酵母蔗糖酶的制备实验——研磨法
蔗糖酶( inver tase ) (β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶) ( fructofuranoside fructohydrolase ) ( EC. 3 . 2 . 1 . 26 ) 特异地催化非还原糖中的α-呋喃果糖苷键水解, 具有相对专一性。不仅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖, 也能催化棉子糖水解, 生成密二糖和果糖。本实验旨在提取啤酒酵母中的蔗糖酶。实验方法原理蔗糖酶( inver tase ) (β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶) ( fructofuranosidefructohydrolase ) ( EC. 3 . 2 . 1 . 26 ) 特异地催化非还原糖中的α-呋喃果糖苷键水解, 具有相对专一性。不仅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖, 也能催化棉子糖水解, 生成密二糖和果糖。 啤酒酵母中含有大量的蔗糖酶, 通过研磨破细胞壁, 使酶游离出来, 用水萃取酶, 然后用有机溶剂沉淀酶蛋白得到粗制品,还可用柱......阅读全文
感受态制备：酵母感受态细胞制备实验
酵母感受态细胞制备可以：（1）用于建立酵母转化体系；（2）用于酵母表达系统构建；（3）用于酵母其他分子生物学研究。实验方法实验材料酿酒酵母 试剂、试剂盒YPDA液体培养基 蒸馏水 甘油 二甲基亚砜 仪器、耗材培养皿 离心机 离心管 冰箱 实验步骤一、试剂与耗材 1. 试剂 细菌用-酵母提取物（Fi
酿酒酵母培养基的制备实验——YPAD培养基的制备
试剂、试剂盒酵母提取物蛋白胨葡萄糖偏硫酸腺嘌呤琼脂水仪器、耗材锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的带螺旋盖的瓶中或锥形瓶中将下面的成分溶于 500 ml 水中，置于振荡器上。酵母提取物 6.0 g，蛋白胨 12.0 g，葡萄糖 12.0 g，偏硫酸腺嘌呤 60.0 mg，琼脂 10.0 g，加水到 6
酵母DNA的小量制备
实验方法原理通过消化细胞壁，然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割，也可用作 PCR 的模板。实验材料酶解酶 100T酵母细胞试剂、试剂盒异丙醇醋酸钾SDS醋酸钠山梨糖醇缓冲液TE酵母
酵母DNA的小量制备
实验方法原理 通过消化细胞壁，然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割，也可用作 PCR 的模板。实验材料 酶解酶 100T酵母细胞试剂、试剂盒 异丙醇醋酸钾SDS醋酸钠山梨糖醇缓冲液T
酵母总RNA的制备
试剂、试剂盒 AE 缓冲液。 苯酚 10%SDS 酚 氯仿 无水乙醇 乙醇. 3mol L 乙酸钠 无 RNase 的水仪器、耗材 髙速离心机实验步骤 一 材料与设备1)AE 缓冲液：50 mmol/L 乙酸钠 (PH5.3)，lOmmol/LEDTA。2) 苯酚 (用 AE 缓冲液预先平衡）。3)
酵母DNA的小量制备
实验方法原理 通过消化细胞壁，然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割，也可用作 PCR 的模板。
酵母总RNA的制备
试剂、试剂盒 AE 缓冲液。 苯酚 10%SDS 酚 氯仿 无水乙醇 乙醇. 3mol L 乙酸钠 无 RNase
酵母DNA微量制备
实验概要本实验介绍了分别从40ml和5ml酵母培养液中制备酵母DNA的操作流程。实验步骤1. 酵母DNA微量制备(40ml) 1) 在125ml三角瓶中用40ml YPD培养液在30℃条件下培养细胞达最大生长量(过夜)。 2) 将上述培养物移入螺盖离心管，用医用离心机或Sorvall SS-
离子研磨仪的平面研磨法简介
