方案11利用脱水胰酶亲和捕获蛋白质实验
试剂、试剂盒乙酸牛胰酶CaCl2溴化氰活化的 Sepharose 4BHClKOHNaHCO3NaOHPMSFPBS硫酸鲑精蛋白乙酸钠三氟乙酸Tris-Cl仪器、耗材透析膜烧结的玻璃漏斗水浴锅实验步骤一、ST-Sepharose 亲和树脂的制备二、脱水胰酶的制备三、脱水胰酶亲和柱的制备四、样品制备、加样和洗脱展开......阅读全文
方案11－利用脱水胰酶亲和捕获蛋白质实验
试剂、试剂盒乙酸牛胰酶CaCl2溴化氰活化的 Sepharose 4BHClKOHNaHCO3NaOHPMSFPBS硫酸鲑精蛋白乙酸钠三氟乙酸Tris-Cl仪器、耗材透析膜烧结的玻璃漏斗水浴锅实验步骤一、ST-Sepharose 亲和树脂的制备二、脱水胰酶的制备三、脱水胰酶亲和柱的制备四、样品制备、
方案5－蛋白质的胰酶消化实验
实验材料冻干的目标蛋白质试剂、试剂盒CaCl2NH4HCO3苯甲基磺酰氟（PMSF)胰酶贮存液Tween-20仪器、耗材聚丙烯试管水浴箱实验步骤1.冻干的蛋白质底物溶解在 1% 的碳酸氢铵中，控制使用尽量少的溶液体积，以达到较高的底物浓度。当蛋白质底物很微量（如小于 1mg) 时，加入 Tween-
亲和层析纯化胰酶
一、实验目的与原理生物大分子化合物的重要特征之一是具有与某些相对应的分子通过次级键或共价键专一结合的能力即亲和力。例如酶与抑制剂之间，抗原与抗体之间，结合的双方不仅是专一的，而且结合以后可以在不丧失生物活性的基础上用物理或化学的方法进行解离。根据这一特性，如果把具有亲和力的一对分子的某一方连接于水不
质谱在蛋白质组学中的应用实验
方案1 蛋白质和多肽 MALDI-MS 分析的一般方法 方案2 反相微型层析柱的制备实验 方案3 固定化酶微型层析柱的制备 方案4 用于蛋白质组分析的微毛细管 HPLC 色谱及 ESI —体化装置的制备和使用 方案5 利用 Nano-LC
方案9－蛋白质的同位素亲和标签实验
实验材料透析或沉淀处理蛋白样品试剂、试剂盒DTTEDTAICAT 试剂三丁基膦Tris胰酶实验步骤第一阶段 ICAT 标记蛋白第二阶段 阳离子交换清洗 ICAT 样品第四阶段 ICAT 标记多肽的质谱分析展开
方案11－胶内蛋白质的硝酸银染色实验
实验材料通过电泳分离的凝胶内蛋白质试剂、试剂盒乙酸显影液固定液甲醇硫酸银水溶液终止反应液仪器、耗材塑料皿摇床实验步骤1.将凝胶放在塑料皿中（用一次性的塑料皿或者彻底洗过的塑料皿），加入足量的固定液以覆盖凝胶。固定 20 min, 并轻轻摇动。2.弃掉固定液，加人足量的 50% 甲醇覆盖胶，轻轻摇动
胰酶
制法要求本品应从检疫合格的猪、羊或牛胰中提取所用动物的种属应明确,生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》的要求性状本品为类白色至微黄色的粉末;微臭,但无霉败的臭气;有引湿性;水溶液煮沸或遇酸即失去酶活力。检查脂肪取本品1.0g,置具塞锥形瓶中,加乙醚10ml,密塞,时时旋动,放置约2小时后,将
蛋白质与免疫亲和介质结合实验
仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶实验步骤 材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶（10%)操作程序1) 将溶解、稀释的 AMS 沉淀物和洗过的免疫亲和介质混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取样 100-ul。2) 立即离心样品，留上清，供 SDS-PAG
蛋白质与免疫亲和介质结合实验
