磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离——IMAC分离／富集磷酸肽
实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤磷酸肽分析的常见困难是由磷酸化的低化学计量值导致的，样品中相同序列肽段的磷酸肽的含量要比非磷酸化肽段含量少得多，这种情况下即使 32p标记的 2D-PP 上的点，经全蛋白质水解及 HPLC 组分收集，已经确定磷酸肽存在，用质谱技术也难以鉴定磷酸肽。数据依赖的 MS/MS 方法不能鉴定样品中含量少的成分，因为 CID 优先选择丰度高的离子进行分析，为了解决这一问题常用 IMAC 选择性富集磷酸脱这一技术将 Fe3+ 或 Ga2+等金属离子整合到含有亚氨基二乙酸 (iminodiacetk acid) 或次氮基三醋酸 (nitrilotriacetic acid) 的色谱固定相上。磷酸肽与固定相有高亲和力，被选择性地吸附在上面。用磷酸盐或高 pH 溶液洗脱，洗脱组分即为富集的磷酸肽。虽然这一方法对磷酸肽有选择性，但其他肽，特别是那些富含酸性氨基酸链的肽段也容易被富集。IMA......阅读全文
方案4－离线－microIMAC－富集磷酸化蛋白实验
实验材料来自目标磷酸化蛋白的多肽试剂、试剂盒乙酸铵EDTA氯化铁仪器、耗材接口和组合件氮压缩气体IMAC树脂聚酷亚胺涂层熔融石英毛细管压力管聚四氟乙烯管实验步骤一、IMAC 微柱的构建制备二、磷酸化多肽的富集展开
方案1－用带有－Fe(Ⅲ)－和－Ga(Ⅲ)的－IMAC－纯化磷酸化多肽
实验材料胶内或溶液分离的目标蛋白试剂、试剂盒乙酸EDTAFeCl3甲酸甲醇蛋白裂解酶溶剂仪器、耗材台式离心机去盐树脂IMAC 树脂MALDI 探针质谱仪加样吸头加样器实验步骤一、IMAC 树脂的制备二、多肽样品的制备三、用 NanoscaleIMAC 纯化磷酸化多肽展开
磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离——IMAC－分离/富集磷酸肽
实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤磷酸肽分析的常见困难是由磷酸化的低化学计量值导致的，样品中相同序列肽段的磷酸肽的含量要比非磷酸化肽段含量少得多，这种情况下即使 32p标记的 2D-PP 上的点，经全蛋白质水解及 HPLC 组分收集，已经确定磷酸肽存在，用质谱技术也难以鉴定磷酸肽。数据依赖的
用蛋白质组学方法绘制磷酸化位点图谱
方案1 用带有 Fe(Ⅲ) 和 Ga(Ⅲ)的 IMAC 纯化磷酸化多肽 方案2 在 MALDI 分析之前或之后对磷酸化多肽进行碱性磷酸酶处理 方案3 结合固定化金属离子亲和介质和 MALDI-TOF-MS 直接分析方法对磷酸化多肽进行特征分析实验 方
红外显微镜附件
ATR 物镜布鲁克公司专门设计的ATR物镜，确保用户即可获得最清晰的样品可见光图像又不损失红外光通量。ATR内置的压力传感器可以保证在数据采集过程中，晶体和样品之间的接触效果最佳，可重复性最好。 掠角物镜布鲁克公司ZL设计的GAO掠角物镜专门用于金属衬底上超薄膜的显微分析，在保证红外光偏振性的同时
磷酸化蛋白组学需要多少蛋白
蛋白质磷酸化发挥作用的途径：（信号传导）2. 真核细胞蛋白质磷酸化位点一般位于（丝氨酸）、（苏氨酸）、（赖氨酸）3. 蛋白激酶在细胞信号转导途径主要作用：（调节细胞活性）、（放大传导信号）4. 目前常用的磷酸肽富集方式（TiO2）、（IMAC）5. 磷酸化蛋白组定性分析包括（单一磷酸化位点鉴定）、（
AMBERLITE－XAD2高交联非极性树脂
AMBERLITE XAD-2高交联非极性树脂；高交联树脂是一种吸附树脂,又称为聚合物吸附剂，是一大类不含离子交换基团，具有大且多孔的网状结构、内部结构复杂、高交联度的高分子聚合物。上世纪70年代初利用后交联聚合法合成了一种新型的超高交联树脂。作为一种吸附剂，它具有较大的比表面积，适宜的孔结构和
蛋白纯化的首选标签Histag的优势及应用
His标签蛋白纯化工具-蛋白纯化必备在大肠杆菌和别的原核系统中表达的多组氨酸标签重组蛋白一般运用固定的金属离子亲和色谱来纯化或称为 IMAC. 在这个进程中，支撑物 (一般是珠状琼脂糖凝胶或磁珠颗粒) 用适宜的耦合试剂来进行衍生，比方氨三乙酸 nitrilotriacetic acid (NTA
常见蛋白标签6xHis标签
