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酵母DNA的小量制备

实验方法原理 通过消化细胞壁,然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割,也可用作 PCR 的模板。 实验材料 酶解酶 100T 酵母细胞 试剂、试剂盒 异丙醇 醋酸钾 SDS 醋酸钠 山梨糖醇缓冲液 TE 酵母重悬浮缓冲液 仪器、耗......阅读全文

北大学者发表JBC封面文章:真核细胞DNA复制起始新机制

  来自北京大学生科院的研究人员发表了题为“Sap1 is a replication-initiation factor essential for the assembly of pre-replicative complex in the fission yeast Schizosacchar

癌细胞线粒体DNA漂移的分子机理

  通过对57例结肠癌患者的基因组进行基因分析,研究人员发现患者体细胞核内的平均线粒体DNA数量比健康人高4.42倍。“这表明,迁移到核基因组中的线粒体DNA可能对癌症的发展起重要作用,”本文的共同作者,来自UAB公共卫生学院的生物统计学教授Hemant K. Tiwari博士和UAB医学院遗传学教

酵母双杂交系统的实验步骤

酵母双杂交系统的实验步骤 1. 将报告基因p8op-LacZ转化酵母EGY48菌株,用培养基SD/-Ura筛选。2. 同时构建DNA文库,并纯化足够的质粒以转化酵母细胞。3. 构建DNA-BD/靶蛋白质粒pLexA-X,作为钓饵(bait)。4. 将

酵母DNA的小量制备

实验方法原理 通过消化细胞壁,然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割,也可用作 PCR 的模板。实验材料 酶解酶 100T酵母细胞试剂、试剂盒 异丙醇醋酸钾SDS醋酸钠山梨糖醇缓冲液T

酵母DNA的小量制备

实验方法原理通过消化细胞壁,然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割,也可用作 PCR 的模板。实验材料酶解酶 100T酵母细胞试剂、试剂盒异丙醇醋酸钾SDS醋酸钠山梨糖醇缓冲液TE酵母

独体—基于纤连蛋白类型Ⅲ结构域框架的抗体模

独体—基于纤连蛋白类型Ⅲ结构域框架的抗体模拟 Akiko  Koide  and  Shohei  Koide          

独体—基于纤连蛋白类型Ⅲ结构域框架的抗体模拟 Akiko ...3

3.2.2 单噬菌体克隆的鉴定( 1 ) 从单克隆中制备噬菌体(或噬粒)。对噬粒,在 2 ml LB-Ap 上过夜生长一单菌落。混合 20 μl 培养液、2 ml LB-Ap  ( 和 IPTG,如愿意的话)和 1010 个/ml 辅助噬菌体 KO7。37°C 剧烈摇动保育过夜。对

酵母遗传学方法实验指南——技术和方案3

技术和方案3 酵母 DNA 分离实验材料质粒DNA玻璃珠试剂、试剂盒YPD消解酶 100TTris-HClSDS乙酸钾TE 缓冲液RNaseA 溶液山梨醇无水异丙醇裂解缓冲液仪器、耗材三角瓶离心管实验步骤一、酵母 DNA 微量制备(40 ml)1.在 125 ml 三角瓶中用 40 mlYPD 培养

双杂交和其他双成分系统实验

            实验材料 载体和酵母菌 试剂、试剂盒 缓冲液和溶液 SD

酵母遗传学方法实验指南——技术和方案7

技术和方案7 质粒 DNA 的羟胺突变试剂、试剂盒羟胺溶液氯化铯纯化的质粒DNANaCl牛血清白蛋白无水乙醇TE 缓冲液实验步骤1.临用之前制备羟胺溶液,置冰上待用。2.将用 CsCl 纯化的 10 埤质粒 DNA 加到含 500ul 羟胺溶液的微量离心管中。3.在 37°C 下温育 20 h。4.