仪器、耗材SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶实验步骤材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶（10%)操作程序1) 将溶解、稀释的 AMS 沉淀物和洗过的免疫亲和介质混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取样 100-ul。2) 立即离心样品，留上清，供 SDS-PAGE
蛋白质与免疫亲和介质结合实验
材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶（10%)操作程序1) 将溶解、稀释的 AMS 沉淀物和洗过的免疫亲和介质混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取样 100-ul。2) 立即离心样品，留上清，供 SDS-PAGE 电泳分析，测
胰酶简介
① 40—55℃时催化淀粉水解作用最大，温度高于55℃，本身遭破坏。②PH值为6.5—7时活性很大；PH值为4时失去活力；PH值为11值活力最大，但极易被破坏。③ 溶液稳定性差，配液后稳定时间为12h。
胰激肽原酶
制法要求本品应从检疫合格的猪胰中提取,生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》的要求。本品来源于动物,在生产过程中应采用适宜的病毒灭活工艺等方法进行病毒安全性控制。性状本品为白色或类白色粉末;无臭本品在水中易溶,在乙醇或乙醚中几乎不溶鉴别(1)照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液
核酸亲和层析法纯化蛋白质实验
步骤一 偶联寡核苷酸到溴化氰活化的 Sepharose 4B 步骤二 核酸亲和层析 实验方法原理 DNA 偶联至溴化氰活化的 Sepharcse 4
核酸亲和层析法纯化蛋白质实验
实验方法原理 DNA 偶联至溴化氰活化的 Sepharcse 4B 是通过它们本身的碱基实现的。从理论上讲，该方法也许干扰最佳结合序列的接近路径，但是这样一个简单的方法一直被广泛地成功应用。偶联效率的定量检测可经 A260 值测定评估，或者更精确地从偶联介质上水解核酸和进行磷酸盐测定。实
方案8－通过肽的半胱氨酰化捕获蛋白质
实验材料复杂蛋白混合物试剂、试剂盒生物素化试剂生物素化 胰酶消化缓冲变性缓冲液变性 还原缓冲液二硫苏糖醇（DTT)甲酸碘乙酰胺PBS胰酶仪器、耗材Centricon YM-3冷冻离心机免疫纯化的固定化抗生物素亲和柱Oasis HLB 抽提柱真空干燥器实验步骤一、变性、还原和缓冲液置换1.在真空干燥器
细胞原代培养实验——胰酶消化法
细胞原代培养可以：（1）为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段；（2）为传代培养创造条件；（3）服务于临床实践，用于药物筛选等。实验方法原理将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、
亲和层析法去除交叉反应性抗体实验
本节介绍一种利用结合细菌蛋白质的基质去除粗制免疫球蛋白中与细菌编码蛋白质发生反应成分的方法（de Wet et al.1984)。该方法也适用于利用培养的细胞或组织抽提物去除交叉反应抗体。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒缓冲液和
胰酶分离提取
一、原理与目的提取制备酶的经典方法，多采用硫酸铵分级沉淀，胰酶在75%饱和度硫酸铵中沉淀，其它杂蛋白一般在10%硫酸铵饱和度下被沉淀而除去。经此多次提取，最后在PH8.0硼酸缓冲液中得到结晶。胰酶在PH3.0时最稳定，可在低温下储存较长的时间而不失活；低与此PH酶易变性；高于PH5时，酶易自溶而失活
核酸亲和层析法纯化蛋白质实验2
核酸亲和层析实验材料样品蛋白质试剂、试剂盒平衡缓冲液（Tris-HClKClEDTA）非特异 DNA实验步骤在上样品液到核酸亲和柱之前，建议首先采用其他的纯化方法，如硫酸铵沉淀、离子交换或凝胶过滤层析等富集目的蛋白。这样可以除去绝大多数的污染物，并减少非特异结合。亲和层析柱一般来讲是短而粗的，例如长