6xHis标签，也称为多组氨酸标签（polyhistidine ），His6标签或hexa组氨酸标签，这是一种在转染的细胞中目标蛋白的C端或N端上由至少6个组氨酸残基链接上所组成的氨基酸序列，它的序列如下所示：相对小的分子量，低的免疫原性，亲水性和在去污剂和其他添加剂存在的情况下的易变性，因此在天然
苹果史上最短发布会：3纳米M3芯片亮相，可用于研发AI软件
不到一年时间，苹果自研的M芯片再度迎来更新。 北京时间10月31日8点，苹果举办名为“Scary Fast（快得吓人）”线上发布会，发布了全新的M3芯片系列，包括M3、M3 PRO和M3 MAX，以及搭载M3芯片的14英寸和16英寸笔记本电脑以及24英寸iMac。本次发布会仅持续了半个小时，
见所未见：OptiMS拓展您的质谱潜能
鉴定翻译后修饰的位点 奥地利Innsbruck医学院生物中心临床生物化学部的Bettina Sarg博士 题目：Application of CESI-MS for the Analysis of Site-specific Protein Modifications Betti
分子生物学蛋白质磷酸化分析技术
在所 有 的 翻译后修饰中，可逆的磷酸化，几乎调节着生命活动的整个过程，包括细胞的增殖、发育和分化，神经活动，肌肉收缩，新陈代谢，肿瘤发生等。据统计，哺乳动物细胞内有三分之一以上的蛋白质可以被磷酸化川，蛋白质的可逆磷酸化使得蛋白质组学研究更为复杂。 真核 生 物 细胞蛋白质中主要的磷酸化氨基酸为丝氨
分子生物学蛋白质磷酸化分析技术
在所 有 的 翻译后修饰中，可逆的磷酸化，几乎调节着生命活动的整个过程，包括细胞的增殖、发育和分化，神经活动，肌肉收缩，新陈代谢，肿瘤发生等。据统计，哺乳动物细胞内有三分之一以上的蛋白质可以被磷酸化川，蛋白质的可逆磷酸化使得蛋白质组学研究更为复杂。 真核 生 物 细胞蛋白质中主要的磷酸化氨基酸为丝氨
亲和偶联－－组氨酸标签（Histag）
亲和层析法（IMAC）是目前最广泛使用的纯化技术，该技术是基于蛋白表面残基（组氨酸、半胱氨酸和一些少量的色氨酸等）与过渡金属阳离子的相互作用而形成螯合，该过渡金属 / 蛋白络合物再与螯功能基团链接到琼脂糖微球上，通常通过降低 pH值或添加咪唑的方式来洗脱目标蛋白。 低耐压ABT 提供两种螯合微球，使
日本电子在APMC10发布ipad遥控扫描电镜
在澳大利亚珀斯 (Perth) 召开的第十届亚太电镜(APMC10)大会上，日本电子发布了可以用ipad、iphone、iMac遥控的场发射扫描电镜程序界面，适用于日本电子生产的全部场发射扫描电镜。这是继日本电子的钨灯丝扫描电镜JSM-6010扫描电镜后，日本电子推出的更加方便、有趣的控制系
科学家建立规模化抗肿瘤基因工程巨噬细胞技术
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/3/519324.shtm近日，中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员潘光锦团队在人多能干细胞来源基因工程化巨噬细胞抗肿瘤研发中取得新进展，研究提供了一种大规模生产用于实体瘤治疗的基因工程化巨噬细胞策略，并开
科学家建立规模化抗肿瘤基因工程巨噬细胞技术
近日，中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员潘光锦团队在人多能干细胞来源基因工程化巨噬细胞抗肿瘤研发中取得新进展，研究提供了一种大规模生产用于实体瘤治疗的基因工程化巨噬细胞策略，并开发出一种功能增强型抗肿瘤基因工程化巨噬细胞。相关成果发表于《分子治疗—方法与临床开发》。人多能干细胞来源的分泌IL1
方案3－固定化金属离子亲和介质对磷酸化多肽进行分析
实验材料牛小肠碱性磷酸酶羧肽酶Y目标磷酸化蛋白TPCK 修饰的膜蛋白酶试剂、试剂盒乙酸EDTAFeCl3NH4HCO3MALDI 基质镍-次氨基三乙酸（Ni-NTA)树脂柠檬酸钠仪器、耗材致密的反应柱子（CRC)过滤器孵育器MALDI 质谱仪MALDI 靶板微量离心管实验步骤一、固定化金属离子亲和柱
工业常用的生物分离技术有哪几种
常用到得分离方法：盐析。常用的中性盐有硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等，但以硫酸铵为最多。得到的蛋白质一般不失活，一定条件下又可重新溶解，故这种沉淀蛋白质的方法在分离、浓缩，贮存、纯化蛋白质的工作中应用极广。萃取分离法（包括溶剂萃取、胶团萃取、双水相萃取、超临界流体萃取、固相萃取、固相微萃取、溶剂微萃取等）
利用基于磁珠的人类血清蛋白质表达谱从非病样中区分...
