用有机溶剂抽提法从DNA中除去溴化乙锭实验
欲从经 CsCl 梯度纯化的 DNA 中去除溴化乙锭,常用有机溶剂反复抽提的方法。随后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理欲从经 CsCl 梯度纯化的 DNA 中去除溴化乙锭,常用有机溶剂反复抽提的方法。随后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。实验材料DNA 样品试剂、试剂盒乙醇水饱和的异戊醇或 n-丁醇酚TE仪器、耗材透析管和夹离心机和转头实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液乙醇,水饱和的异戊醇或 n-丁醇(从离心制备的 DNA 中去除溴化乙锭要上述两种有机溶剂之一。),酚,酚:氯仿(1:1, V/V),TE ( pH 8.0)。2. 核酸和寡核苷酸通过 CsCl 梯度离心纯化的 DNA 样品3. 离心机和转头带有 HL-4 的转头和 50 ml 离心管的 Sorvall RT-6000 离心机(或与其相当的设备)Sorvall SS-34 转头(或与其相当的转头)4.......阅读全文
索氏抽提法操作步骤
操作步骤:1.把滤纸做成与提取器大小相应的滤纸筒,然后把需要提取的样品放入滤纸筒内,装入提取器。注意滤纸筒既要紧贴器壁,又要方便取放。(滤纸筒上可以套一圈棉线,方便提取完成后取出滤纸筒。)被提取物高度不能超过虹吸管,否则被提取物不能被溶剂充分浸泡,影响提取效果。被提取物亦不能漏出滤纸筒,以免堵塞虹吸
粗脂肪的定量测定:抽提法
一、目的与要求:1、熟悉掌握粗脂肪的测定方法。2、熟悉与掌握重量分析的基本操作,包括样品处理,烘干,恒重等。二、原理:本法为重量法,用脂肪溶剂将脂肪提出后进行称量,该法适用于固体和液体样品。通常将样品浸于脂肪溶剂,为乙醚或沸点30℃至60℃的石油醚,借助于索氏提取器进行循环抽提。用本法提取的脂肪性物
索氏抽提法步骤是什么
1.把滤纸做成与提取器大小相应的滤纸筒,然后把需要提取的样品放入滤纸筒内,装入提取器。注意滤纸筒既要紧贴器壁,又要方便取放。(滤纸筒上可以套一圈棉线,方便提取完成后取出滤纸筒。)被提取物高度不能超过虹吸管,否则被提取物不能被溶剂充分浸泡,影响提取效果。被提取物亦不能漏出滤纸筒,以免堵塞虹吸管。如
粗脂肪的定量测定——抽提法
一、目的与要求:1、熟悉掌握粗脂肪的测定方法。2、熟悉与掌握重量分析的基本操作,包括样品处理,烘干,恒重等。二、原理:本法为重量法,用脂肪溶剂将脂肪提出后进行称量,该法适用于固体和液体样品。通常将样品浸于脂肪溶剂,为乙醚或沸点30℃至60℃的石油醚,借助于索氏提取器进行循环抽提。用本法提取的脂肪性物
脂肪的测定方法索氏抽提法
1 原理样品用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后,蒸去溶剂所得的物质,在食品分析上称为脂肪或粗脂肪。因为除脂肪外,还含色素及挥发油、蜡、树脂等物。抽提法所测得的脂肪为游离脂肪。2 试剂2.1 无水乙醚或石油醚。2.2 海砂:食品中水分的测定3 仪器索氏提取器。4 操作方法4.1 样品处理4.1.1 固体样
索氏抽提法测定脂肪原理
脂肪是食品的主要成分之一,大多数动物性食品和一些植物性食品,尤其是植物的种子、果实或果仁,都含有脂肪或脂类化合物。在实用油脂中主要存在甘油三酸酯以及一些脂肪酸、磷酸、糖酯、脂溶性维生素等类酯化合物。脂肪有两种存在形式,即游离脂肪和结合脂肪,测定食品中脂肪含量的方法有很多,但大多数采用低沸点溶
谢瓦格抽提法的方法原理介绍
中文名称谢瓦格抽提法英文名称Sevag method定 义一种从核酸中去除蛋白质杂质的方法。系用加有少量异戊醇或辛醇的氯仿溶液对核酸-蛋白质混合物反复振荡,使蛋白质变性沉淀而被除去。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
食品中脂肪的测定——索氏抽提法
原理脂肪易溶于有机溶剂。试样直接用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后,蒸发除去溶剂,干燥,得到游离态脂肪的含量。试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水。试剂无水乙醚(C4H10O)。石油醚(CnH2n+2):石油醚沸程为30℃~60℃。材料石英砂。脱脂棉。仪器和
影响索氏抽提法准确测量的因素?
