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融合蛋白化学降解实验1

实验材料融合蛋白试剂、试剂盒CNBr甲酸SDS仪器、耗材离心机分光光度计水浴锅实验步骤1. 进行预试验以确定最短温育反应时间。冻干两小份50 μl 的融合蛋白溶液,将其中一份重悬于5050 μl 50 mg/ml CNBr/甲酸中,另一份重悬于50 μl 含CNBr 的70%甲酸中,室温下反应。2. 在0、8、24及48 h 的时刻,各取5 μl 并冻干。 3. 往所有冻干样本加20 μl 1×SDS样品缓冲液,煮沸10 min,加样于SDS-聚丙烯酰胺凝胶。 4. 分析凝胶电泳结果以确定完全裂解蛋白所需的最短温育反应时间。展开......阅读全文

融合蛋白化学降解实验1

实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒 CNBr甲酸SDS 仪器、耗材 离心机分光光度计水浴锅 实验步骤 1.  进行预试验以确定最短温育反应时间。冻干两小份50 μl 的融合蛋白溶液,将其中一份重悬于5050 μl 50 mg/ml CNBr/甲酸中,另一

融合蛋白化学降解实验

实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒 CNBr甲酸SDS 仪器、耗材 离心机分光光度计水浴锅 实验步骤 1.  进行预试验以确定最短温育反应时间。冻干两小份50 μl 的融合蛋白溶液,将其中一份重悬于5050 μl 50 mg/ml CNBr/甲酸中,另一份重悬于50 μl 含CNBr 的7

融合蛋白化学降解实验

基本方案 用溴化氰             实验方法原理 实验材料 1 mg ml 融合蛋白

融合蛋白化学降解实验

基本方案 备选方案1 备选方案2             实验材料 融合蛋白

融合蛋白化学降解实验3

实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒 天冬氨酸脯氨酸甲酸乙酸盐酸胍 仪器、耗材 电泳仪离心机水浴锅 实验步骤 1.  进行预实验确定最佳的水解条件。准备四个反应混合物: (1)反应1:20 μg 溶解在70%甲酸中的融合蛋白。 (2)反应2:20 μg

融合蛋白化学降解实验2

实验材料融合蛋白试剂、试剂盒Tris·ClNaCl盐酸胍羟胺裂解缓冲液SDS仪器、耗材离心机水浴锅培养箱实验步骤1.  进行预试验以确定最短保温反应时间。将50 μl 1 mg/ml  融合蛋白与50 μl 2×羟胺裂解缓冲液混合在1.5 ml 微量离心管中,45℃温育反应。 2.  在0、2、4、

融合蛋白化学降解实验—— 用溴化氰

实验材料1 mg ml 融合蛋白试剂、试剂盒50 mg ml CNBr70%(V V)甲酸1 × SDS 样品缓冲液实验步骤1. 进行预试验以确定最短温育反应时间。冻干两小份各 50 μl 的融合蛋白溶液,将其中一份重悬于 50 μl 50 mg/ml CNBr / 70% 甲酸中,另一份重悬于 5

融合蛋白的酶解实验1

实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒 SDS 仪器、耗材 水浴锅培养箱离心机 实验步骤 1.  准备两个小量预试验反应以确定最佳温育时间:   (1)反应1:20 μl 含有1 μl 200 μg/ml Xa因子的1 mg/ml 融合蛋白,室温下反应

GST 融合蛋白沉降实验

实验材料 细胞裂解液其中蛋白质 35S 用标记试剂、试剂盒 裂解缓冲液SDS 聚丙烯酰胺凝胶探针GST 蛋白仪器、耗材 沸水浴翻转祥品旋转仪谷胱甘肽琼脂糖球珠实验步骤 材料缓冲液和溶液将缓冲液稀释到适当浓度。裂解缓冲液20 mmol/LTris-Cl(pH8.0)200 mml/L NaCl1 mm

GST 融合蛋白沉降实验

GST 沉降实验与 far western(方案 2) 相比有—个优点:探针蛋白是在更自然的环境下与可能的搭档蛋白孵育,因而增强了相互作用的有效性。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料细胞裂解液其中蛋白质 35S 用标记试剂、试剂盒裂解