流式细胞计量术(基于荧光的蛋白质分析)实验

活细胞表面抗原的荧光染色(直接免疫荧光)实验材料细胞初始抗体试剂、试剂盒PBS 溶液叠氮化钠实验步骤1. 在培养皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液,轻摇,收获细胞。4℃ 1000 g 离心 5 分钟。2. 用 4 ml PBS+0.1% 叠氮化钠和 1% BSA 或热的灭活血清洗细胞。3. 计数细胞,每个样品的最小浓度为 1X106/ml。4. 将样品等分为 50 μl 小体积的含 0.1% 叠氮化钠和 1% 热的灭活血清或 1% 的 PBS 溶液。5. 加合适滴度的初始抗体,用系列稀释确定合适滴度范围。6. 在冰上孵育细胞 30 分钟。7. 在含叠氮化物和 BSA 或热的灭活血清的 4 ml PBS 中洗细胞。8. 1000 g 离心细胞 5 分钟。9. 在相近体积的含 0.1% 叠氮化物和 1% BSA 中重悬细胞,终浓度为 1X106~5X106 /ml。展开......阅读全文

流式细胞计量术(基于荧光的蛋白质分析)实验

活细胞表面抗原的荧光染色(直接免疫荧光)实验材料细胞初始抗体试剂、试剂盒PBS 溶液叠氮化钠实验步骤1. 在培养皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液,轻摇,收获细胞。4℃ 1000 g 离心 5 分钟。2. 用 4 ml PBS+0.1% 叠氮化钠和 1

流式细胞计量术(基于荧光的蛋白质分析)实验

活细胞表面抗原的荧光染色(直接免疫荧光) 活细胞表面抗原的荧光染色(间接免疫荧光)             实验材料 细胞

流式细胞计量术(基于荧光的蛋白质分析)实验

活细胞表面抗原的荧光染色(直接免疫荧光) 活细胞表面抗原的荧光染色(间接免疫荧光)             实验材料 细胞

流式细胞计量术(基于荧光的蛋白质分析)实验2

活细胞表面抗原的荧光染色(间接免疫荧光)实验材料细胞试剂、试剂盒PBS 溶液叠氮化钠实验步骤1. 在培养皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液,收获细胞。此程序比通常的胰蛋白酶消化时间长。4℃ 1000 g 离心 5 分钟。操作始终在冰上进行。2. 用 4

TUNEL分析实验——TUNEL-染色的流式细胞计量术分析

实验材料悬浮细胞试剂、试剂盒PBS甲醛柠檬酸钠溶液仪器、耗材流式细胞计量仪实验步骤1. 凋亡诱导之后,200 g 离心 5 分钟收集 1X106 悬浮细胞,用冷的 PBS 洗 2 次,重复离心。2. 用 2 ml 2% 的甲醛 PBS 溶液固定细胞沉淀,室温下在水平摇床上孵育 30 分钟。3. 20

流式细胞计量术(DNA含量)实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 PBS冷乙醇PI 溶液仪器、耗材 锥形管实验步骤 1. 分离细胞并移至 15 ml 的锥形管中。检查有单个细胞悬浮,1000 g 离心 5 分钟,弃上清。2. 用不含 Ca 或 Mg 的 PBS 将细胞洗 2 次,计数细胞总数,记在管山。3. 用约 500 μl 的 PB

流式细胞计量术(DNA含量)实验

固定全细胞的PI染色 非固定细胞的无洗染色             实验材料 细胞 试剂

流式细胞计量术(DNA含量)实验

固定全细胞的PI染色 非固定细胞的无洗染色             实验材料 细胞 试剂

凋亡中线粒体功能评价实验_△ψm的流式细胞计量术分析

实验材料细胞试剂、试剂盒CMXRos 荧光染料PBS实验步骤1. 按“△ψm 的显微分析” 用 CMXRos 荧光染料培养约 5X105 细胞。2. 用 pH 7.2 的 PBS 将细胞洗 2 次,在水平摇床上用 4% 甲醛-PBS 溶液室温温育细胞沉淀 15 分钟,用以固定。固定细胞在进行流式细胞

流式细胞计量术(DNA含量)实验_固定全细胞的PI染色

实验材料细胞试剂、试剂盒PBS冷乙醇PI 溶液仪器、耗材锥形管实验步骤1. 分离细胞并移至 15 ml 的锥形管中。检查有单个细胞悬浮,1000 g 离心 5 分钟,弃上清。2. 用不含 Ca 或 Mg 的 PBS 将细胞洗 2 次,计数细胞总数,记在管山。3. 用约 500 μl 的 PBS 重悬