1、如何利用残余法测定油料作物种子中的粗脂肪含量? 残余法测定油料作物种子中的粗脂肪含量,是用低沸点有机溶剂(乙醚或石油醚)回流抽提,除去样品中的粗脂肪,以样品与残渣重量之差,来计算粗脂肪含量。 2、测定过程中为什么需要对样品、抽提器、抽提用有机溶剂都要进行脱水处理? 进行脱水处理的原因有三:
索氏抽提法检测脂肪重点注意事项
脂肪有两种存在形式,即游离脂肪和结合脂肪,测定食品中脂肪含量的方法有很多,但大多数采用低沸点溶剂直接萃取,或用酸碱溶液破坏碳水化合物和蛋白质,然后用溶剂萃取或离心离析。这就是常用的索氏抽提法、酸水解法、碱水解法等,不同的食品应采用不同的方法。其中常见的有使用脂肪抽提仪进行测定的,脂肪抽提仪是利用
有机溶剂抽提法提取叶黄素的方法介绍
有机溶剂抽提法是应用最多的提取叶黄素方法。存在于万寿菊中的叶黄素在乙醇中溶解度很高,在中性条件下则难溶于水,在碱性条件下叶黄素的溶解度比在酸性及中性条件下的溶解度高 。
酵母菌RNA制备实验—热酸性酚抽提法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒TES酸性酚氯仿乙酸钠乙醇仪器、耗材离心管离心机摇床实验步骤1. 酵母细胞在10 ml 培养基中生长至指数中期(OD600=1.0)。 2. 将培养液转移到50 ml,离心管,于4℃,1 500 g 离心3 min。 3. 弃上清,菌体沉淀用1 ml 冰冷的水重悬,转
快速了解索氏抽提法测定脂肪的原理
索氏抽提法,用于粗脂肪含量的测定。脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中,测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。脂肪含量的测定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是
线形质粒DNA-5粘性末端去磷酸实验——抽提法
实验材料质粒试剂、试剂盒CIAPEDTABUFFER酚-氯仿乙醇TE仪器、耗材水浴锅抽干机实验步骤1、质粒DNA和CIAP以及BUFFER 37 ℃水浴30min 2、补充CIAP 再37 ℃水浴30min 3、加入50 mM EDTA至终浓度5 mM 75 ℃加热10min 失活CIAP 4、冷却
用有机溶剂抽提法从DNA中除去溴化乙锭实验
实验方法原理 欲从经 CsCl 梯度纯化的 DNA 中去除溴化乙锭,常用有机溶剂反复抽提的方法。随后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。 实验材料 DNA
用有机溶剂抽提法从DNA中除去溴化乙锭实验
实验方法原理 欲从经 CsCl 梯度纯化的 DNA 中去除溴化乙锭,常用有机溶剂反复抽提的方法。随后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。实验材料 DNA 样品试剂、试剂盒 乙醇水饱和的异戊醇或 n-丁醇酚TE仪器、耗材 透析管和夹离心机和转头实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液乙醇,水饱和的异戊醇或
用有机溶剂抽提法从DNA中除去溴化乙锭实验
欲从经 CsCl 梯度纯化的 DNA 中去除溴化乙锭,常用有机溶剂反复抽提的方法。随后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理欲从经 CsCl 梯度纯化的 DNA 中去除溴化乙锭,常用有机溶剂反复抽提的方法。随后可用透析或沉淀的方法去除 CsC
索氏抽提法提取粗脂肪适用于什么样品
索氏抽提法提取粗脂肪适用于脂类含量较高,结合态的脂类含量较少,能烘干磨细,不易吸湿结块的样品。 特点:操作简单,易提取,实验结果容易计算。 索氏抽提法,用于粗脂肪含量的测定。脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中,测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。脂肪含量的测定有很多方
用索氏抽提法提取粗脂肪适用于什么样品
索氏抽提法提取粗脂肪适用于脂类含量较高,结合态的脂类含量较少,能烘干磨细,不易吸湿结块的样品。原理:利用溶剂回流和虹吸原理,使固体物质每一次都能为纯的溶剂所萃取,所以萃取效率较高。萃取前应先将固体物质研磨细,以增加液体浸溶的面积。然后将固体物质放在滤纸套内,放置于萃取室中。如图安装仪器。当溶剂加热沸
