由歧化作用测定的PDHC总活性实验
实验材料酶样品试剂、试剂盒磷酸钾MgCl2丙酮酸二磷酸硫胺二硫赤藓糖醇辅酶 ANAD+磷酸转乙酰酶乳酸脱氢酶羟胺FeCl3 试剂仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品30 ℃ 培养 15 min 后将样品放于冰中,然后加入 0.2 ml 2 mol/L 羟胺。室温放置 10 min 后加入 0.6 ml FeCl3 试剂离心 5 min,以缓冲液取代酶样品为空白对照于 546 nm 测量吸收值。计算展开 注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.60.1 mol/L MgCl2(MgCl2·6H2O,Mr=203.3;203 mg 溶于 10 ml 水中)0.1 mol/L 丙酮酸(丙酮酸钠,Mr=110.0;110 mg 溶于 10 ml 水中)0.01 mol/L 二磷酸硫胺(脱羧辅酶,Mr=460.8;46.1 mg 溶于......阅读全文
COD-氨氮-总磷实验空白的作用
样品空白,作用大了去了,为确保COD氨氮总磷的测定结果准确,空白的作用起到了至关重要的作用。 作用:1、样品空白可以抵消加入测试试剂前由于样品自身存在的色度或浊度而引起的正误差。2、在使用样品空白对测试仪器进行调零后,只有样品与测试试剂发生反应而产生的色度被测定了。由于样品的背景色度和浊度往往各不
总RNA提取实验——氯化锂提取法
实验方法原理用高浓度尿素变性蛋白并抑制RNA 酶,用氯化锂选择沉淀RNA ,其特别适合于从大量样品中提取少量组织RNA ,具有快速简洁的长处,但也存在少量DNA的污染及RNA 得率不高,小RNA 片断丢失的缺陷。实验材料微生物动物细胞植物组织试剂、试剂盒氯化锂尿素Tris-HCLEDTASDS仪器、
双缩脲法血清总蛋白测定实验
实验方法原理 凡分子中含有两个甲酰胺基(-CONH2-)的化合物都能与碱性铜溶液作用,形成紫红色化合物这一反应称双缩脲反应蛋白质分子中有许多肽健(-CONH2-)都能起此反应,而且各种血浆蛋白显色程度基本相同.实验步骤 一、实验操作:按表进行混匀,置25℃30min。(37℃10min)在波长540
总磷分析仪测定实验的试剂
试剂 1、硫酸(H2SO4,A.R)ρ=1.84 2、(1+1)硫酸:取(4.1)硫酸与水等体积混合 3、过硫酸钾,50g/L溶液:将5g过硫酸钾(K2S2O8,A.R)溶于水并稀释至100ml。抗坏血酸,100g/L溶液:溶解10g抗坏血酸(C6H8O6,C.P.)于水中,并稀释至100
植物总DNA的快速少量抽提实验
实验方法原理 CTAB法:该方法简便、快速,DNA产量高(纯度稍次,适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂,植物材料在CTAB的处理下,结合65 °C水浴使细胞裂解、蛋白质变性、DNA被释放出来。CTAB与核酸形成复合物,此复合物在高盐(>0.7 mM)浓度下可溶,并稳
双缩脲法血清总蛋白测定实验
实验方法原理凡分子中含有两个甲酰胺基(-CONH2-)的化合物都能与碱性铜溶液作用,形成紫红色化合物这一反应称双缩脲反应蛋白质分子中有许多肽健(-CONH2-)都能起此反应,而且各种血浆蛋白显色程度基本相同.实验步骤一、实验操作:按表进行混匀,置25℃30min。(37℃10min)在波长540nm
植物组织总含水量的测定实验
实验步骤一、烘干称重法1. 取称量瓶3个,依次编号,分别称取空瓶重。2. 取上述相同的植物材料,用打孔器钻取圆片。立即放入称量瓶中(每瓶随机取样放50片),加盖,准确称出被测样品鲜重(如果被测植物是块茎,切成约1㎜ 厚度圆片,准确称取1 g样品测定)。3. 把3瓶称重后的样品放入烘箱100-105℃
丙酮酸脱氢酶复合物的定义