平面研磨法是将氩离子束倾斜照射到样品表面，并将氩离子束中心和样品旋转中心进行偏心调整，实现广域加工的方法3) 。氩离子束的照射角度(θ)可设置为0°～90°4) 。当照射角度≥80°时，离子束照射角度与样品加工面近乎平行，因此，可以减少由于晶体取向和成分蚀刻速率差造成的凹凸不平，形成相对平滑的加
样品制备：研磨中的“齿”
从研磨原料的特性、使用的研磨磨具和最终的研磨粒度考虑，研磨后的样本可能会因研磨磨具被磨蚀的微粒而受到污染。那么，研磨磨具的这种金属磨蚀到底会带来多大程度的污染呢? 图1.PM 100型行星式球磨机使用的研磨容器和研磨球(左)以及ZM 200型离心磨机使用的转子和环形筛(右)。
酵母菌不同的破壁方法比较及革新的冷冻研磨法介绍
酵母菌高效破壁方法的革新——终极研磨手段：冷冻研磨法酵母菌是基因表达研究和重组蛋白生产的通用宿主。然而，传统酶解法进行酵母mRNA和内容蛋白提取通常非常困难。我们以细胞总RNA提取为例，对各种酵母破壁方法进行比较。我们用不同的方法对酵母菌破壁，然后用Trizol试剂进行RNA的提取，最后进行电泳检测
人工海藻糖酶多肽片段的合成和重组海藻糖酶的制备
国外采用标准9-甲氧羰基荧光素固相合成法合成氨基酸残基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色谱法（HPLC）分析并提纯多肽。HPLC主要是根据分子的亲水性（反相）和电荷（离子交换）方面的差别来实现样品的分离的。反相HPLC的优点是分辨率大。利用分子生物学方法
散剂的制备实验——示例法
散剂系指药物或与适宜辅料经粉碎、均匀混合而制成的干燥粉末状制剂，供内服或局部用。内服散剂一般溶于或分散于水或其他液体中服用，亦可直接用水送服。局部用散剂可供皮肤、口腔、咽喉、腔道等处应用；专供治疗、预防和润滑皮肤为目的的散剂亦可称撒布剂或撒粉。实验材料碳酸氢钠氧化镁试剂、试剂盒硫酸氢钠仪器、耗材研钵
酵母菌基因克隆实验——互补法
实验材料酵母菌实验步骤1. 用含LEU 2作为选择标志的酵母菌DNA文库转化lea 2 cdc 101-1酵母菌株，在23℃培养，依据插入片段的大小，筛选2 000~20 000个Leu+转化体。 2. 影印平板转化体，将其转印到预热的选择性平板，并于37℃培养筛选互补温感突变的表型。过夜培养之
酵母细胞破碎实验——液氮破碎法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒液氮仪器、耗材塑料烧杯混合器实验步骤1. 酵母在YPD（或选择性）培养基中剧烈振荡下培养至对数中期。离心，弃上清，市售酵母糕可以用来代替培养细胞。2. 在旋涡混合器上振荡细胞沉淀，使其形成粘稠的细胞糊，必要时，加入最少量的冰水使细胞糊能够倒出或舀出，如果使用酵母糕，用等
酵母细胞核制备实验——差速离心法
细胞核（nucleus）是细胞中最大、最重要的细胞器（初中老教材认为细胞核不是细胞器，大学细胞生物学则认为是细胞器，这里以大学教材为准），它是由核膜（nuclear membrane）、核骨架（nuclear scaffold）、核仁(nucleolus) 几部分组成。实验材料酵母菌试剂、试剂盒细胞
酵母感受态细胞制备实验——化学法
酵母感受态细胞制备可应用于：（1）建立酵母转化体系；（2）酵母表达系统构建；（3）酵母其他分子生物学研究。实验方法原理感受态是受体最容易接受外源DNA片段并实现转化的一种生理状态，用对应化学物质处理细胞后，细胞逐渐形成感受态细胞并进行转化。化学法简单，快速，稳定，重复性好，广泛用于外源基因的转化。实
酿酒酵母的电穿孔转化法实验_电穿孔转化法
实验材料细胞试剂、试剂盒PEG3350仪器、耗材YPAD 液体培养基涡旋振荡器实验步骤1. 将菌株接种 100 ml 的 YPAD 液体培养基，30℃ 振荡培养过夜，使细胞滴度达到每毫升 1X108 到 2X108 个细胞。2. 3000 g 离心 5 分钟沉淀细胞，用 100 ml 灭菌水洗两遍，
2.5.1－酵母总RNA的制备
试剂、试剂盒AE 缓冲液。 苯酚10%SDS酚氯仿 无水乙醇乙醇. 3mol L 乙酸钠无 RNase 的水仪器、耗材髙速离心机实验步骤一 材料与设备1)AE 缓冲液：50 mmol/L 乙酸钠 (PH5.3)，lOmmol/LEDTA。2) 苯酚 (用 AE 缓冲液预先平衡）。3)10%SDS4)
苯酚法制备酵母tRNA
