人脐动脉平滑肌细胞培养实验——贴块法
实验方法原理运用贴块法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养，并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液胰蛋白酶胶原酶弹性蛋白酶DMEM仪器、耗材眼科剪滴管离心机培养皿CO2培养箱实验步骤一、实验步骤1. 要用胎牛血清。开始用的是小牛血清，所以总是不成功，培养基换为 DMEM/F12，但后来我又换成 DMEM，也培养出来了。2. 把脐动脉剪开很麻烦，因为它老是打弯，可以找个软木塞，用大头针固定，可用块木板，因为有磨擦力，所以动脉可以固定在板上。3. 对于新手来讲，最麻烦的就是把组织快剪成1 mm3 大小小块，可以找块磨砂玻璃，切完再剪就 好多了。4. 把剪碎的组织快移到培养瓶里，可采用类似牙科的刮匙，直接放进瓶里。加入2 mL 培养液， 一定不能放多，防止漂浮。然后用玻璃分针轻轻将小块分离开。5. 其......阅读全文
大鼠主动脉内皮细胞培养实验
贴块法 实验方法原理 贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养，其方法较酶消化法简便、经济。
大鼠主动脉内皮细胞培养实验
贴块法 实验方法原理 贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养，其方法较酶消化法简便、经济。
平滑肌细胞培养方法4
动脉平滑肌细胞培养的几个问题组织块大小边缘密度翻面时间观察时间对原代细胞萌发的影响对于贴块法的原代培养来源，由于细胞并非直接获得，而是从组织块边缘长出，其中有一“突破过程”，且细胞萌发后尚需一定的细胞密度才能使其存活、增殖，故组织块大小、边缘、密度均影响细胞萌出与否及细胞存活、增殖。公认的方法是将
基底动脉平滑肌细胞原代培养方法
原代细胞培养：取5kg左右兔空气栓塞法处死后断头，于无菌条件下从枕大孔处用大止血箝扳开颅骨暴露并小心取出脑组织放入装有DMEM的培养皿中，用眼科镊分离基底动脉后按常规平滑肌方法贴块培养。传代：（1）吸除培养瓶内旧培养液。（2）D-Hanks液冲洗2遍。（3）加入消化液少许，以能覆盖瓶底为限。（4）倒
平滑肌细胞培养方法
贴壁法原代培养1.1 细胞培养1.1.1 培养液配制 DMEM（美国Gibco公司），Hepes（15mmol/L），青霉素（100u/ml），链霉素（100mg/ml），优质胎牛血清（原代培养浓度20%，传代培养浓度10%，美国Hyclone）。1.1.2 培养器皿 25cm2塑料培养瓶（Cost
原代细胞培养经典案例和细胞药筛介绍（二）
3、神经元细胞原代培养 步骤：1）出生 2 d SD大鼠经戊巴比妥钠麻醉后，碘酒、75％乙醇消毒腹部皮肤，依次剪开皮肤、肌肉、皮下筋膜，无菌操作下取出胚胎放入预冷的D-Hanks平衡盐液中。2）在解剖显微镜下分离并取出胚胎大脑皮层，除去脑膜，剪碎组织成约1mm3大小，加入胰酶-EDTA消化液并放入3
细胞技术专题：兔膀胱平滑肌细胞培养实验（二）
二、结果 两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24 小时均可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长，正常兔 7 天左右、而梗阻兔则需10~12 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。均传代顺利，传代后约正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。本组中均传至第8 代，经第8
细胞技术专题：兔膀胱平滑肌细胞培养实验（一）
兔膀胱平滑肌细胞培养可以：（1）分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞；（2）进行细胞学鉴定研究；（3）用于细胞学其他研究。实验方法酶分离法 实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后，完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞，体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下
细胞技术专题：兔膀胱平滑肌细胞培养实验（三）
收起 注意事项1. 应严格无菌操作。2. 仔细彻底剥除膀胱黏膜、黏膜下及浆膜层，是确保获的大量高质单个膀胱平滑肌细胞的基础。3. 膀胱平滑肌组织应尽量减碎以确保充分消化。4. 严格控制胶原酶和胰蛋白酶的浓度和消化时间，见消化液混浊、组织块呈絮状，或在倒置显微镜下见消化液中有较多单个细胞或细胞小
