由歧化作用测定的PDHC总活性实验
实验材料酶样品试剂、试剂盒磷酸钾MgCl2丙酮酸二磷酸硫胺二硫赤藓糖醇辅酶 ANAD+磷酸转乙酰酶乳酸脱氢酶羟胺FeCl3 试剂仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品30 ℃ 培养 15 min 后将样品放于冰中,然后加入 0.2 ml 2 mol/L 羟胺。室温放置 10 min 后加入 0.6 ml FeCl3 试剂离心 5 min,以缓冲液取代酶样品为空白对照于 546 nm 测量吸收值。计算展开 注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.60.1 mol/L MgCl2(MgCl2·6H2O,Mr=203.3;203 mg 溶于 10 ml 水中)0.1 mol/L 丙酮酸(丙酮酸钠,Mr=110.0;110 mg 溶于 10 ml 水中)0.01 mol/L 二磷酸硫胺(脱羧辅酶,Mr=460.8;46.1 mg 溶于......阅读全文
连续监测法测定乳酸脱氢酶(LD)总活性
乳酸脱氢酶是一种含锌的氧化还原酶类,人体以心、肾、骨骼肌含量最丰富,其次为肝、脾、胰及肺组织含量亦较多。 1. 原理 340nm处吸光度的增加速率与样品中LD活性成正比。 2. 生理变异 血清LD高低和性别关系不大,婴儿酶活性可达成年人两倍,儿童和少年活性比成年人高10%~l5%。
NK细胞活性测定实验
实验方法原理 用放射性核素标记靶细胞,当靶细胞受到破坏时,放射性核素被释放出来,通过测定释放或残留在未被破坏细胞内的放射性核素放射活性,即可计算和推测杀伤细胞的细胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本实验采用51Cr释放法检测人NK细胞活性。实验材料 靶细胞试剂、试
酶活性的测定实验
连续性检测 实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量
酶活性的测定实验
酶活性的测定可应用于:(1)酶动力学的研究;(2)酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度,取决于指定的条件。SI单位是katal,1 katal = 1 mol /s,更实际
利用-Marligen-总-RNA-快速纯化系统纯化总-RNA-实验
由 Marligen Biosciences 提供的 Rapid Total RNA System 可从各种样品中提取 RNA,且产量和质量非常稳定。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒乙醇β-巯基乙醇仪器、耗材转子-定子均化器或类似设备Marligen Rap
利用-Marligen-总-RNA-快速纯化系统纯化总-RNA-实验
试剂、试剂盒 乙醇 β-巯基乙醇 仪器、耗材 转子-定子均化器或类似设备 Marligen Ra
利用-Marligen-总-RNA-快速纯化系统纯化总-RNA-实验
试剂、试剂盒 乙醇β-巯基乙醇仪器、耗材 转子-定子均化器或类似设备 Marligen Rapid Total RNA System实验步骤 一、材料1.缓冲液、溶液和试剂乙醇,70%和100%β-巯基乙醇2.特殊设备转子-定子均化器或类似设备3.其他Marligen Rapid Total RNA
植物总RNA的提取实验
研磨法 实验方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分细胞破碎, 进一步使植物细胞在裂解液中裂解, 用醋酸钠和氯仿沉淀蛋白质, 异丙醇沉淀核酸, 溶解后经氯化锂
总RNA提取实验——CsCl法
实验材料RNA试剂、试剂盒PBS异硫氰酸胍CsClDEPC无水乙醇仪器、耗材注射器电泳仪离心机培养箱实验步骤一、 用于单层培养细胞 1. 室温下用PBS冼涤细胞,每平皿用5 ml,洗2次。2. 在不超过108细胞中加入异硫氰酸胍溶液,并使之遍布整个平皿。3. 用橡皮细胞刮子擦刮平皿,回收粘稠的
