融合蛋白的酶解实验3
实验材料融合蛋白试剂、试剂盒SDS钠盐凝血酶裂解液凝血酶仪器、耗材水浴锅培养箱离心机实验步骤1. 准备两个小量预试验以确定最佳裂解反应条件： （1）反应1：20 μl 1 mg/ml 融合蛋白溶液（在合适的缓冲液中）及0.2 μg 凝血酶。（2）反应2：5 μl 1 mg/ml 融合蛋白溶液（模拟消化），25℃下温育反应。 2. 在30 min、1 h、2 h 和4 h 等时刻从反应1中分别取出5 μl 反应液与5 μl 2×SDS样品缓冲液混匀，-20℃冷冻。3. 在4 h，往反应2（摸拟消化）中加入5 μl 2×SDS样品缓冲液。 4. 将5 μl 原始的融合蛋白溶液与5 μl 2×SDS样品缓冲液混匀。5. 将所有样品煮沸10 min，加样于SDS-聚丙烯酰氨凝胶上分析样品的稳定性以及裂解的效率。 6. ......阅读全文
硫氧还原蛋白融合蛋白的表达和纯化实验
基本方案 实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒
融合蛋白的免疫筛选实验——IPTG法
实验方法原理用抗体筛选λgt11 cDNA文库时，可待噬斑长到一定裎度方可诱导表达融合蛋白，筛选到阳性克隆的成功概率就可能大大增加。噬菌体生长3~4 h 后，将含诱导剂IPTG的滤膜放入噬斑平板，即可诱导β-半乳糖苷酶-cDNA融合蛋白的表达，继续在37℃培养，然后按基本方案用抗体对影印滤膜进行筛选
融合蛋白化学降解实验1
实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒 CNBr甲酸SDS 仪器、耗材 离心机分光光度计水浴锅 实验步骤 1. 进行预试验以确定最短温育反应时间。冻干两小份50 μl 的融合蛋白溶液，将其中一份重悬于5050 μl 50 mg/ml CNBr/甲酸中，另一
融合蛋白化学降解实验2
实验材料融合蛋白试剂、试剂盒Tris·ClNaCl盐酸胍羟胺裂解缓冲液SDS仪器、耗材离心机水浴锅培养箱实验步骤1. 进行预试验以确定最短保温反应时间。将50 μl 1 mg/ml 融合蛋白与50 μl 2×羟胺裂解缓冲液混合在1.5 ml 微量离心管中，45℃温育反应。 2. 在0、2、4、
什么是依赖于泛素的蛋白酶解？
中文名称依赖于泛素的蛋白酶解英文名称ubiquitindependent proteolysis定 义需要将底物蛋白质与泛素共价连接，才能被输送到蛋白酶体或溶酶体进行降解的过程。通过此过程消除体内异常蛋白质或调控短寿蛋白质。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest－SF
在生物药肽图分析、蛋白质修饰分析、蛋白质组学研究等诸多工作中，蛋白质的变性与酶解是样品处理的必经之路。RapiGestTM SF正是在这个实验步骤中，用以辅助蛋白酶解的变性试剂[1,2,3]。RapiGest SF有以下优点： ■ 综合水相、有机相溶液条件下，最高效的辅助酶解变性剂。
蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest－SF
在生物药肽图分析、蛋白质修饰分析、蛋白质组学研究等诸多工作中，蛋白质的变性与酶解是样品处理的必经之路。RapiGestTM SF正是在这个实验步骤中，用以辅助蛋白酶解的变性试剂[1,2,3]。RapiGest SF有以下优点：■ 综合水相、有机相溶液条件下，最高效的辅助酶解变性剂。■ 作用过程中，不
融合蛋白的含义
融合蛋白(fusion protein)有两种不同的含义，一种是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物，另一种是介导两个细胞质膜融合的一组蛋白，如在仙台病毒脂双层外侧小叶中含有的两种糖蛋白之一，介导病毒被膜与宿主细胞质膜的融合作用。另一种糖蛋白是血细胞凝集素神经酰胺酶。 两个不同的蛋白质既
融合蛋白的定义