试剂、试剂盒 DEAE 纤维素 二乙醇胺 (TEA) 溶液 0.lmol LTEA 缓冲液 0.lmol L 氯化钠含 0.lmoi. LTEA 缓冲液
苯酚法制备酵母tRNA
通过 DEAE 纤维素柱纯化，除去少量 DNA、大分子 RNA、蛋白质、多糖等杂质，最后得到各种氨基酸专一性 tRNA 的混合物.试剂、试剂盒DEAE 纤维素二乙醇胺 (TEA) 溶液0.lmol LTEA 缓冲液0.lmol L 氯化钠含 0.lmoi. LTEA 缓冲液12mol L 氯化钠含
苯酚法制备酵母tRNA
试剂、试剂盒 DEAE 纤维素 二乙醇胺 (TEA) 溶液 0.lmol LTEA 缓冲液 0.lmol L 氯化钠含 0.lmoi. LTEA 缓冲液 12mol L 氯化钠含 0.lmol LTEA 缓冲液 lmol L 氯化钠含 0.lmol LTEA 缓冲液 乙醚 水饱和酚 乙醇仪器
酵母菌DNA制备
实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD破菌缓冲液酚氯仿异戊醇LB仪器、耗材 玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤 1. 注盛于一个13 mm×100 mm 无菌玻璃试管中的2 ml 培养基接种含有带目的基因的质粒的酵母单菌落，在转动或摇动培养箱中30℃过夜培养到静止期。2. 将1.5 ml 的过夜培养
蔗－糖－酶－的－提－取
摘要 随着分子生物学的发展，不论对酶分子本身作用机制的研究以及其他研究，越来越需要纯度很高的酶制剂，这就要求我们熟悉酶提纯的一般操作及酶的提纯及活力测定等重要的生物实验技术，本次实验主要是提取啤酒酵母中的蔗糖酶并测定其Km。在试验过程中用乙醇分级沉淀法，DEAE-Cellulose柱层析，分子筛层析
质粒DNA的小量制备实验——煮沸小量制备法
实验方法原理当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒DNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状，离心时可沉淀下来。推荐采用本方案从1-24个菌落培养液中制备少量的质粒DNA，尽管该方案十分快捷，但制备的DNA的
金相试样的制备研磨及浸蚀
金相试样制备： 金相试样可用手锯、切割机床等切取，试样截取的方向垂直于径向，长度不超过8mm。不论用何种方法取样均应注意试样的温度条件，必要时用水冷却，以避免正式试样因过热而改变其组织。金相试样的研磨 制备好的试样要先在粗砂轮上磨平，等磨痕均匀一致后，即移至细砂轮上继续磨，研磨时要用水冷却试样
金相试样的制备研磨及浸蚀
金相试样制备是金相研究非常重要的一部分，分为:取样→镶嵌→磨光与抛光→浸蚀→观察照相等五个步骤。金相试样制备： 金相试样可用手锯、切割机床等切取，试样截取的方向垂直于径向，长度不超过8mm。不论用何种方法取样均应注意试样的温度条件，必要时用水冷却，以避免正式试样因过热而改变其组织。金相试样的
酿酒酵母培养基制备实验—检测酵母中β半乳糖苷酶活性
试剂、试剂盒酵母氮碱基葡萄糖SC-Ura 或 SC-Trp 或 SC-Len 或 SC-His 的混合物蒸馏水琼脂仪器、耗材磁力搅拌器锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的螺旋盖瓶或锥形瓶中将下面的成分溶于水中，置于搅拌器上混匀。酵母氮碱基 4.0 g，葡萄糖 12.0 g，SC-Ura 或 SC-Tr
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 TE 缓冲液双蒸水仪器、耗材 磁力搅拌器玻璃烧杯实验步骤 一、单链载体 DNA 的制备1. 在 100 ml 灭菌 TE 缓冲液中溶解 200 mg 高分子量 DNA，置于磁力搅拌器上剧烈搅拌 2~3 个小时以混匀。2. 将载体 DNA 溶液分装成 9 个 10 ml
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验
转化材料的制备 高效转化法 转化含有质粒的菌株 快速简便的转化法 实验材料 DNA