从人类基因组到人造生命:克雷格·文特尔领路生命科学

  4 合成生物学的贡献和困扰  4.1 合成生物学的概念与意义    合成生物学 (Synthetic biology) 是一门建立在系统生物学、生物信息学等学科基础之上,并以基因组技术为核心的现代生物科学。  合成生物学一词最早出现于1911年的The Lancet杂志,但许多学者认为合成生物学

独体—基于纤连蛋白类型Ⅲ结构域框架的抗体模拟 实验

实验材料pAS38pAS45pAS47试剂、试剂盒聚乙二醇(PEG) 氯化钠溶液HEPES 缓冲液涂布溶液Tris 缓冲盐水TBS-Tween-20琼脂糖-磷酸溶液仪器、耗材LBSOCYT实验步骤3.1 实物库构建我们用 Kunkel 突变技术构建大多数的实物库虽然我们证明了  AB 链套

酵母DNA微量制备

实验概要本实验介绍了分别从40ml和5ml酵母培养液中制备酵母DNA的操作流程。实验步骤1. 酵母DNA微量制备(40ml)   1) 在125ml三角瓶中用40ml YPD培养液在30℃条件下培养细胞达最大生长量(过夜)。   2) 将上述培养物移入螺盖离心

真菌/酵母细胞线粒体DNA萃取试剂盒使用说明

  真菌/酵母细胞线粒体DNA萃取试剂盒产品说明书(中文版)   主要用途   真菌/酵母细胞线粒体DNA萃取试剂是一种旨在使用生物、化学和物理方法相结合,有效去除真菌/酵母菌细胞壁,进一步快速且充分裂解真菌/酵母菌细胞,从而分离出完整而纯化的线粒体细胞器,然后进一步生物酶处理以获得高质量的线粒

酵母遗传学方法1:DNA分离

酵母DNA分离1)酵母DNA微量制备(40ml)1.在125ml三角瓶中用40ml YPD培养液在30℃条件下培养细胞达最大生长量(过夜)。2.将上述培养物移入螺盖离心管,用医用离心机或Sorvall SS-34转头以5000r/min离心5分钟,弃去上清液。3.将细胞悬浮在3ml的0.9mol/L

我国学者解析DNA复制起点识别复合物高分辨冷冻电镜结构

图. ORC通过弯曲DNA来进一步加载DNA复制解旋酶MCM2-7的过程模式图  在国家自然科学基金项目(项目批准号:31761163004、31725007、31630087)等资助下,北京大学生命科学学院高宁教授课题组与香港科技大学戴碧瓘教授课题组合作,解析了酿酒酵母ORC结合DNA复制起始位点

我国学者解析DNA复制起点识别复合物高分辨冷冻电镜结构

  在国家自然科学基金项目(项目批准号:31761163004、31725007、31630087)等资助下,北京大学生命科学学院高宁教授课题组与香港科技大学戴碧瓘教授课题组合作,解析了酿酒酵母ORC结合DNA复制起始位点3-Å分辨率的冷冻电镜结构。研究成果以 “Structure of the O

NAR:解析酵母四链DNA结构 助力癌症药物疗法的开发

  近日,刊登在Nucleic Acids Research杂志上的一项研究报告中,来自瑞典于默奥大学(Umea University)的研究人员通过研究发现,在裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)细胞中含量鸟嘌呤的特殊DNA序列或可形成四链DNA结构,而且运动蛋白Pfh1

Nature惊人发现:RNA,修复损伤的模板

  能够准确地修复自发的错误、氧化或诱变剂导致的DNA损伤对于细胞生存至关重要。这种修复通常是利用完全相同或同源的完整DNA序列来实现。但科学家们现在证实,在一种常见芽殖酵母细胞内RNA可充当模板用来修复破坏性最大的DNA损伤——DNA双链断裂。  尽管较早的研究表明了将RNA寡核苷酸导入到细胞中可

利用PCR分析酵母菌落

利用PCR分析酵母菌落主要用于确定酵母中是否携带目的DNA序列。实验方法原理用 PCR 分析酵母菌落时,无需纯化 DNA。本方案以单个酵母菌落的粗裂解液作为 PCR 扩增的模板,来确定酵母中是否携带目的 DNA 序列。 实验材料Taq DNA 聚合酶寡核苷酸引物DNA 标准参照物YAC 重