融合蛋白(fusion protein)有两种不同的含义，一种是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物，另一种是介导两个细胞质膜融合的一组蛋白，如在仙台病毒脂双层外侧小叶中含有的两种糖蛋白之一，介导病毒被膜与宿主细胞质膜的融合作用。另一种糖蛋白是血细胞凝集素神经酰胺酶。 两个不同的蛋白质既
融合蛋白的定义
融合蛋白(fusion protein)有两种不同的含义，一种是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物，另一种是介导两个细胞质膜融合的一组蛋白，如在仙台病毒脂双层外侧小叶中含有的两种糖蛋白之一，介导病毒被膜与宿主细胞质膜的融合作用。另一种糖蛋白是血细胞凝集素神经酰胺酶。 两个不同的蛋白质既
融合蛋白的含义
融合蛋白(fusion protein)有两种不同的含义，一种是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物，另一种是介导两个细胞质膜融合的一组蛋白，如在仙台病毒脂双层外侧小叶中含有的两种糖蛋白之一，介导病毒被膜与宿主细胞质膜的融合作用。另一种糖蛋白是血细胞凝集素神经酰胺酶。 两个不同的蛋白质既
融合蛋白的概念
融合蛋白(fusion protein)有两种不同的含义，一种是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物，另一种是介导两个细胞质膜融合的一组蛋白，如在仙台病毒脂双层外侧小叶中含有的两种糖蛋白之一，介导病毒被膜与宿主细胞质膜的融合作用。另一种糖蛋白是血细胞凝集素神经酰胺酶。 两个不同的蛋白质既
蛋白共沉淀检测实验_备择－用GST融合蛋白
实验材料全细胞抽提物试剂、试剂盒谷胱甘肽-琼脂糖或者谷胱甘肽-琼脂糖浆抗体免疫共沉淀缓冲液氯化钠蛋白 A G-琼脂糖浆2 × 样品缓冲液（用于 SDS-PAGE 胶）仪器、耗材20 ml 注射器和 18-G 针头汉密尔顿注射器实验步骤1. 按照蛋白 A/G-琼脂糖浆所述的方式准备两份样本（见「用蛋白
抗蛋白酶3抗体的概述
蛋白酶3(PR3)是抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的主要靶抗原之一，与ANCA结合形成ANCA的胞浆型抗体—抗蛋白酶3抗体，而ANCA是针对中性粒细胞和单核细胞胞浆蛋白的自身抗体。抗蛋白酶3抗体是活动性肉芽肿性血管炎(Granulomatosis with Polyangiitis, GPA)
半自动定氮仪在虾肉蛋白酶酶解的分析应用
虾肉的蛋白质含量十分丰富，可以利用虾肉作为原料，制取蛋白酶酶解液，不仅可以直接做调味品，还能够合成新的调味品，所以对虾肉蛋白酶酶解过程的研究,对于提高虾肉的利用价值,拓宽其深加工领域是有重要意义的。选用一些实验原料以及实验仪器，主要实验试剂和仪器有以下相关产品。 东海冰冻虾仁，胰蛋白酶，中
LacZ和trpE融合蛋白的表达及纯化实验
实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒 氨苄青霉素IAAIPTGPBS盐酸胍Tris·Cl 仪器、耗材 超声波发生器透析袋转子离心机 实验步骤 利用pUR载体表达lacZ融合蛋白： 1a. 按正确的读框将目的基因亚克隆入pUR载体中，转化大肠杆菌感
融合蛋白的免疫筛选实验——基本方案
实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒LB顶层琼脂糖叠氮钠第一抗体仪器、耗材硝酸纤维素滤膜实验步骤1. 在150 ml LB 平板上滴定λgt11 cDNA文库的滴度，宿主菌为大肠杆菌LE392菌株，每个平板使用7 ml 1%LB顶层琼脂。2. 选择适当的滴度铺平板，于37℃温育8 h。 3. 将直径1
LacZ和trpE融合蛋白的表达及纯化实验
基本方法 实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒
LacZ和trpE融合蛋白的表达及纯化实验
