冷冻组织及切片的准备实验
为了获得较好的结果,应当用新鲜的组织,因为在-80°C 中保存超过 24 h 的样品,其RNA 的产量和完整性将大打折扣。尽管有几个实验小组曾经报道用 LCM 技术从石蜡包埋的组织中获得了没有降解的 RNA, 但作者还是推荐使用冷冻的组织块。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验材料新鲜的组织试剂、试剂盒丙酮蒸馏水干冰磷酸盐缓冲液(PBS)Tek OCT 组织复合物仪器、耗材封闭容器烧杯恒冷装置解剖工具平盘组织模子载玻片刀片实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂丙酮蒸馏水干冰磷酸盐缓冲液(PBS)Tek OCT 组织复合物(Sakura FinetekUSA,Torrance,CA)2. 特殊设备封闭容器烧杯恒冷装置解剖工具平盘可以削去的一次性组织模子(Pelco International,Redding,CA)普通的无粘片剂的载玻片Sakura 刀片(IMEB,SanMarcos,CA)3. 细......阅读全文
冷冻组织切片制作
实验试剂液氮,干冰,1%明胶,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀释抗体,辣根过氧化物酶标记的二抗,DAB/金属盐试剂,3%过氧化氢,0.3%(W/V)氯化镍贮存液,Harris苏木精,乙醇实验设备载玻片,Whatman 1#滤纸,低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织
推出冷冻组织研磨仪
高通量组织研磨仪,能产生上下震荡、曲线形旋涡震荡。高通量组织研磨仪借助研磨珠(氧化锆、钢珠、玻璃珠、陶瓷珠)的往复振动、撞击、剪切, 能对样品进行快速、均匀的研磨。高通量组织研磨仪一次可同时处理36个样品。对于难处理的土壤、头发、骨骼、牙齿、顽固的细菌、真菌细胞壁,甚至孢子体的研磨效率非常高,且整个
冷冻组织切片的制作
实验概要本实验介绍了冷冻组织切片制作的基本操作流程。主要试剂液氮,干冰,1%明胶,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀释抗体,辣根过氧化物酶标记的二抗,DAB/金属盐试剂,3%过氧化氢,0.3%(W/V)氯化镍贮存液,Harris苏木精,乙醇主要设备载玻片,Whatm
冷冻组织切片的制作实验
实验试剂液氮,干冰,1%明胶,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀释抗体,辣根过氧化物酶标记的二抗,DAB/金属盐试剂,3%过氧化氢,0.3%(W/V)氯化镍贮存液,Harris苏木精,乙醇实验设备载玻片,Whatman 1#滤纸,低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织
冷冻组织及切片的准备实验
为了获得较好的结果,应当用新鲜的组织,因为在-80°C 中保存超过 24 h 的样品,其RNA 的产量和完整性将大打折扣。尽管有几个实验小组曾经报道用 LCM 技术从石蜡包埋的组织中获得了没有降解的 RNA, 但作者还是推荐使用冷冻的组织块。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼
冷冻组织及切片的准备实验
实验材料 新鲜的组织 试剂、试剂盒 丙酮 蒸馏水 干冰 磷酸盐缓冲液(PBS
组织库冷冻样本管理流程(四)
四. 超低温冰箱的考虑因素1. 冰箱类型。 超低温冰箱有立式和卧式之分,温度有-80 度和-150 度。目前市面上-150 度冰箱都是卧式。卧式冰箱优点是开门冷气散发较小,缺点是占地面积大,立式冰箱正好相反。所以大规模建库的情况下,推荐使用立式冰箱做大规模存储,而卧式冰箱做经常开关门的
冷冻组织及切片的准备实验
实验材料 新鲜的组织试剂、试剂盒 丙酮 蒸馏水 干冰磷酸盐缓冲液(PBS) Tek OCT 组织复合物仪器、耗材 封闭容器烧杯 恒冷装置 解剖工具 平盘组织模子载玻片刀片实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂丙酮蒸馏水干冰磷酸盐缓冲液(PBS)Tek OCT 组织复合物(Sakura Finet
LSCM组织的冷冻包埋和切片
组织的冷冻包埋和切片 组织的冷冻方法可根据固定和保存条件不同而不同,尽可能加快冷冻速度以力求减少组织在冷冻 过 程 中 冰晶 的 形 成 。组织冷冻后 ,使用冷冻切片机,将组织切成 5 ~ 15 μm 的切片,粘贴于处理过的载玻片上,室温干燥 1h 后,可进行免疫荧光抗体标记。或放入载玻片盒,- 8