一分钟带你了解动脉平滑肌细胞的原代培养流程
动脉平滑肌细胞又叫平滑肌纤维，系构成平滑肌的纤维状长细胞。在制作切片标本时，如肌细胞收缩则可变粗，核也随之变粗，甚至可出现螺旋形的扭曲。平滑肌细胞外面包有1层肌膜。每个平滑肌细胞周围有少量纤细的胶质纤维、弹力纤维及网状纤维，包绕于肌膜的表面。 动脉平滑肌细胞培养：取5kg左右实验兔，于无菌条
人滑膜细胞培养实验
实验方法原理滑膜细胞是衬于关节内表面的细胞性内膜和内膜下层，分为A型滑膜细胞(滑膜巨噬细胞)和B型滑膜细胞(滑膜成纤维细胞)．其中A型细胞最显著的功能是吞噬作用和胞饮作用，该型细胞具有吞噬坏死细胞碎屑及病理状态下关节腔内其他物质的功能；B型细胞的功能是合成输出蛋白且与透明质酸酶的形成密切相关，同时与
人滑膜细胞培养实验
实验方法原理 滑膜细胞是衬于关节内表面的细胞性内膜和内膜下层，分为A型滑膜细胞(滑膜巨噬细胞)和B型滑膜细胞(滑膜成纤维细胞)．其中A型细胞最显著的功能是吞噬作用和胞饮作用，该型细胞具有吞噬坏死细胞碎屑及病理状态下关节腔内其他物质的功能；B型
人滑膜细胞培养实验
实验方法原理 滑膜细胞是衬于关节内表面的细胞性内膜和内膜下层，分为A型滑膜细胞(滑膜巨噬细胞)和B型滑膜细胞(滑膜成纤维细胞)．其中A型细胞最显著的功能是吞噬作用和胞饮作用，该型细胞具有吞噬坏死细胞碎屑及病理状态下关节腔内其他物质的功能；B型
兔膀胱平滑肌细胞培养
实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后，完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞，体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态及生长状况，同时进行细胞爬片H-E染色和透射电镜等形态学观察分析，并应用免疫荧光染色平滑肌特有的α-肌动蛋白进行细胞学鉴
肿瘤细胞原代培养实验——组织块法
肿瘤细胞原代培养可以：（1）研究癌变机理；（2）研究抗癌药检测；（3）研究癌分子生物学；（4）用于阐明和解决癌症。实验方法原理肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基，10%血清浓度即可，在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物，或原患者血清（1%-2%）
脐静脉内皮细胞培养方法1
一、试剂和缓冲液配制1、胎牛血清（氯化十六烷基吡啶）（1）解冻胎牛血清（2）在56℃加热30分钟（脱补体作用，盖上瓶）（3）取25ml上述液体放在无菌的50ml的falcon里分馏（4）在-20℃冰冻馏份2、磷酸盐缓冲液（PBS）（1）无钙镁离子的100ML的PBS（10×）（生命技术）（2）900
脐静脉内皮细胞培养方法2
（2）术前准备取一根脐带（离体3个小时内，平均1小时，剪去夹伤部位）2个50ML注射器，1个30ML注射器和1个10ML注射器1个止血钳，2根插管，14号线2CM长，消毒巾，消毒手术刀和无菌手套手术区域准备：一块床单和无菌手套封套3 脐带手术操作和培养（1）用手术刀整齐切断脐带两端（2）静脉（口径最
细胞原代培养实验——组织块直接培养法
实验材料孕鼠新生小鼠试剂、试剂盒RPMI1640培养基牛血清胰蛋白酶Hanks液酒精青霉素链霉素仪器、耗材培养瓶青霉素瓶废液缸血球计数板蜡盘手术器械大头针离心管小玻璃漏斗三角烧瓶平皿吸管试管移液管无菌纱布无菌眼科剪实验步骤 一、将孕鼠或新生小鼠拉颈椎致死，置75%酒精泡2-3秒钟（时间不能过长、以免
胎儿脐动脉栓塞期待治疗病例分析
脐动脉栓塞( umbilical artery thrombosis，UAT) 是一种罕 见的产科并发症，可导致胎死宫内等严重不良妊娠结局的发 生。目前尚无明确的 UAT 临床诊疗方案。本文现将山东大 学齐鲁医院( 青岛) 产科收治的 2 例 UAT 期待治疗病例报道 如下，以供临床医师参考。 1
特殊细胞培养实验_微载体细胞培养法
实验方法原理微载体细胞培养开始于60年代末期，最早使用离子交换凝胶作为载体，轻微搅动即可悬液在培养基中，因而可增加细胞附着的面积，达到大量培养细胞的目的。后来，根据细胞附着生长的特点，对微载体进行了改良，使其带有电荷或其它介质，更利于细胞附着和生长。这一方法亦可用于常规量的培养，也可用于大规模的培养
特殊细胞培养实验_悬浮培养法