植物总RNA的提取实验
实验方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分细胞破碎, 进一步使植物细胞在裂解液中裂解, 用醋酸钠和氯仿沉淀蛋白质, 异丙醇沉淀核酸, 溶解后经氯化锂沉淀总RNA, 洗涤后得到高质量的RNA。本实验旨在了解和掌握植物总RNA 的分离和纯化方法。实验材料 植物RNA试剂、试剂盒 尿素Tris-HClN
总糖含量的测定实验
实验方法原理 苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸(或甲苯衍生物)起显色反应,己糖在490 nm处(戊糖及糖醛酸在480 nm)有最大吸收,吸收值与糖含量呈线性关系。实验材料 葡萄糖试剂、试剂盒 浓硫酸 苯酚仪器、耗材 试管 试管架 移液管 量筒 烧杯 离心管 玻璃碾磨器 离心机 分
血清总胆固醇测定实验
实验方法原理采用异丙醇,抽提时用氧化铝吸附胆红素等于干扰物(也吸附磷脂与甘油,放此抽提液可用于化学法测TG)。离心后在上清液中加入高铁.硫酸试剂显紫红色,显色程度与TG浓度呈正比.实验步骤一、实验试剂:1、异丙醇2、氧化铝(层析用中型氧化铝,用蒸馏水洗数次,倾去不易下沉的细颗粒,吸滤干后在110℃烘
总糖含量的测定实验
苯酚-硫酸法 实验方法原理 苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸(或甲苯衍生物)起显色反应,己糖在490 nm处(戊糖及糖醛酸在480 nm)
果品总酸度的测定实验
实验方法原理 水果中富含有机酸,如乙酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸等,这些有机酸可以用碱标准溶液滴定,以酚酞为指示剂。根据所消耗的碱浓度和体积,即可求出果品中的总酸度:有机酸%= CNaOH·VNaOH K/Mx×100%式中: Mx为实际滴定的试样量(g);VNaOH为滴定果品本身所消耗的NaOH标
血清总胆固醇测定实验
实验方法原理 采用异丙醇,抽提时用氧化铝吸附胆红素等于干扰物(也吸附磷脂与甘油,放此抽提液可用于化学法测TG)。离心后在上清液中加入高铁.硫酸试剂显紫红色,显色程度与TG浓度呈正比.实验步骤 一、实验试剂:1、异丙醇2、氧化铝(层析用中型氧化铝,用蒸馏水洗数次,倾去不易下沉的细颗粒,吸滤干后在110
果品总酸度的测定实验
实验方法原理水果中富含有机酸,如乙酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸等,这些有机酸可以用碱标准溶液滴定,以酚酞为指示剂。根据所消耗的碱浓度和体积,即可求出果品中的总酸度:有机酸%= CNaOH·VNaOH K/Mx×100%式中: Mx为实际滴定的试样量(g);VNaOH为滴定果品本身所消耗的NaOH标液
丙酮酸脱氢酶复合物的临床表现
PDHC 缺陷是导致线粒体能量代谢障碍最常见的原因之一,同时也是儿童乳酸酸中毒和早发性退行性神经变性病的最常见病因。脑内乙酰辅酶A几乎都来源于丙酮酸,所以PDHC的缺乏常导致多种神经系统损害。按照Robinson等提出的标准,患者的临床表现可分为三级,Ⅰ级:病人出生后早期即患有严重的乳酸血症,PDH
简述丙酮酸脱氢酶复合物缺乏的临床表现
PDHC 缺陷是导致线粒体能量代谢障碍最常见的原因之一,同时也是儿童乳酸酸中毒和早发性退行性神经变性病的最常见病因。脑内乙酰辅酶A几乎都来源于丙酮酸,所以PDHC的缺乏常导致多种神经系统损害。按照Robinson等提出的标准,患者的临床表现可分为三级,Ⅰ级:病人出生后早期即患有严重的乳酸血症,P
NK细胞活性检测实验步骤
