由歧化作用测定的PDHC总活性实验
实验材料酶样品试剂、试剂盒磷酸钾MgCl2丙酮酸二磷酸硫胺二硫赤藓糖醇辅酶 ANAD+磷酸转乙酰酶乳酸脱氢酶羟胺FeCl3 试剂仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品30 ℃ 培养 15 min 后将样品放于冰中,然后加入 0.2 ml 2 mol/L 羟胺。室温放置 10 min 后加入 0.6 ml FeCl3 试剂离心 5 min,以缓冲液取代酶样品为空白对照于 546 nm 测量吸收值。计算展开 注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.60.1 mol/L MgCl2(MgCl2·6H2O,Mr=203.3;203 mg 溶于 10 ml 水中)0.1 mol/L 丙酮酸(丙酮酸钠,Mr=110.0;110 mg 溶于 10 ml 水中)0.01 mol/L 二磷酸硫胺(脱羧辅酶,Mr=460.8;46.1 mg 溶于......阅读全文
淀粉酶活性的测定实验
实验方法原理α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加
淀粉酶活性的测定实验
实验方法原理α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加以处理,钝化其中之一,即可测出另一酶的活性。将提取液加热到70℃维持15分钟以钝化β-淀粉酶,便可测定
MTT法细胞活性检测实验步骤
MTT是一种粉末状化学试剂,全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝,是一种黄颜色的染料。MTT主要有两个用途:
连续监测法测定乳酸脱氢酶(LD)总活性临床意义
乳酸脱氢酶是一种含锌的氧化还原酶类,人体以心、肾、骨骼肌含量最丰富,其次为肝、脾、胰及肺组织含量亦较多。1.原理340nm处吸光度的增加速率与样品中LD活性成正比。2.生理变异血清LD高低和性别关系不大,婴儿酶活性可达成年人两倍,儿童和少年活性比成年人高10%~l5%。3.参考值 血清LD-P法:2
总DNA质量检测及酶切实验
实验目的是了解掌握检测DNA 质量的方法以及DNA定量的方法;了解影响DNA在琼脂糖凝胶中泳动速率的因素;训练DNA的琼脂糖凝胶电泳操作及DNA的限制性内切酶操作。来源:《遗传学实验教程》实验方法原理在pH值为8.0~8.3时,核酸分子碱基几乎不解离,磷酸全部解离,核酸分子带负电,在电泳时向正极移动
植物总RNA的提取实验_研磨法
在液氮中研磨植物材料, 使部分细胞破碎, 进一步使植物细胞在裂解液中裂解, 用醋酸钠和氯仿沉淀蛋白质, 异丙醇沉淀核酸, 溶解后经氯化锂沉淀总RNA, 洗涤后得到高质量的RNA。本实验旨在了解和掌握植物总RNA 的分离和纯化方法。实验方法原理在液氮中研磨植物材料, 使部分细胞破碎, 进一步使植物细胞
血清总胆红素和结合胆红素测定实验
实验步骤一、实验试剂;1. 咖啡因一苹果酸钠试剂,称取无水醋酸钠41.0g(CH3COONa·3H2O6 3.0g)苯甲酸钠38.0g,乙二胺四乙酸二钠(EDTA Na2)0.5g,溶于500ml蒸馏水中,再加入咖啡因25.0g搅拌使溶解(加入咖啡因后不发生加热溶解),用蒸馏水补足1升,混匀,用滤纸
免疫学实验血清总补体介绍
血清总补体介绍: 总补体活性是根据补体能使免抗羊红细胞抗体(溶血素)致敏的羊红细胞发生溶血,其溶血程度与总补体活性有关,但非直线关系。总补体活性测定主要反映补体(C1-C9)经传统途径活化后的活性。血清总补体活性的变化,对某些疾病的诊断和治疗有极其重要的作用。 血清总补体正常值:
总DNA质量检测及酶切实验
实验方法原理 在pH值为8.0~8.3时,核酸分子碱基几乎不解离,磷酸全部解离,核酸分子带负电,在电泳时向正极移动。采用适当浓度的凝胶介质作为电泳支持物,在分子筛的作用下,使分子大小和构象不同的核酸分子泳动率出现较大的差异,从而达到分离核酸片段检测其大小的目的。核酸分子中嵌入荧光染料(如EB)后,在
还原糖和总糖的测定实验
实验方法原理:各种单糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。利用溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来,再用酸水解法使没有还原性的双糖和多糖彻底水解成有还原性的单糖。在碱性条件下,还原糖将3,5-二硝基水杨酸还原为3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质),还原糖则被氧化成糖酸及其它
还原糖和总糖的测定实验
实验方法原理各种单糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。利用溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来,再用酸水解法使没有还原性的双糖和多糖彻底水解成有还原性的单糖。在碱性条件下,还原糖将3,5-二硝基水杨酸还原为3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质),还原糖则被氧化成糖酸及其它产
血清总胆红素和结合胆红素测定实验
实验步骤一、实验试剂;1. 咖啡因一苹果酸钠试剂,称取无水醋酸钠41.0g(CH3COONa·3H2O6 3.0g)苯甲酸钠38.0g,乙二胺四乙酸二钠(EDTA Na2)0.5g,溶于500ml蒸馏水中,再加入咖啡因25.0g搅拌使溶解(加入咖啡因后不发生加热溶解),用蒸馏水补足1升,混匀
还原糖和总糖的测定实验
实验方法原理 各种单糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。利用溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来,再用酸水解法使没有还原性的双糖和多糖彻底水解成有还原性的单糖。在碱性条件下,还原糖将3,5-二硝基水杨酸还原为3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质),还原糖则被氧化成糖酸及其它
总DNA质量检测及酶切实验
酶切法 实验方法原理 在pH值为8.0~8.3时,核酸分子碱基几乎不解离,磷酸全部解离,核酸分子带负电,在电泳时向正极移动。采用适当浓度的凝胶介质作为电泳支持
连续监测法测定乳酸脱氢酶(LD)总活性临床意义呢?
