帽子转换RACE实验
这里介绍的方法，是用一个生物素化的引物来帮助纯化第一链产物。这些纯化技术是可以互换的。与之类似，使用这里所介绍的基于寡核苷酸-(dT) 的引物，在反转录的起始阶段使用的基因特异性引物（如上所述）也是可以互换的。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒寡核苷酸引物cDNA 文库HerculesHot-Start 聚合酶HerculesHot-Start 聚合酶缓冲液dNTP 溶液TE反转录缓冲液RNasinSuperscript II 逆转录酶生物素标记的引物 Ptotal帽子发现接头引物poly(A)+RNA仪器、耗材热循环仪链霉抗生物素蛋白磁性珠磁性分离器水浴或加热仪实验步骤试剂5'RACE 能否成功依赖于帽子发现接头序列结合在 cDNA 合成的起始处。这一步依赖于在第一链 cDNA 末端附加额外的寡核苷酸（dC)。已有证据显示，反转录缓冲液如果存在Mn2+，能大大提高这一步的效率（S......阅读全文
帽子转换 RACE 实验
试剂、试剂盒 寡核苷酸引物cDNA 文库HerculesHot-Start 聚合酶HerculesHot-Start 聚合酶缓冲液dNTP 溶液TE反转录缓冲液RNasinSuperscript II 逆转录酶生物素标记的引物 Ptotal帽子发现接头引物poly(A)+RNA仪器、耗材 热
帽子转换 RACE 实验
试剂、试剂盒 寡核苷酸引物 cDNA 文库 HerculesHot-Start 聚合酶 HerculesHot-Start 聚合酶缓冲液 dNTP 溶液
帽子转换 RACE 实验
这里介绍的方法，是用一个生物素化的引物来帮助纯化第一链产物。这些纯化技术是可以互换的。与之类似，使用这里所介绍的基于寡核苷酸-(dT) 的引物，在反转录的起始阶段使用的基因特异性引物（如上所述）也是可以互换的。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒寡核苷酸引物cD
3’RACE 实验心得
引子：从06年12月份开始，断断续续做了一个多月的3’RACE，有了一些心得和体会。期间看了很多前辈们分享的经验，受益匪浅。在这里，我就自己的经历略作总结，希望能给像我一样的新人们有点启示，少走些弯路，不当之处欢迎指正。一、试剂盒的选择：3’RACE从原理上就能明白，它比5’RACE 要容易得多，所
RACE技术扩增构建全长cDNA文库
实验概要利用RACE(利用PCR技术快速扩增全长mRNA)技术构建全长cDNA文库是传统C库构建技术的改进。本实验即是利用寡核苷酸帽法，进行全长C库的构建，从而掌握RACE技术的原理与基本操作方法。实验原理其原理是利用真核mRNA的3’poly(A)和5’帽子结构作为标签，用通用引物识别并配对标签序
“高帽子”“纸帽子”“土帽子”：学术圈怪象
北京师范大学全球变化与地球系统科学研究院院长程晓，称自己是正宗的“土博士”， 他从事极地研究20年，没喝过洋墨水，参加过中国4次南极科考，多次进入北极地区考察，在南极冰盖制图、极地海冰实时遥感监测方面有深厚研究积累，算得上是我国极地遥感领域的学术带头人。 一直在高校从事管理与科研，程晓对当
RACE服务
这时我们可以根据基因的一段已知序列(或一段同源序列)，利用3'-Race方法获得该基因的3'端序列，或者利用5'-Race方法得到该基因的5'端序列。服务流程:1、先由您提供背景资料，其中包括已知的DNA序列部分，RNA的情况，所扩增基因的估计长度，是否具有同源序列等
“高帽子”“纸帽子”“土帽子”：学术圈的怪现象
北京师范大学全球变化与地球系统科学研究院院长程晓，称自己是正宗的“土博士”， 他从事极地研究20年，没喝过洋墨水，参加过中国4次南极科考，多次进入北极地区考察，在南极冰盖制图、极地海冰实时遥感监测方面有深厚研究积累，算得上是我国极地遥感领域的学术带头人。 一直在高校从事管理与科研，程晓对当前高
用经典 RACE 扩増 3'末端 cDNA 实验
试剂、试剂盒dNTP 溶液二硫苏糖醇TE反转录缓冲液RNA 酶 HRNasinSuperScriptⅡ逆转录酶poly(A)+RNA 或总 RNAQT 引物Hercules Hot-Start 聚合酶仪器、耗材水浴或加热仪热循环仪实验步骤试剂可以从多数大供应商那里买到该过程所需要的材料与合适的 5X
用经典 RACE 扩増 3'末端 cDNA 实验
试剂、试剂盒 dNTP 溶液 二硫苏糖醇 TE 反转录缓冲液 RNA 酶 H RNasin SuperScriptⅡ逆转录酶