采用索氏抽提法测定脂肪所采用的溶剂有哪些
即用低沸点有机溶剂(乙醚或石油醚)回流抽提, 除去样品中的粗脂肪,以样品与残渣重量之差,计算粗脂肪含量。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外,还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质,因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。
粮食中索氏抽提法粗脂肪含量测定的注意事项有哪些
1、千万注意通风,防止乙醚中毒。2、滤筒要紧密,防止漏出,漏出要重做3、滤筒高度要高于回流管3、多糖或糊精含量高的要先用冷水侵泡,干燥后再做。否则容易糊4、温度保持在45度左右,每小时8到12个回流5、一定是无水乙醚6、
索氏煮沸抽提法快速测定粮食、油料中粗脂肪含量试验
中华人民共和国国家标准中规定: 粮食、油料中的粗脂肪含量测定采用索氏抽提法。此方法经过长期操作实践, 存在一定的弊端, 主要是操作时间长、试验人员劳动强度大、水和电等能源消耗多。索氏抽提法测定一个样品仅抽提时间就需要8h 以上, 整个试验自始至终需要12h左右, 工作效率极低。为解决这些问题,
底质和污泥中有机污染物的提取法超临界流体抽提法
超临界流体具有比液体高的扩散速度和比液体粘度低的特点,同时超临界流体的密度比正常气体的大。超临界流体可以在相对低的温度下溶解分析物,因此,它有利于减少样品由于热而引起的分解作用。近年来超临界流体抽提(SFE)之所以受到人们的重视和应用的主要原因,是它可以不用具有污染的有害溶剂,而采用超临界流体CO2
粮食中索氏抽提法粗脂肪含量测定的注意事项有哪些
1、千万注意通风,防止乙醚中毒。2、滤筒要紧密,防止漏出,漏出要重做3、滤筒高度要高于回流管3、多糖或糊精含量高的要先用冷水侵泡,干燥后再做。否则容易糊4、温度保持在45度左右,每小时8到12个回流5、一定是无水乙醚
粮食中索氏抽提法粗脂肪含量测定的注意事项有哪些
1、千万注意通风,防止乙醚中毒。2、滤筒要紧密,防止漏出,漏出要重做3、滤筒高度要高于回流管3、多糖或糊精含量高的要先用冷水侵泡,干燥后再做。否则容易糊4、温度保持在45度左右,每小时8到12个回流5、一定是无水乙醚
组织相溶性抗原基因分型中三种DNA快速抽提法比较
血液DNA抽提的质量和速度是影响组织相溶性抗原(HLA)基因分型效果的一个主要因素,目前普遍采用的标准酚-氯仿抽提法,因耗时较长,难以满足临床需求。为此,我们建立了NP-40法及辛酸法,进一步缩短时间,简化了操作步骤。现将NP-40法、辛酸法与标准酚-氯仿抽提法对比研究结果报告如下。一、资料和方法本
溶酶体的新提法的介绍
关于溶酶体的类型和命名,有新提法。有研究资料表明,根据溶酶体的形成过程和功能,把溶酶体命名为前溶酶体(endolysosome)和溶酶体。晚期胞内体与脱包被的含有溶酶体酶的转运小泡融合成前溶酶体,它从高尔基体或细胞膜上的转运泡(如果是从细胞膜上通过胞饮作用在网格蛋白介导下回收的溶酶体酶则在脱去包
关于茶多酚的微波浸提法简介
微波浸提法是最近几年刚开始的一种新方法,基本原理是利用在微波场中分子发生高频的运动,扩散速率增大,因此茶多酚等浸提物在微波的辐射作用下可快速浸取出来。利用微波辅助浸提,一般一次只要数分钟的时间即可达到传统浸提数小时的效果。因此大大的减少了茶多酚长时间在高温下的氧化,提高产品的品质与收率。微波技术
IgG抗体的粗提法提取球蛋白
大多用硫酸铵盐析法或硫酸钠盐析法。硫酸铵盐析须经过多次沉淀,第一次用40%饱和度,第二次用35%饱和度,第三次用33%饱和度,经三次提取后的γ球蛋白基本是IgG成分。硫酸钠法更简便,用20%即可将γ球蛋白沉淀出来。经盐析后的γ球蛋白虽大多属于IgG,但还有5%其他区带蛋白,如γ区的杂蛋白。又因I
溶酶体的新提法分类和命名介绍
关于溶酶体的类型和命名,有新提法。有研究资料表明,根据溶酶体的形成过程和功能,把溶酶体命名为前溶酶体(endolysosome)和溶酶体。晚期胞内体与脱包被的含有溶酶体酶的转运小泡融合成前溶酶体,它从高尔基体或细胞膜上的转运泡(如果是从细胞膜上通过胞饮作用在网格蛋白介导下回收的溶酶体酶则在脱去包