从组织中分离制备细胞核基质／中间纤维支架结构
实验材料新鲜组织试剂、试剂盒NaCl 缓冲液细胞骨架缓冲液仪器、耗材Teflon 研杵Doume 匀浆器实验步骤1. 在 4℃ 将新鲜组织切成 1 mm3 左右的小块。在 4℃，用 Teflon 研杵和 Doume 匀浆器在含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液中对切碎的组织进行匀浆，直到没有可见的团块。每克组织用大约 10 ml 缓冲液。含 0.5% Triton X-100 的细胞骨架缓冲液：10 mmol/L PIPES，pH 6.8300 mmoI/L 蔗糖100 mmoI/L NaCI3 mmol/L MgCl21 mmol/L EGTA2. 用一 250 μm 孔径的尼龙滤器过滤匀浆。基质成分和没有充分匀浆的团块将留在滤器上。3. 在 4℃ 用抽提缓冲液抽提 3~5 分钟。抽提缓冲液：10 mmol/L PIPES，pH 6.8250 mmol/L 硫酸铵300 mmol/L 蔗糖3 m......阅读全文
从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构
实验材料新鲜组织试剂、试剂盒NaCl 缓冲液细胞骨架缓冲液仪器、耗材Teflon 研杵Doume 匀浆器实验步骤1. 在 4℃ 将新鲜组织切成 1 mm3 左右的小块。在 4℃，用 Teflon 研杵和 Doume 匀浆器在含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液中对切碎的组织进行
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构细胞核的预先分离实验材料细胞 试剂、试剂盒Tritron X-100
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构 从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构 细胞核的预先分离 实验材料
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
实验材料细胞试剂、试剂盒Tritron X-100抽提缓冲液仪器、耗材电子显微镜实验步骤1. 在 4℃ 用 PBS 洗细胞一次。2. 在 4℃ 用含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液抽提细胞 3 到 5 分钟。直到消化步骤，每 107 个细胞最少要用 1 ml 缓冲液，以后减半
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结...
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构实验实验材料 细胞试剂、试剂盒 Tritron X-100抽提缓冲液仪器、耗材 电子显微镜实验步骤 1. 在 4℃ 用 PBS 洗细胞一次。2. 在 4℃ 用含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液抽提细胞 3 到 5 分钟。直到消
细胞核连缀分析实验_从组织中制备细胞核
实验材料动物组织试剂、试剂盒PBS蔗糖仪器、耗材电动匀浆器特氟隆研杵实验步骤一、用超速离心法从组织中分离细胞核1. 切下动物组织，放入置于冰上的平皿中，用冰冷的 PBS 冲洗。2. 加少量蔗糖Ⅰ溶液，用剪刀或剃须刀片将组织切碎，转入一个干净试管中，加蔗糖Ⅰ溶液至终体积为每克组织 10 ml。3. 用
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料 大鼠 试剂、试剂盒 裂解缓冲液 浓蔗糖溶液
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料大鼠试剂、试剂盒裂解缓冲液浓蔗糖溶液仪器、耗材超速离心机组织研磨器实验步骤1. 配制裂解缓冲液和浓蔗糖溶液（PMSF 在使用前添加），冰上放置。裂解缓冲液：0.25 mol/L 蔗糖网织红细胞标准缓冲液（RSB）0.25 mol/L 蔗糖（超级纯）10 mmol/ Tris-HCl (pH7
中间丝的分离方法实验——从组织中分离中间丝
实验材料牛舌试剂、试剂盒解聚缓冲液组装缓冲液匀浆缓冲液抽提缓冲液柱缓冲液PEM 缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、从牛舌上皮分离角蛋白中间丝1. 从当地屠宰场拿到新鲜牛舌。一条舌头通常可以产出几十毫克纯化了的角蛋白中间丝。2. 用刀片切刮，把舌中的肌肉和黏膜分开。舌黏膜片（大约 1cmx1 cm )
原代细胞核基质的制备
试剂和器材： 1. 硫酸铵（含10mmol/L Tris-HCl，（pH7.4）及0.2mmol/L MgCl2的1mol/L与0.2mol/L硫酸铵溶液）；2. 氯化镁（1mol/L储存液）；3. 苯甲基磺酰氟（PMSF）（无水乙醇配制的1mol/L储存液）；4. 纯化的细胞核保存于含0.25mo
高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用
核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统，既包含蛋白质，又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。 本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。 1. 大鼠肝脏
高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用
核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统，既包含蛋白质，又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。1. 大鼠肝脏
高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用