利用基于磁珠的人类血清蛋白质表达谱从非病样中区分急性淋巴性白血病布鲁克·道尔顿公司（Bruker Daltonics）新研究出的CLINPROT?解决方案适于复杂蛋白质组表达谱模式的样品制备和模式获得以及比较分析。在一项先导性的研究中，利用CLINPROT系统，对37名急性淋巴性白血病（ALL）
磷酸化蛋白鉴定实验
实验材料测序级膜蛋白酶 试剂、试剂盒二硫苏糖醇 碘代乙酰
磷酸化蛋白鉴定实验
实验材料测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤这里所述的方法概括为下列几个步骤：胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质（见 24. 3.1 )；固相金属螯合亲和层析（IMAC) 富集磷酸肽（见 24. 3. 2 )；用串联质谱对磷酸
磷酸化蛋白鉴定实验
实验材料 测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒 二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材 螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤 这里所述的方法概括为下列几个步骤：胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质（见 24. 3.1 )；固相金属螯合亲和层析（IMAC) 富集磷酸肽（见 24. 3. 2 )；用串
新品来袭，苹果春季特别活动下月召开
彭博社Mark Gurman透露的最新消息称，苹果计划在3月8日举办春季特别活动。© 由 太平洋电脑网 提供 从外媒的爆料来看，此次的苹果苹果将会推出 5 款新 Mac，包括 2 台笔记本和 3 台桌面设备： ● 重新设计的 MacBook Air，配备 M2 芯片和多种颜色选择 ●
蛋白翻译后修饰的基金申请解析与研究注意点（一）
每年三月初，都是科研界的“高考”倒计时，因为距离国自然基金申请的截止日期已不到半月。纵观历年国自然申请情况，蛋白的翻译后修饰都是申请中重大研究方向之一。2018年国自然统计表明，磷酸化、泛素化、乙酰化等修饰的相关基金项目，总研究资助金额超过2亿。 继上周的肠道微生物研究方案解析
蛋白翻译后修饰的基金申请解析与研究注意点（一）
每年三月初，都是科研界的“高考”倒计时，因为距离国自然基金申请的截止日期已不到半月。纵观历年国自然申请情况，蛋白的翻译后修饰都是申请中重大研究方向之一。2018年国自然统计表明，磷酸化、泛素化、乙酰化等修饰的相关基金项目，总研究资助金额超过2亿。继上周的肠道微生物研究方案解析后（国自然冲刺：打通菌群
蛋白质组学分离分析方法进展
分析测试百科网讯 2015年10月17日，第二届全国质谱分析学术报告会（质谱大会）在浙江大学紫荆港校区体育馆盛大开幕。中国科学院大连化学物理研究所 张玉奎 来自中国科学院大连化学物理研究所的张玉奎院士带来了题为《蛋白质组学分离分析方法进展》的报告。 张玉奎主要介绍了蛋白质样品预处理、蛋白质组
液液分离，液固分离采用的设备原理和方法？
液液分离，应该是两种互不相溶的（如氯仿和水溶液）就用分液漏斗，静置分层后分离即可。原理是两种溶液不相溶和密度不同，复就会出现分层现象。 液固分离，简单的就是用适当的滤器过滤，分别收集处理。另外就是使用离心机，原理分子或颗粒的重量不同。 常用的分离方法 分离方法开始主要用于制化工行业中
重组G蛋白偶联受体的纯化实验（一）
一、引言天然的整合膜蛋白的量并不充足。因此对其的结构测定和功能分析需要:①重组膜蛋白的生产系统;②能分离得到有活性的膜蛋白（而不是没有功能、折叠错误的膜蛋白）的纯化策略。表达并纯化原核和真核的膜蛋白在文献中都有报道。读者可以参考如Grisshammer 和Tate(1995;2003) 及Gri
磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离
2D-PP 分离磷酸肽 RP-HPLC 分离磷酸肽 高分辨凝胶电泳分离磷酸肽 IMAC 分离／富集磷酸肽 实验方法原理