PDHC由6种酶组成,其中丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase,E1,EC 1.2.4.1)、二氢硫辛酸转乙酰化酶(dihydrolipoamide transacetylase,E2,EC 2.3.1.12)和二氢硫辛酸脱氢酶(dihydrolipoamide dehydro
关于丙酮酸脱氢酶复合物的定义介绍
PDHC由6种酶组成,其中丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase,E1,EC 1.2.4.1)、二氢硫辛酸转乙酰化酶(dihydrolipoamide transacetylase,E2,EC 2.3.1.12)和二氢硫辛酸脱氢酶(dihydrolipoamide dehyd
溶血、黄疸对酶活性测定的影响实验
实验方法原理L-丙氨酸+α-酮戊二酸ALT丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+→L-乳酸+NAD+实验材料黄疸血清试剂、试剂盒ALT/GPT试剂仪器、耗材半自动生化分析仪试管加样器实验步骤1、稀释试剂.2、开机预温达37度.3、选取测定程序.4、测试:5、结果分析:
溶血、黄疸对酶活性测定的影响实验
实验方法原理 L-丙氨酸+α-酮戊二酸ALT丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+→L-乳酸+NAD+实验材料 黄疸血清试剂、试剂盒 ALT/GPT试剂仪器、耗材 半自动生化分析仪试管 加样器实验步骤 1、稀释试剂.2、开机预温达37度.3、选取测定程序.4、测试:5、结果分析:
免疫学实验自然杀伤细胞活性介绍
自然杀伤细胞活性介绍: 自然杀伤细胞又称NK细胞,其主要的功能特征是对肿瘤细胞及病毒感染细胞具有非特异性的杀伤力,这种杀伤效应不依赖抗体与补体,体外检测NK细胞活性是诊断NK细胞功能及其与某些疾病关系的一个重要手段。 自然杀伤细胞活性正常值: 自然释放率要求100∶1,自然杀伤率不呈对数增
藻类多糖的结构与生物活性研究实验
实验材料 大型藻类试剂、试剂盒 NaNO;Na2HPO4•12H2O;EDTA仪器、耗材 偏光光度计;高效液相色谱仪实验步骤 (1)多糖的纯化是将离心分离出的1000 ml培养液,用40℃真空浓缩到50 ml,再移入到透析袋内于4 ℃蒸馏水中透析三天。早晚更换一次蒸馏水,将透析袋内液体倒入烧
免疫学实验抗凝血活性试验介绍
抗凝血活性试验介绍: 实验室研究证明,已致敏的淋巴细胞再接触特异性抗原所产生的淋巴因子,可刺激巨噬细胞产生组织因子,激发外源性凝血作用,促进局部纤维素沉着,导致凝血活性增高。A组溶血性链球菌特异抗原可通过淋巴细胞作用使外周血和心肌细胞的促凝血活性增高(procoagulant activity,P
谷丙转氨酶的活性测定实验_显色法
实验方法原理血清谷丙转氨酶(SGPT)能催化丙氨酸与酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸,丙酮酸在酸性条件下与2,4-二硝基苯肼可缩合成丙酮酸二硝基苯腙,该腙在碱性条件下呈现出橙红色,呈色深浅符合比尔定律,在520 nm处有最大吸收。SGPT 在肝脏中含量最高,由于肝细胞损害,该酶逸出血液,可使 SGPT 含
免疫学实验B因子溶血活性介绍
B因子溶血活性介绍: 补体激活的旁路途径(alternative pathway,AP)激活时,补体前段成分(C1,4,2)不活化。参与AP激活的除C3-C9外,尚有P、D、B等因子。 B因子溶血活性正常值: 83%-121%。 B因子溶血活性临床意义: 补体旁路
雷帕霉素生物活性及实验方法
雷帕霉素是一种特异性的mTOR抑制剂,IC50为0.1nMIn Vitro:雷帕霉素抑制HEK293细胞内源性mTOR活性,IC50为0.1 nM,比iRap和AP21967更有效,IC50分别为5 nM和10 nM [1]。 雷帕霉素通过诱导自噬发挥其对恶性神经胶质瘤细胞的抗肿瘤作用,并且
藻类多糖的结构与生物活性研究实验