组织库冷冻样本管理流程(五)
2.卧式冰箱卧式冰箱的标本位置信息也采用类似于立式冰箱的方式,区别是卧式冰箱里的冻存架的高度是用方框内的格子表达的。请参考如下:3. 液氮灌一个标本的位置信息会用AA-BB-CC-DD 表达,AA 是液氮灌在整个冰箱/液氮灌的主界面排列中的编号。BB 是冻存架的编号,可以选择A…..Z 的编号,也可
组织库冷冻样本管理流程(六)
附件C.生物样本库编号规则建议标本库编号命名规则:总原则:唯一性,共享性辅原则:在满足总原则基础上,尽量精简。编号长度尽量保持统一。一.组织生物样本采集和常规采集的编号规则组织编号规则。组织编号规则标签类型:BRADY THT-163-499-3-IP 长方形为25.4mm*9.525mm, 圆直径
组织库冷冻样本管理流程(二)
10. 样本库标识建议在冰箱外门上贴上磁性冻存架模拟标识,并在对应的空格位置上填写冻存盒的信息。例如冻存盒内样本名称,冻存盒编号,冻存盒内样本编号起止等。这样,在打开冰箱门之前,对内部的样本基本情况也能一目了然。注:【根据某些样本最终的实验要求,可能需要设计不同的存储流程,比如有些需要做蛋白实验的样
组织库冷冻样本管理流程(一)
一. 取材和编号/标签部分在本环节进行组织和血液的取材,并制作条形码标签,将样本进行分装。1. 取材单:手术医生根据临床病例情况在术前一日通知样本库次日取样本,同时在医嘱中注明需要抽取血样数量、种类。样本库根据次日样本情况预先准备样本提取单,并预先定义好流水编号。样本提取单上的信息可包含并不仅限于以
组织库冷冻样本管理流程(三)
一. 组织库冷冻保存管的常见形态与保存温度。组织:冻存管保存(以内旋冻存管为多),常保存于-80 度/-150 度冰箱或液氮,也有很多单位将部分组织以RNAlater 浸润后保存于-30 度或-80 度条件,此外也有OCT 包埋,蜡块等组织保存形态。在条件允许的情况下,尽量保留T/P/N 三
我国首次实现鸡冷冻卵巢组织活体复原
5月27日,记者从中国农业科学院北京畜牧兽医研究所获悉,该所蛋鸡遗传育种创新团队利用原位移植技术,首次实现鸡冷冻卵巢组织活体复原。团队在白来航母鸡中成功移植了横斑洛克黑羽鸡冷冻卵巢组织,并孵化出一只横斑洛克黑羽雏鸡。这是我国首例通过原位移植技术将玻璃化冷冻卵巢复原产生的雏鸡。 遗传材料的冷冻保
LSCM冷冻组织切片的免疫荧光标记
冷冻组织切片的免疫荧光标记 将冷冻组织切片从 -80℃ 冰箱中取出,室温放置 10 min,待切片回温并干燥,浸于 PBS 中 10 min洗去OCT,可以无需 Triton 处理,即可进行免疫荧光抗体标记,操作步骤与培养细胞反应方法相同。反应在避光湿盒中进行,反应结束时用无荧光封固剂封片,4℃保存
我国首例鸡冷冻卵巢组织活体复原育雏成功
5月13日,记者从中国农业科学院北京畜牧兽医研究所获悉,我国首次实现鸡冷冻卵巢组织活体复原,并由此成功产生雏鸡。该项成果由该所蛋鸡遗传育种创新团队利用原位移植技术完成。育成的横斑洛克黑羽雏鸡。中国农科院北京畜牧兽医研究所供图成果负责人、该团队首席研究员陈继兰介绍,该团队在白来航母鸡中成功移植了横斑洛
高通量组织冷冻研磨机用途与特点
高通量组织冷冻研磨机产品用途:1.适用于各种植物组织包括根、茎、叶、花、果、种子等样品的研磨破碎;2.适用于各种动物组织包括大脑、心脏、肺、胃、肝脏、胸腺、肾脏、肠、淋巴结、肌肉、骨骼等样品的研磨破碎; 3.适用于真菌、细菌等样品的研磨破碎;4.适用于食品、药品成分分析检测的研磨破碎;5.适用于易挥
冷冻的未成年恒河猴生殖组织可繁育后代
美国研究人员在最新一期《科学》杂志上发表研究报告称,他们成功利用冷冻的未成年恒河猴睾丸组织培育出成熟精子,使雌猴受孕并生育出健康的猴宝宝。这一研究结果表明,低温保存未成熟睾丸组织或可帮助解决儿童癌症幸存者的未来不育问题。图片来源于网络 对于男性癌症患者来说,化疗和放疗等治疗手段会极大影响其产
病毒-DNA-的提取实验——新鲜或冷冻组织中病毒-DNA-的提取
实验材料新鲜或冷冻组织试剂、试剂盒匀浆缓冲液裂解液仪器、耗材剪刀匀浆器离心机实验步骤1. 取新鲜或刚解冻的组织去除血水和结缔组织,在冰浴上剪成小碎块。2. 将组织碎块移入预冷的匀浆器中,按 10 ml/g 加入匀浆缓冲液,混匀,制成匀浆液。3. 将匀浆液移人 Ep 管, 5000 r/min 离心1
冷冻电镜样品冷冻
样品冷冻样品冷冻其实是科学家们很早就想到的思路,但是冷冻之后样品中水分子形成冰晶,不仅产生强烈电子衍射掩盖样品信号,还会改变样品结构。直到1974年,Kenneth A. Taylor和Robert M. Glaeser在-120℃观察含水生物样品时未发现冰晶形成,而且发现冷冻样品能够耐受更大剂量和
鼻咽癌放化疗后卵巢组织冷冻及自体原位移植成功病例...