核酸亲和层析法纯化蛋白质实验1
核酸亲和柱的应用极大地促进了核酸结合调节蛋白特性的研究，这些蛋白质涉及基因表达、染色体修复和复制、基因重组等的调控。核酸结合蛋白可以结合单链 DNA、双链 DNA 或 RNA。DNA 结合蛋白结合 DNA 可以是序列特异的，也可以是非特异的。此外，含有特异寡核苷酸的亲和树脂能用于某些酶的分离，这些酶
胰泌素促胰酶素联合试验
胰泌素-促胰酶素联合试验【参考范围】见临床意义。【影响因素】1.不同的研究采用不同剂量的胰泌素（0.25～1.OU/kg）和促胰酶素（1U/kg）组合。2.本试验的敏感度为74%～90%，结果受被研究者疾病的严重性、医学教|育网搜集整理对照组的情况和刺激剂的剂量、用法等因素的影响。【临床意义】1.用
胰泌素促胰酶素联合试验
胰泌素-促胰酶素联合试验 【参考范围】见临床意义。 【影响因素】1.不同的研究采用不同剂量的胰泌素（0.25～1.OU/kg）和促胰酶素（1U/kg）组合。 2.本试验的敏感度为74%～90%，结果受被研究者疾病的严重性、医学教|育网搜集整理对照组的情况和刺激剂的剂量、用法等因素的影响。 【临床意
蛋白质亲和纯化概述
蛋白质的分离纯化是研究蛋白质结构和功能的重要手段，也是制备工业用酶、抗体、疫苗、基因重组药物等的唯一途径。蛋白纯化的方法多种多样。常用的有以下几种方案：基于蛋白质的溶解度不同设计的盐析或等电点沉淀方法；基于蛋白质分子量差异的透析与超滤或凝胶过滤方法；基于蛋白质所带电荷不同设计的等电聚焦电泳或离子交换
方案13－胶内蛋白质的酶解和肽段提取实验
实验材料在二维凝胶电泳中分离的蛋白质试剂、试剂盒胶内胰酶消化缓冲液三氟乙酸（TFA)仪器、耗材冷冻干燥离心机小离心管水浴锅实验步骤1.切下凝胶上的蛋白质点，放人小离心管中。2.以 0.lmol/L NH4HCO3、50% 乙腈（用于胰酶）或 0.05mol/L Tris-HCl(PH9.3)、50%
如何选择合适细胞的消化酶重组胰酶和动物源胰酶
培养细胞的老师们都知道细胞的生命是极其脆弱的在培养过程中有哪些行为是比较伤害细胞的呢？在培养贴壁细胞过程中消化过程在一定程度上是对细胞的一种折磨但是又不得不进行这个过程所以如何做好细胞消化善待细胞们是我们一定要了解的步骤~ 胰酶的作用原理胰酶是一种蛋白酶，酶切位点是肽链的Lys或Arg两个残基的羧基
凝集素亲和层析法纯化蛋白质实验
刀豆素 A 亲和柱纯化蛋白质 实验方法原理 用于亲和层析的凝集素应根据它们结合的特异性和紧密度加以选择。例如，刀豆素 A（Con A）与糖蛋白含有的葡萄糖
凝集素亲和层析法纯化蛋白质实验
凝集素是能可逆性结合碳水化合物的蛋白质。因为绝大多数凝集素至少每个分子有两个碳水化合物结合部位，所以它们可以沉淀糖蛋白和凝集细胞。凝集素也就可以用作糖蛋白的亲和配基，具有单糖的糖蛋白可用温和的蛋白质冼脱条件分离。虽然凝集素亲和层折没有很高的选择性，但是无疑它已成为蛋白质纯化的一种常用方法。它通常作为
凝集素亲和层析法纯化蛋白质实验
实验方法原理 用于亲和层析的凝集素应根据它们结合的特异性和紧密度加以选择。例如，刀豆素 A（Con A）与糖蛋白含有的葡萄糖或甘露糖结合，而麦芽凝集素只与具 N-乙酰葡糖胺的蛋白质结合。胞膜糖蛋白常与麦芽凝集素结合，而可溶性糖蛋白却通常用 Con A 或扁豆凝集素亲和柱纯化。由于在许多情
胰酶肠溶胶囊
规格0.15g贮藏遮光,密封,在阴凉干燥处保存性状本品内容物为类白色至微黄色粉末。检查干燥失重取本品内容物,在105℃千燥4小时,减失重量不得过7.0%(通则0831)微生物限度取本品,照胰酶项下的方法检查,应符合规定其他应符合胶囊剂项下有关的各项规定(通则0103)效价测定胰蛋白酶照紫外-可见分光
胰凝乳蛋白酶
用 SUPHEPA 测定 用 GLUPHEPA 测定 实验方法原理 实验材料 α