水分测定仪能够快速测定牛奶、酸奶中全乳固体
全乳固体是牛乳和酸奶的一项重要检测指标，目前使用的测定方法是GB5409-85及GB/T5009146-2003〔1，2〕。其一为计算法，因脂肪测定复杂，成本高用时长，故很少采用；其二为减重法，测定耗时长达4～5h，不适合大批样品的测定，对生产的实用性也不大。袁旭等〔3-5〕在GB5409-8
卤素水分测定仪能够快速测定牛奶、酸奶中全乳固体
全乳固体是牛乳和酸奶的一项重要检测指标，目前使用的测定方法是GB5409-85及GB/T5009146-2003〔1，2〕。其一为计算法，因脂肪测定复杂，成本高用时长，故很少采用；其二为减重法，测定耗时长达4～5h，不适合大批样品的测定，对生产的实用性也不大。袁旭等〔3-5〕在GB5409-8
NK细胞活性测定实验
实验方法原理 用放射性核素标记靶细胞，当靶细胞受到破坏时，放射性核素被释放出来，通过测定释放或残留在未被破坏细胞内的放射性核素放射活性，即可计算和推测杀伤细胞的细胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本实验采用51Cr释放法检测人NK细胞活性。实验材料 靶细胞试剂、试
细胞周期测定实验
细胞计数法 BrdU渗入法 流式细胞仪测定法 实验方法原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力，可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的
细胞周期测定实验
细胞计数法 BrdU渗入法 流式细胞仪测定法 实验方法原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力，可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的
从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物
核提取物的制备 核提取物制备优化 细胞质（S-100)组分的制备 实验方法原理 实验材料
从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物
实验方法原理 实验材料 转瓶或单层培养的哺乳动物细胞（如HeLa细胞）试剂、试剂盒 PBS低渗缓冲液高盐缓冲液含1. 2 mol L KCl透析缓冲液液氮仪器、耗材 贝克曼 JS4. 2 转子或相当的转子50 mL 圆锥形刻度聚丙烯离心管（对较小体积的提取物也可用 15 mL 的离心管）Doun
从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物
核提取物的制备核提取物制备优化细胞质（S-100)组分的制备实验方法原理实验材料转瓶或单层培养的哺乳动物细胞（如HeLa细胞） 试剂、试剂盒PBS
Nature子刊：半乳凝素可直接对抗伪装细菌
科学家发现，我们的身体能产生一个蛋白质家族，它们能识别并杀死那些糖涂层非常类似于我们自身细胞的细菌。 这些蛋白质称为半乳凝素（galectins），它们能够从各种各样的致病细菌中识别出糖类，并有可能被作为抗生素来治疗某些感染。相关研究结果发表在2014年5月11日的《Nature Chemic
细胞计数及活力测定实验的实验原理
培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力，由组织中分离细胞一般也要检查活力，以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用
植物生理学中细胞分裂素含量的测定实验中的关键步骤
[实验步骤]：1．挑选大小一致的萝卜种子，用蒸馏水浸泡15min，放在有湿滤纸的培养皿中，在26。C黑暗条件下萌发30h。2．用裰子取下大小一致的萌发萝卜幼苗的子叶10对，去除下胚轴，子叶在蒸馏水中浸泡以去除内源激素，吸水纸吸干水后用1／10000灵敏度的电子天平称鲜重：3．分别取不同浓度的6-BA
刺蒺藜提取物的含量测定
含量测定方法：UV 1、试剂和仪器 改良对氨基苯甲醛 甲醇 HP8453紫外可见分光光度计 1cm比色皿 2、对照品溶液 精密称取对照品（CoCl2·6H2O）0.6g于25ml容量瓶中，加水使溶解，定容至刻 度，摇匀，用1cm的比色皿在515±2nm处测定其吸收度为Acocl2·6H
罂粟果提取物的含量测定
照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）测定。 色谱条件与系统适用性试验 用辛基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-0.0025mol/L庚烷磺酸钠溶液-乙腈（5：5：2）为流动相；检测波长为 220nm。理论板数按吗啡峰计算不小于1000。固相萃取柱系统适用性试验 用十八烷基硅烷键
关于岩藻糖苷酶的测定方法介绍
荧光法：利用AFU水解4-甲基伞型酮α-L-岩藻吡喃糖苷，释放4-甲基伞型酮，用碱性缓冲液终止反应，并使产物呈现荧光，用360nm或365nm激发波长和400nm或448nm发射波长检测荧光强度，对照不同浓度4-甲基伞型酮制备的标准曲线求酶活性。此法敏感性高，最小检出限为0.06U/L。 比色
半微量定氮法测定肉中的挥发性盐基氮