鼻咽癌放化疗后卵巢组织冷冻及自体原位移植成功病例分析1 病例报告 患者,32 岁,因鼻咽癌放、化疗后 4 年发现肿瘤复发行生育 力保存,于 2012 年 7 月 26 日就诊中山大学附属第六医院生殖 医学中心。2008 年患者因鼻咽癌( 未分化型非角化性癌,T1N2 M0,Ⅲ期) 行顺铂+依托泊苷
有效保存男性生育力!冷冻睾丸组织20年后仍可产生精子
近年来,全球范围内的男性精子质量呈持续下降趋势,直接或间接影响男性生育力,保存男性生育力应成为现代人类生殖学的一项重要技术服务。最近,有研究表明,冷冻男性睾丸组织20年后重新植入,仍然可以制造出有活力的精子,为男性生育力的保存开辟了一个有效途径。 人类生育力随着年龄增长而不断衰退是自然规律,目
冷冻车冷冻干燥技术原理
干燥是保持物质不致腐败变质的方法之一。干燥的方法有许多,如晒干、煮干、烘干、喷雾干燥和真空干燥等。但这些干燥方法都是在0℃以上或更高的温度下进行。干燥所得的产品,一般是体积缩小、质地变硬,有些物质发生了氧化,一些易挥发的成分大部分会损失掉,有些热敏性的物质,如蛋白质、维生素会发生变性。微生物会失去生
显微冷冻切片机的使用和大(小)鼠脑组织切片操作实验
冷冻切片机可以用于:(2)切制薄而均匀的组织片;(2)组织用坚硬的石蜡或其他物质支持,每切一次借切片厚度器自动向前(向刀的方向)推进所需距离,厚度器的梯度通常为1微米。实验方法原理切制石蜡包埋的组织时,由于与前一张切片的蜡边粘着,而制成多张切片的切片条。实验材料大小鼠大脑试剂、试剂盒手术器械 显微冷
显微冷冻切片机的使用和大(小)鼠脑组织切片操作实验
实验材料 大小鼠大脑试剂、试剂盒 手术器械 显微冷冻切片机 包埋剂仪器、耗材 大小鼠立体图谱实验步骤 1. 安装刀具,移上安全杆。调整切片机温度到-20 ℃((右手边up 和down 二个按钮调节, up调高温度, down,降低温度)。 2. 从-80 ℃冰箱取出脑组织在切片机或-20 ℃冰箱
冷冻断裂与冷冻蚀刻基础介绍(二)
通过冷冻断裂生成图像 冷冻断裂和冷冻蚀刻技术往往采用高真空精细镀膜技术,将超细腻重金属和碳薄膜沉积于断裂表面。冷冻断裂样本在一定角度下用金属覆盖,然后在碳背衬膜(徕卡EM ACE600冷冻断裂或徕卡EM ACE900与徕卡EM VCT500)上生成复型进行TEM成像或在SEM的试块面上进行成像。对于
冷冻断裂与冷冻蚀刻基础介绍(一)
揭示生物学样本和材料样本原本无法观察到的内部结构 冷冻断裂是一种将冰冻样本劈裂以露出其内部结构的技术。冷冻蚀刻是指让样本表面的冰在真空中升华,以便露出原本无法观察到的断裂面细节。金属/碳复合镀膜能够实现样本在SEM(块面)或TEM(复型)中的成像,主要用于研究如细胞器、细胞膜,细胞层和乳胶。这项技术
冷冻电镜低剂量电子冷冻成像
低剂量电子冷冻成像材料汪都知道一般做TEM、SEM的时候,样品导电性越好,电子剂量越高,成像质量越好。然而,高剂量电子对生物大分子却是毁灭性的,因此Richard Henderson教授提出在低温下用尽量低的电子剂量成像。他与其合作者先后在1975年和1990年重构出了粗糙的(7Å)和高分辨率(3.
冷冻离心机的冷冻有什么作用
离心机就是利用离心力使得需要分离的不同物料得到加速分离的机器。冷冻离心机有分为低速、高速冷冻离心机,以及超速分析、制备两用冷冻离心机等多种型号。 转速一般不超过4000rpm,最大容量为2—4L,是实验室最常用于大量初级分离提取生物大分子、沉淀物等。其转头多用铝合金制的甩平式和角式两种,离心管