核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统，既包含蛋白质，又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。1. 大鼠肝脏
高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用
核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统，既包含蛋白质，又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。 本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。 1. 大鼠肝脏(
中间丝的分离方法实验——从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝
实验材料细胞试剂、试剂盒蛋白酶抑制剂裂解缓冲液解聚缓冲液组装缓冲液仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 从培养皿或瓶中吸去培养基并用 5 ml 含蛋白酶抑制剂的冰冷的 PBS 洗细胞。2. 每 75cm2 瓶或培养皿用 1 ml 冰冷的裂解缓冲液 5 分钟裂解细胞。裂解缓冲液：在 PBS 中加入：1% Tr
利用－Trizol－从植物组织中制备－RNA－实验
实验材料 植物组织试剂、试剂盒 Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态N2NaCl柠檬酸钠仪器、耗材 转子-定子均化器研钵和杵圆锥形管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂Trizol(Invitrogen)氯仿异丙醇乙醇，70%，用焦碳酸二乙酯（DEPC) 处理过的水配制DEPC 处
利用－Trizol－从植物组织中制备－RNA－实验
下述方案是经修改过的 Trizol 方案，用于从植物组织中分离 RNA，其中增加了一个高盐异丙酵沉淀步骤，以选择性地沉淀 RNA，而将多聚糖和蛋白多糖留在溶液里。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。实验材料植物组织试剂、试剂盒Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态
利用－Trizol－从植物组织中制备－RNA－实验
实验材料 植物组织 试剂、试剂盒 Trizol 氯仿 异丙醇 乙醇
从石蜡包埋固定的组织中制备－RNA－实验
实验材料 石蜡包埋的组织样品 试剂、试剂盒 甲酰胺 消化缓冲液 乙醇 肝糖
从组织和培养细胞中制备轻线粒体组分
试剂和器材： 1. 匀浆介质：0.25mol/L蔗糖溶液、1mmol/L乙二胺四乙酸、10mmol/L Hepes-NaOH，pH7.4；2. 按要求向溶液加入蛋白酶抑制剂；3. 磷酸盐缓冲液；4. 低速冷冻离心机，配有30—40ml离心管的吊桶式离心转子；5. 高速离心机，配有30—40ml离心管
从石蜡包埋固定的组织中制备－RNA－实验
实验材料 石蜡包埋的组织样品试剂、试剂盒 甲酰胺消化缓冲液乙醇肝糖异丙醇苯酚 氯仿蛋白酶 KTrizol二甲苯仪器、耗材 微量离心管恒温箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂去离子化的甲酰胺焦碳酸二乙酯（DEPC) 处理过的水消化缓冲液（lmol/L 异硫氰酸胍,25 mmol/Lβ-巯基乙醇
从石蜡包埋固定的组织中制备－RNA－实验
该方案是由 Godfrey 等改进 Fisher 的方案发表的。此前已有从固定组织中纯化 RNA 的方案发表。Ambion 和 Roche 发明了从石蜡包埋的组织中纯化 RNA 的商品化试剂盒。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。实验材料石蜡包埋的组织样品试剂、试剂盒甲酰胺
从豌豆组织分离叶绿体实验_叶绿体分离
实验材料叶子组织试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 制备 Percoll 梯度(1) 两个 50 ml 的聚碳酸酯离心管中分别加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.
从豌豆组织分离叶绿体实验
叶绿体分离 实验材料 叶子组织 试剂、试剂盒
从豌豆组织分离叶绿体实验
叶绿体分离实验材料叶子组织 试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液
从组织培养细胞中制备粗微体实验
实验材料细胞试剂、试剂盒环己酰亚胺匀浆缓冲液仪器、耗材培养皿实验步骤1. 培养基中加入环己酰亚胺（溶于蒸馏水，贮存液浓度 0.1 mol/L，-20℃ 保存。如果不溶，试着加热到 40℃ 以帮助溶解）（终浓度 10 μmol/L)，37℃ 保温 5~10 分钟。2. 培养皿从 37℃ 转移到冷室，立
从组织培养细胞中制备粗微体实验
实验材料细胞 试剂、试剂盒环己酰亚胺 匀浆缓冲液
从组织培养细胞中制备粗微体实验
实验材料 细胞 试剂、试剂盒 环己酰亚胺 匀浆缓冲液
线粒体分离实验—从组织中分离线粒体
实验材料肝脏试剂、试剂盒MS仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 取出肝脏，注意不要弄破胆囊。放进一置于冰上的烧杯中，剪去任何结缔组织。称其质量后放回烧杯中。用锋利的剪刀、手术刀或剃须刀片将之切成 1~2 mmol/L 的薄片，用匀浆缓冲液（1x MS) 冲洗两次以去除大部分的血。转移至匀浆器中。加入足够的
从实体组织中制备粗微体实验_从大鼠肝脏制备微体
实验材料雄大鼠试剂、试剂盒蔗糖蔗糖HM仪器、耗材玻璃板实验步骤1. 用断颈法杀死约 150 g 重的雄大鼠，大鼠的数量取决于要制备的粗微体的数量。由于一个 150 g 重的大鼠肝（6 g）大约每克肝蛋白含有 10 mg 粗微体，所以大鼠的数量可以以回收率为 50% 来进行估计。2. 流干血液后，打开