挥发性盐基氮(TVB-N)能有效地反映肉的新鲜度,新鲜肉、次鲜肉、变质肉之间挥发性盐基氮的差异非常明显,并与感官变化一致,是评定肉的新鲜度变化的客观指标。目前,通常采用半微量定氮法测定肉中的挥发性盐基氮,但该方法有操作过程繁琐、费时的缺点,其次在加样蒸馏时,碱的作用会使反应室内样液剧烈沸腾而发泡
哺乳动物原代细胞培养的β半乳糖苷酶（分光光度测定）
试剂和器材： 1.反应缓冲液：5g/L聚乙二醇辛基苯基醚（Triton X-100）、0.05mol/L柠檬酸钠-磷酸盐缓冲液，pH4.3；2.终止液：0.25%甘氨酸-NaOH，pH10；3.底物：6mmol/L对硝基苯基-β-半乳呋喃糖苷溶于缓冲溶液中；4.微量离心机，带1.5—2.0ml小管；
食品中菌落总数测定实验
实验方法原理 菌落总数是指食品经过处理，在一定条件下培养后，所得1 g或1 ml检样中所含细菌菌落总数。菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数，菌落总数并不能
食品中菌落总数测定实验
实验方法原理 菌落总数是指食品经过处理，在一定条件下培养后，所得1 g或1 ml检样中所含细菌菌落总数。菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数，菌落总数并不能区分
《乳与乳制品中蛋白质的快速测定方法》进行审查
12月17日，河北省质量技术监督局组织有关专家对衡水市承担的省地方标准《乳与乳制品中蛋白质(非氮元素)的快速测定方法》进行了审查。 与会专家对标准文本和编制说明进行了逐字逐句的审定。专家们一致认为：该标准的编写规则符合国家有关方针、政策、法律和法规，与国家有关标准协调一致;该标准创新设置了适合现场
牛奶中乳清蛋白的测定LUMEX毛细管电泳法
乳品和乳制品的真实性鉴别方法之一就是通过乳清蛋白的定性和定量组成及其比值来确定的。酪蛋白在牛奶加工前占主导地位（约占蛋白质总量的80%），而乳清成分几乎不存在酪蛋白，其主要成分如下：β-乳球蛋白，α-乳白蛋白，牛血清白蛋白，免疫球蛋白，乳铁蛋白和其他次要蛋白质。众所周知，热处理（巴氏杀菌或灭菌技术）
牛奶中乳清蛋白的测定LUMEX毛细管电泳法
乳品和乳制品的真实性鉴别方法之一就是通过乳清蛋白的定性和定量组成及其比值来确定的。酪蛋白在牛奶加工前占主导地位（约占蛋白质总量的80%），而乳清成分几乎不存在酪蛋白，其主要成分如下：β-乳球蛋白，α-乳白蛋白，牛血清白蛋白，免疫球蛋白，乳铁蛋白和其他次要蛋白质。 众所周知，热处理（巴氏
α葡萄糖苷酶抑制剂的筛选原则
目前α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选主要有三种途径：天然动植物、微生物的提取物、微生物代谢物和人工合成的抑制剂。3.1 动植微生物提取物3.1.1 动物韩国学者Kang Sun Ryu和我国的桂仲争等[2]对全蚕粉的降糖效果都有报道，同时提示其作用机理与抑制α-麦芽糖苷酶的活性有关。3.1.2 植物许多学
尿β－半乳糖苷酶（β－Dgalaetosidase，β－GAL）测定
β-GAL是一种广泛存在于人体组织的细胞酶，在人及动物肾单位尤其是近曲小管上皮细胞中含量较高。正常人尿中含量较低，但在肾毒性作用后，溶酶体内的β-GAL反应性增加，尿中含量升高，因此它也可以作为细胞溶酶体破坏后修复的标志之一。 参考值 16U／g肌酐 临床意义 （1）各类肾脏疾患时标本中
细胞化学词汇半致死基因
中文名称：半致死基因外文名称：semilethal gene含 义：合子致死基因的一种特 点：不是对所有个体都有致死作用半致死基因（semilethal gene）是合子致死基因的一种，但是有一部分个体会存活下来留下后代。已知果蝇中有这样的例子，在饲育温度 16.5℃时表现正常，饲育温度
核提取物的制备实验（一）
从培养细胞中分离的细胞核制备成的提取物在体外转录和mRNA加工中具有精确的功能，（1）纯化蛋白质（2）核提取物。实验方法原理通过向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后，可以降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析，是物理变化，可复原。对于特定的蛋白质，影响蛋白质盐析的主要因素
核提取物的制备实验（二）
从培养细胞中分离的细胞核制备成的提取物在体外转录和mRNA加工中具有精确的功能，（1）纯化蛋白质（2）核提取物。实验材料细胞核试剂、试剂盒KCl高盐缓冲液仪器、耗材透析膜离心机实验步骤1. 按基本方案中歩骤1~7操作。 2. 将细胞核悬液分成5等份。在冷室内不断搅拌，按如下方法在每份悬液中加入1
用乳蓟提取物治疗慢性丙型肝炎看来没有裨益
据7月18日刊《美国医学会杂志》上的一项研究披露，使用植物产品水飞蓟素——一种某些病人常常用来治疗慢性肝脏疾病的乳蓟提取物——对那些对治疗有抵抗性的慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染的患者而言其裨益并不比安慰剂更多。 慢性丙型肝炎病毒感染影响了全球人口中的近3%，它可能会导致肝硬化、肝功能衰竭
酿酒酵母培养基制备实验—检测酵母中β半乳糖苷酶活性
试剂、试剂盒酵母氮碱基葡萄糖SC-Ura 或 SC-Trp 或 SC-Len 或 SC-His 的混合物蒸馏水琼脂仪器、耗材磁力搅拌器锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的螺旋盖瓶或锥形瓶中将下面的成分溶于水中，置于搅拌器上混匀。酵母氮碱基 4.0 g，葡萄糖 12.0 g，SC-Ura 或 SC-Tr