实验方法原理悬浮培养是使贴附性细胞呈悬浮状态生长。如所培养的细胞本身属悬浮生长类型，则无须做任何处理，在传代时先做离心处理去除旧培养液，添加新培养液即可。但在培养贴附型细胞时，因其有贴附性，必须进行干扰使细胞不能贴附，才能形成悬浮状态生长的细胞。实验材料细胞仪器、耗材培养瓶搅拌器实验步骤1. 用大
正常人脐静脉原代内皮细胞培养
PriCells - 正常人脐静脉原代内皮细胞培养一、实验试剂1、培养基： PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液： PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液： 1 × P
肺动脉多形性平滑肌肉瘤病例分析
患者男性，65岁。因“右胸痛、呼吸困难3天”就诊，咳嗽、深呼吸及改变体位后症状加重，休息不缓解。发病10天以来，体重下降1kg。体检：心音低钝，P2＞A2，肺动脉瓣区可闻及3/6级收缩期“吹风”样杂音，不向心尖传导。患者既往史、家族史无异常。 实验室检查：血常规：RBC3.92×1012/L，PLT
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）可用于：（1）作为体外实验模型细胞；（2）研究血管内皮细胞的生物学特性及其与各种疾病的关系。实验方法原理本实验采用新鲜的健康产妇新生儿脐带，采用胶原酶Ⅰ型用消化分离得到脐静脉内皮原代细胞。胶原酶是最理想的血管内皮细胞分离酶，对细胞间质有较强的消化作用，能使上皮细胞与胶原
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
实验材料 新生儿脐带试剂、试剂盒 PBS胶原酶M199培养基胰酶EDTADMEM培养基仪器、耗材 针头手术钳离心管低温离心机弯管明胶恒温培养箱显微镜实验步骤1. 将15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的PBS 溶液中储存。（注：4℃下最多贮存24 小时，室温下不超过6 小时，否则废弃）2. 用一个
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
1. 将 15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液中储存。（注：4℃下最多贮存 24 小时，室温下不超过 6 小时，否则废弃）2. 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的 PBS 溶液冲洗 3-5 次，将污血冲洗干净为止。3. 用手术钳夹紧脐带下端，加入 15ml 的胶原酶（1mg
人脐静脉内皮细胞的介绍
人脐静脉内皮细胞（英Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVEC）在进行血管内皮细胞实验时，通常选用的细胞模型为人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells，简称HUVECs)。而不是直接采用静脉血管内皮细
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养 1. 将 15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液中储存。（注：4℃下多贮存 24 小时，室温下不超过 6 小时，否则废弃） 2. 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的 PBS 溶液冲洗 3-5 次，将污血冲洗干净为止。 3. 用手术钳夹紧脐带
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养1 ). 将15-20cm长的新生儿脐带放入无菌的PBS溶液中储存。（注：4℃下最多贮存24小时，室温下不超过6小时，否则废弃）2 ). 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的PBS溶液冲洗3-5次，将污血冲洗干净为止。3 ). 用手术钳夹紧脐带下端，加入15m
脐带和脐血来源干细胞的培养实验_酶消化法
实验材料脐带试剂、试剂盒Wharton胶PBSA胶原酶仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)脐带取材后，可在PBSA中保存1〜24h。(b)除去血管，将Wharton胶剪成大约0.5cm的小组织块。(c)将剪碎的组织块转移到50mL离心管，用无血清DMEM洗，室温250g离心5min。(d)倒掉上清液，将离