于洋博士等发现基因组长片段DNA插入的新机制

  我们身体中每个细胞的基因组DNA每天都会面临成千上万次的损伤。所幸的是,细胞中有一套能够修复各种类型损伤的机器来保证基因组的完整性(genome integrity)。修复DNA损伤的机器在从酵母到人所有的真核生物中都是非常保守的,因此酵母作为模式生物被广泛应用于DNA修复(DNA repair

科学家使用基因编辑技术酿造啤酒,口感更带劲

  据英国《每日邮报》报道,加州大学伯克利分校的科学家们使用基因编辑技术来酿造啤酒,味觉测试发现这种不用啤酒花的特制啤酒比用啤酒花酿制的酒更带劲。  为了实现这一点,研究者对酵母菌株进行基因改造并用于酿酒,结果成功模拟出用啤酒花酿制的口味。  查尔斯·登比(Charles Denby)发表论文称,酿

利用PCR分析酵母菌落

利用PCR分析酵母菌落             实验方法原理 用 PCR 分析酵母菌落时,无需纯化 DNA。本方案以单个酵

国自然研究热点—eccDNA的前世今生

  ​1. eccDNA为什么火?它到底是何方神圣?   2019年11月,顶尖国际学术期刊《Nature》和《Cell》相继发表了关于染色体外环状DNA(extrachromosomal circular DNA,eccDNA)的重要研究,彻底颠覆了人们对癌基因的传统认知,同时也迅速引爆了整个生

国自然研究热点—eccDNA的前世今生

  2019年11月,顶尖国际学术期刊《Nature》和《Cell》相继发表了关于染色体外环状DNA(extrachromosomal circular DNA,eccDNA)的重要研究,彻底颠覆了人们对癌基因的传统认知,同时也迅速引爆了整个生物医学界,一时之间,将人们的目光都吸引到这个科研界的新宠

外显子捕获与扩增

            实验材料 大肠杆菌菌株 HB101 质粒 pSPL3 COS-7 细胞 载体 pBluescriptⅡ

外显子捕获与扩增(一)

实验材料 大肠杆菌菌株 HB101 质粒 pSPL3COS-7 细胞载体 pBluescriptⅡ大肠杆菌 DH5α试剂、试剂盒 pSPL3 多克隆位点图谱限制性内切核酸酶PvuⅡT4DNA 连接酶LB 琼脂平板黏粒载体TESOC 培养基琼脂糖凝胶LB 肉汤培养基PBS胰酶-EDTA 溶液D

《科学》公布 2017 年度人类10大突破,你知道几个?

《科学》期刊公布了2017年最令人类激动的10大科学突破,科学仪器界的朋友们,也许你正在使用其中的几种科技继续求索,其中,我们还看到了中国在量子通信方面的翘楚地位。接下来,就让我们一起分享2017的这些美好时刻,希望2018全球在科学界求索的人们,带给人类更多的惊喜。Top10冷冻电镜标志年科技让人

外显子捕获与扩增1

本方案以哺乳动物穿梭载体 pSPL3 为例,描述了外显子扩增的方法,内容分为以下五个阶段。阶段 1: 文库的构建; 阶段 2: 电穿孔法将文库转染 COS-7 细胞; 阶段 3:mRNA 的提取; 阶段 4: 反转录 PCR; 阶段 5: 克隆分析。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)上册,作者:

双杂交和其他双成分系统实验(五)

离心机和转子Sorvall RT6000 离心机,H1000B MPC 和 H6000A MPC 转子(离心微量滴定板用)专用设备玻璃珠(直径 0.45 mm, 无菌;Sigma)微量滴定板(24 孔或 96 孔 [可选])重复用移液管可选,请参见步骤 1。附加试剂此方案的步骤 2 需要第 1 章方