高效液相层析(HPLC)法 实验材料 大型藻类 试剂、试剂盒
Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验
实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quen
Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验
实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quench试剂(一种以Ca2+螯合的小牛血红蛋白主要成分、还含溴化
Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验
实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quen
Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验
实验方法原理Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quench试剂(一种以Ca2+螯合的小牛血红蛋白主要成分、还含溴化乙啶试
丙酮酸脱氢酶复合物的基本信息
丙酮酸脱氢酶复合物(pyruvate dehydrogenase complex,PDHC)是一种位于线粒体基质的多酶复合物。PDHC 是一组限速酶, 催化丙酮酸不可逆的氧化脱羧转化成乙酰辅酶A,将糖的有氧氧化与三羧酸循环和氧化磷酸化连接起来, 在细胞线粒体呼吸链能量代谢中的作用至关重要。
丙酮酸脱氢酶复合物的基本信息
丙酮酸脱氢酶复合物( pyruvate dehydrogenase complex, PDHC) 是一种位于线粒体基质的多酶复合物。PDHC 是一组限速酶, 催化丙酮酸不可逆的氧化脱羧转化成乙酰辅酶A, 将糖的有氧氧化与三羧酸循环和氧化磷酸化连接起来, 在细胞线粒体呼吸链能量代谢中的作用至关重要。
关于丙酮酸脱氢酶复合物的基本介绍
丙酮酸脱氢酶复合物(pyruvate dehydrogenase complex,PDHC)是一种位于线粒体基质的多酶复合物。PDHC 是一组限速酶, 催化丙酮酸不可逆的氧化脱羧转化成乙酰辅酶A,将糖的有氧氧化与三羧酸循环和氧化磷酸化连接起来, 在细胞线粒体呼吸链能量代谢中的作用至关重要。
从总-RNA-中除去基因组-DNA-实验
为了进行 FDD 基因表达的分析,以及使用任何其他基于 RNA 的基因表达技术,在反转录合成单链 cDNA 和后续的 PCR 操作之前,必须除掉污染的基因组 DNA。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒变性(甲醛)琼脂糖凝胶琼脂糖蒸馏水甲醛蒸馏水乙醇甲醛MOPS
从总-RNA-中除去基因组-DNA-实验
从总 RNA 中除去基因组 DNA 实验 试剂、试剂盒 变性(甲醛)琼脂糖凝胶 琼脂糖 蒸馏
快速测定水中总磷的绿色实验方法
微型环境监测系统性研究中,水样经消解后将各种形态的磷转变成正磷酸盐后测定的总结果为总磷。有机物严重污染的水样中,快速测定方法的建立,对解决常规方法中干扰和要消化作总磷的测定。具有重要作用价值,尤其是CFA1100连续流动分析系统测定、顺序注射平台-分光光度法测定研究中,对环境监测的重
快速测定水中总磷的绿色实验方法
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从总-RNA-中除去基因组-DNA-实验
试剂、试剂盒 变性(甲醛)琼脂糖凝胶琼脂糖蒸馏水甲醛蒸馏水乙醇 甲醛MOPS 缓冲液乙二胺四乙酸MOPS乙酸钠酚 氯仿(3:1) 溶液氯仿液体酚Tris-HCl电泳缓冲液仪器、耗材 离心机和转头离心管配胶板微波炉实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂变性(甲醛)琼脂糖凝胶(配制过程见第 18步)