流式细胞术荧光那些事儿

自上世纪70年代问世以来,流式细胞术(FCM)在基础科研和临床诊断和治疗上得到了越来越广泛的应用。但是,做FCM往往会遇到荧光信号太弱的情况。好不容易搞了一管细胞去做流式,却做不出荧光信号。真的是急死个人。其实,毛博也是到米国做博士猴以后才开始做流式的。时间不算长。但是做得非常非常多。每天都要做好几

流式细胞计量术(DNA含量)实验_非固定细胞的无洗染色

实验材料细胞试剂、试剂盒蛋白酶NST-DAPI 缓冲液MFM柠檬酸缓冲液DNA 染色 裂解溶液仪器、耗材尼龙筛实验步骤一、组织培养细胞的染色1. 通过对悬浮培养中的细胞倾析或对单层培养的细胞蛋白酶消化来收获细胞。计数细胞,800 g 慢速离心 3 分钟沉淀细胞。2. 细胞染色。3. 在 NST-DA

流式细胞术实验步骤

流式细胞术实验:1、制备细胞悬液,计数2、分装,按照每个EP(1.5ml)管1-2*10 6个细胞分装,3500rpm,4度离心。3、用100ulPBS重悬,加入10ul大鼠血清封闭,4度避光30min。4、加入相应的荧光标记的抗体,混匀,避光,4度孵育30min。5、加入1mlPBS洗两遍。6、用

实验条件对流式细胞术分析结果的影响

磁珠分离与骨髓组织各种细胞的百分率实验步骤展

实验条件对流式细胞术分析结果的影响

低渗处理 未固定细胞样品染色后存放时间对细胞表面标志检测结果的影响 在散射光图上设一个“门”分析多种参数 用CellQuest软件设多个“门”分析某一种参数 在DNA含量分析时去除二联体细胞的方法 校准流式细胞仪线性度和检测流式细

实验条件对流式细胞术分析结果的影响

低渗处理 未固定细胞样品染色后存放时间对细胞表面标志检测结果的影响 在散射光图上设一个“门”分析多种参数 用CellQuest软件设多个“门”分析某一种参数 在DNA含量分析时去除二联体细胞的方法 校准流式细胞仪线性度和检测流式细

流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验

            实验方法原理 取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实

流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验

            实验方法原理 取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实

流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验

实验方法原理取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。实验材料实验样品试剂、试剂盒抗体、PBS溶液仪器、耗材移液器移液吸头离心机实验步骤一、不同来源样品的处理1 . 培养细

流式细胞分析术的特点

一、流式细胞术发展简史流式细胞术(FlowCytometry,FCM)是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术。其特点是:①测量速度快,最快可在1秒种内计测数万个细胞;②可进行多参数测量,可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测量,并具有明显的统计学意义;③是一门综合性

流式细胞分析术的特点

一、流式细胞术发展简史流式细胞术(FlowCytometry,FCM)是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术。其特点是:①测量速度快,最快可在1秒种内计测数万个细胞;②可进行多参数测量,可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测量,并具有明显的统计学意义;③是一门综合性

实验条件对流式细胞术分析结果的影响5

在DNA含量分析时去除二联体细胞的方法实验步骤展开

实验条件对流式细胞术分析结果的影响7

在细胞DNA直方图上鉴别细胞凋亡与DNA异倍体G1期细胞峰实验步骤展开

实验条件对流式细胞术分析结果的影响2

在散射光图上设一个“门”分析多种参数实验步骤展开

实验条件对流式细胞术分析结果的影响6

校准流式细胞仪线性度和检测流式细胞仪灵敏度实验步骤展开

实验条件对流式细胞术分析结果的影响4

用CellQuest软件设多个“门”分析某一种参数实验步骤展开

基于RoHS认证的X荧光分析技术实验研究

RoHS指令(《电气、电子设备中限制使用某些有害物质指令》)规定输往欧洲的电子产品及其组件均需对六种有毒成份:铅(Pb)、汞(Hg)、镉(Cd)、六价铬(Cr6+)、多溴联苯(PBBs)、多溴二苯醚(PBDEs)等有害物质加以限制。近几年该指令已在电子电器、质量检测、环保等相关行业广泛实施应用。在多