细胞毒检测技术包括补体依赖细胞毒试验、NK细胞介导的细胞毒试验和特异性CTL活性检测,常用的实验技术有后两种。NK细胞(natural killer cell)是在天然免疫系统发挥主要作用的效应细胞,可直接杀伤病毒感染的靶细胞和某些肿瘤细胞。而细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymp
关于血清总补体活性(CH50)的注意事项介绍
一、抽血前的注意事项 1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。 2、体检前一天的晚八时以后,应禁食,以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。 3、抽血时 应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。 有晕血史者请提前说明,另作特别安
临床化学检查方法介绍血清总补体活性(CH50)介绍
血清总补体活性(CH50)介绍: 补体具有溶解靶细胞、促进吞噬、参与炎症反应等功能,同时补体还在免疫调节、清除免疫复合物、稳定机体内环境、参与变态反应及自身免疫性疾病起关键性作用。总补体活性和单个补体成分含量的变化,对某些疾病的诊断和疗效观察具有重要意义。总补体的测定主要反映补体经传统途径活化的活
Northern印迹和总RNA杂交实验
Northern印迹分析杂交和放射自显影试剂、试剂盒甲醛凝胶溶液 RNA 电泳缓冲液
植物总RNA的提取实验技术
一、实验目的 通过本实验学习从植物组织中提取RNA的方法 二、实验原理 RNA是一类极易降解的分子,要得到完整的 RNA,必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。高浓度强变性剂异硫氰酸胍,可溶解蛋白质,破坏细胞结构,使核蛋白与核酸分离,失活RNA酶,所以RNA从细胞中释
血清总胆固醇的测定实验
无水乙醇提取法 实验方法原理 用无水乙醇提取血清中的胆固醇,同时沉淀蛋白质,向提取液中加入硫磷铁显色剂,胆固醇与浓硫酸及三价铁作用,生成稳定的紫红色化合物。与
Northern印迹和总RNA杂交实验
试剂、试剂盒 甲醛凝胶溶液RNA 电泳缓冲液仪器、耗材 凝胶模梳齿凝胶用具实验步骤 1. 用肥皂和水彻底清洗凝胶模,梳齿和凝胶用具。2. 准备甲醛凝胶溶液。甲醛凝胶溶液(300 ml 1% 琼脂糖凝胶):琼脂糖,3.0 g10x RNA 电泳缓冲液,30 ml Milli-Q 或用玻璃器皿蒸
Northern印迹和总RNA杂交实验
Northern印迹分析 杂交和放射自显影 试剂、试剂盒 甲醛凝胶溶液 RNA 电泳缓冲液
总磷检测实验试剂配制方法
总磷检测实验试剂配制方法实验项目所需试剂配制方法是否完成钼酸铵分光光度法水质总磷检测500mL硫酸(H2SO4)(1+1)取250mL浓硫酸缓慢倒入150ml水中,冷却后倒入500ml容量瓶中,用水冲洗烧杯后倒入容量瓶定容至500mL。500mL广口瓶保存。1mol/L硫酸将27.2mL浓硫酸加入到
细胞活性检测DNA合成增殖实验
BrdU检测法BrdU为胸腺嘧啶核苷(Thymine)的衍生物,可用于标记活细胞中新合成的DNA(细胞活性周期S期),BrdU可随着DNA复制进入子细胞,因此在加入BrdU后分裂增殖的细胞DNA都会带有BrdU标记,可通过抗BrdU单克隆抗体检测,借此检测细胞的增殖能力,但BrdU单克隆抗体检测过程
淀粉酶活性的测定实验
实验方法原理:α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加以处理,钝化其中之一,即可测出另一酶的活性。将提取液加热到70℃维持15分钟以钝化β-淀粉酶,便可测
谷丙转氨酶的活性测定实验
显色法 实验方法原理 血清谷丙转氨酶(SGPT)能催化丙氨酸与酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸,丙酮酸在酸性条件下与2,4-二硝基苯肼可缩合成丙酮酸二硝基苯腙,该腙