乳酸脱氢酶是一种含锌的氧化还原酶类,人体以心、肾、骨骼肌含量最丰富,其次为肝、脾、胰及肺组织含量亦较多。 1.原理 340nm处吸光度的增加速率与样品中LD活性成正比。 2.生理变异 血清LD高低和性别关系不大,婴儿酶活性可达成年人两倍,儿童和少年活性比成年人高10%~l5%。 3.参
活性炭吸附实验如何减小误差
活性炭吸附实验减小误差的方法如下:1、要正确精准的选取样品量。2、增加平行测定次数,减少偶然误差测定次数越多,则平均值就越接近真实值。3、各种计量测试仪器,如实验室电子天平、分光光度计,以及移液管、滴定管、容量瓶等。4、分析方法所规定的技术条件要严格遵守。
硝酸还原酶活性的测定实验
实验方法原理:硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2-
活性炭吸附实验如何减小误差
活性炭吸附实验减小误差的方法如下:1、要正确精准的选取样品量。2、增加平行测定次数,减少偶然误差测定次数越多,则平均值就越接近真实值。3、各种计量测试仪器,如实验室电子天平、分光光度计,以及移液管、滴定管、容量瓶等。4、分析方法所规定的技术条件要严格遵守。
硝酸还原酶活性的测定实验
实验方法原理 硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2-
硝酸还原酶活性的测定实验
实验方法原理硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2-的
维生素B1的生理功能
临床上所用的维生素B1都是化学合成的产品。在细胞内,维生素B1的生物活性形式为硫胺素焦磷酯(thiamine pyrophosphate,TPP),TPP是丙酮酸脱氢酶复合体(pyruvate dehydrogenase complex,PDHC)、α- 酮戊二酸脱氢酶复合体(α-ketogluta
维生素B1的生理功能介绍
临床上所用的维生素B1都是化学合成的产品。在细胞内,维生素B1的生物活性形式为硫胺素焦磷酯(thiamine pyrophosphate,TPP),TPP是丙酮酸脱氢酶复合体 (pyruvate dehydrogenase complex, PDHC)、α -酮戊二酸脱氢酶复合体 (α-keto
细胞因子生物学活性检测实验-古朵实验√
白细胞介素1是一种重要的细胞因子,主要由单核-巨噬细胞产生,IL-1不仅对多种免疫活性细胞有重要的调节功能,而且与发热、炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。目前对IL-1产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺细胞在丝裂原刺激下表达IL
血清补体检测之总补体溶血活性测定与血清C3测定
补体是血清中具有酶活性的一组不耐热的球蛋白,是抗体发挥溶细胞作用的必要补充条件。它由参与补体激活经典途径的9种成分C1(C1q、C1r、C1s)~C9、旁路途径的3种成分及其衍生物、B、D、P和H等因子组成。补体广泛参与机体灭活病原体的免疫反应,也参与破坏自身组织或细胞的免疫损伤。 总补体溶血
植物组织总含水量的测定实验
实验步骤 一、烘干称重法1. 取称量瓶3个,依次编号,分别称取空瓶重。2. 取上述相同的植物材料,用打孔器钻取圆片。立即放入称量瓶中(每瓶随机取样放50片),加盖,准确称出被测样品鲜重(如果被测植物是块茎,切成约1㎜ 厚度圆片,准确称取1 g样品测定)。3. 把3瓶称重后的样品放入烘箱100-105
植物组织总含水量的测定实验
实验步骤 一、烘干称重法1. 取称量瓶3个,依次编号,分别称取空瓶重。2. 取上述相同的植物材料,用打孔器钻取圆片。立即放入称量瓶中(每瓶随机取样放50片),加盖,准确称出被测样
纯化RNA实验——从组织中纯化总RNA
实验材料组织试剂、试剂盒RNA 抽提缓冲液氯仿实验步骤1. 从动物取下组织,直接进行第 2 步或在液氮中快速冷冻新鲜解剖的组织。冷冻后的组织可以贮存在 -70℃。2. 组织(0.05~0.3 g)在 2.0 ml RNA 抽提缓冲液中匀浆。3. 每管加 200 μl 氯仿,混合均匀,冰浴 15 分钟
植物总DNA的快速少量抽提实验
CTAB法 实验方法原理 CTAB法:该方法简便、快速,DNA产量高(纯度稍次,适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂,植物材料在CTAB的
实验用水对总氮检测结果的影响
方案优势 总氮检测中不能只以标准曲线、空白值和标准样品测定值作为受控标准,要考虑实验用水中硝酸根离子的影响。 采用标准 相关标准 方法/原理/步骤 实验试剂 过硫酸钾
COD-氨氮-总磷实验空白的作用
样品空白,作用大了去了,为确保COD氨氮总磷的测定结果准确,空白的作用起到了至关重要的作用。 作用:1、样品空白可以抵消加入测试试剂前由于样品自身存在的色度或浊度而引起的正误差。2、在使用样品空白对测试仪器进行调零后,只有样品与测试试剂发生反应而产生的色度被测定了。由于样品的背景色度和浊度往往各不相