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 氨苄青霉素IAAIPTGPBS盐酸胍Tris·Cl仪器、耗材 超声波发生器透析袋转子离心机实验步骤 利用pUR载体表达lacZ融合蛋白： 1a. 按正确的读框将目的基因亚克隆入pUR载体中，转化大肠杆菌感受态细胞，在LB/氨苄青霉素平皿上挑选转化子。2a. 接种含
酶解方法有哪些
试剂配制，银染酶解方法，银染酶解方法
酶解小麦蛋白产物还原糖美拉德反应的光谱研究
：水解植物蛋白是指用酶、酸或碱水解大豆、小麦、玉米等植物蛋白得到的混合产物。水解植物蛋白由于其价格低廉、质构功能性优良和较高的营养价值而被广泛应用于食品生产中。主要将其作为原料制备美拉德反应型香精料或作为添加成分提升食品的感官和营养品质。水解植物蛋白的这类应用是通过美拉德反应实现的。采用紫外可见吸
蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest－SF（一）
在生物药肽图分析、蛋白质修饰分析、蛋白质组学研究等诸多工作中，蛋白质的变性与酶解是样品处理的必经之路。RapiGestTM SF正是在这个实验步骤中，用以辅助蛋白酶解的变性试剂[1,2,3]。RapiGest SF有以下优点：■ 综合水相、有机相溶液条件下，最高效的辅助酶解变性剂。■ 作用过程中，不
蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest－SF（二）
RapiGest SF虽然是一种表面活性剂，但其全面适应液质分析的要求。在使用RapiGest SF作为变性剂完成蛋白酶切后，如果只进行色谱分析，则可无需对RapiGest SF进行处理。如进行液质联用分析，则通过简单的加酸步骤就可将RapiGest SF去除。而酸性溶液环境又恰恰是液质
融合蛋白化学降解实验——－用溴化氰
实验材料1 mg ml 融合蛋白试剂、试剂盒50 mg ml CNBr70%（V V）甲酸1 × SDS 样品缓冲液实验步骤1. 进行预试验以确定最短温育反应时间。冻干两小份各 50 μl 的融合蛋白溶液，将其中一份重悬于 50 μl 50 mg/ml CNBr / 70% 甲酸中，另一份重悬于 5
蛋白酶的测定实验
Anson 测定法 酪蛋白测定法 偶氮酪蛋白测定法 茚三酮测定法 实验方法原理 血红蛋白不是很贵，被用来做这个实验。由于处于天然
蛋白酶的测定实验
实验方法原理 血红蛋白不是很贵，被用来做这个实验。由于处于天然结构的蛋白质通常可以抵制蛋白酶的攻击，因此首先用尿素使血红蛋白失活。分离非水解蛋白质后，利用 Folin-Ciocaheau 试剂的上清液测量消化产物。这种试剂优先识别色氨酸和酪氨酸，但是也可以识别半胱氨酸和组氨酸。'实验温度
依赖于泛素的蛋白酶解的基本信息
中文名称依赖于泛素的蛋白酶解英文名称ubiquitindependent proteolysis定 义需要将底物蛋白质与泛素共价连接，才能被输送到蛋白酶体或溶酶体进行降解的过程。通过此过程消除体内异常蛋白质或调控短寿蛋白质。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
融合蛋白的技术特点
融合基因可在原核细胞(如大肠杆菌) 也可在真核细胞中进行表达。原核表达系统的特点是时程短，费用低，是科研中的主要工具。其缺点是真核蛋白表达没有得到确切修饰；大量蛋 白常常沉淀成不溶性包涵体聚合物，需要复杂的变性和复性过程；大量蛋白的分泌较困难。
融合蛋白的设计类型
融合蛋白的设计大致分为基于重复结构、基于生长因子以及基于细胞粘附分子3类。第1类融合蛋白中最典型的是来源于弹性蛋白( Elastin-Like Polymers，ELPs) 及丝素蛋白( Silk-Like Polymers，SLPs) 的融合蛋白。ELPs 是一种由数个重复的氨基酸序列组成的细胞外
融合蛋白的临床应用
1、DNA疫苗目前，疫苗已经经历了三代：第一代疫苗是用减毒或杀死的病原体来激活机体免疫系统；第二代疫苗是用生物技术和重组DNA技术研制的组分疫苗注射机体诱导免疫应答； 第三代疫苗是直接注射基因重组的抗原基因来激活人体免疫系统，即DNA疫苗。DNA疫苗与传统疫苗相比有着明显的优势，如易于生产，稳定性强