单位重力沉降法纯化四膜虫细胞核实验
实验材料细胞核试剂、试剂盒PMSF仪器、耗材培养基有机玻璃容器实验步骤1. 准备细胞核。2. 准备修订培养基,当在冷的条件下强力混合培养基时,在所有修订培养基中加入终浓度为 1 mmol/L 的 PMSF。3. 用 H2O 按 1:1 稀释 2% 修订培养基 7.5 ml。4. 将带有夹子的柔性管连接到聚甲基丙烯酸甲酯有机玻璃容器底部的中心孔和带一通阀的注射器上,另一边也带有夹子的柔性管连接到注射器的三通阀和梯度发生器上。5. 装置建立中所有管道是空的,夹子应夹上一确定梯度发生器贮液槽水平,活塞关闭。6. 用 3% 和 6% 的修订培养基装满梯度发生器的贮液槽,梯度将从 3% 到 6% 形成,所以要确定将 3% 修订培养基放入梯度发生器的混合贮液槽中。先不要混合梯度。7. 用 3% 的修订培养基赶走梯度发生器和注射器之间管中的空气,完成后夹上夹子。倒去注射器中的 3% 培养基。8. 用 1% 的覆盖液赶走注射器和聚甲基丙烯酸甲酯......阅读全文
单位重力沉降法纯化四膜虫细胞核实验
实验材料 细胞核 试剂、试剂盒 PMSF 仪器、耗材
单位重力沉降法纯化四膜虫细胞核实验
单位重力沉降法纯化四膜虫细胞核 实验材料 细胞核 试剂、试剂盒 PMSF 仪器、耗材 培养基
单位重力沉降法纯化四膜虫细胞核实验
实验材料细胞核试剂、试剂盒PMSF仪器、耗材培养基有机玻璃容器实验步骤1. 准备细胞核。2. 准备修订培养基,当在冷的条件下强力混合培养基时,在所有修订培养基中加入终浓度为 1 mmol/L 的 PMSF。3. 用 H2O 按 1:1 稀释 2% 修订培养基 7.5 ml。4. 将带有夹子的柔性管连
废水重力分离处理法沉降法的简介
用沉降法处理废水的构筑物是沉淀池。沉淀池按水流方向分为三种型式:平流式、竖流式和辐流式,分别适于处理小流量、中等流量和大流量的废水。 沉砂池是沉淀池的一种,其作用是去除废水中的砂子等比重较大的无机物,生产中较常用的是平流式沉砂池。 隔油池主要用于上浮分离回收废水中比重小于 1的、呈悬浮状的油
四膜虫细胞核的分离实验
四膜虫细胞核的分离 实验材料 细胞 试剂、试剂盒
四膜虫细胞核的分离实验
实验材料细胞试剂、试剂盒辛醇PMSF仪器、耗材搅拌机光学显微镜实验步骤1. 检测所用细胞数量。2. 收获细胞前在冷环境中强力搅拌时,在所有溶液中加入蛋白酶抑制剂。3. 在培养基 A 中加入辛醇,混合均匀。在培养基 A 中加入辛醇和 PMSF,即为培养基 B。4. 用吊桶式转头在 250 ml 的圆锥
四膜虫细胞核的分离实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 辛醇PMSF仪器、耗材 搅拌机光学显微镜实验步骤 1. 检测所用细胞数量。2. 收获细胞前在冷环境中强力搅拌时,在所有溶液中加入蛋白酶抑制剂。3. 在培养基 A 中加入辛醇,混合均匀。在培养基 A 中加入辛醇和 PMSF,即为培养基 B。4. 用吊桶式转头在 250 ml
四膜虫细胞核的分离实验
四膜虫细胞核的分离 实验材料 细胞 试剂、试剂盒
什么是等效粒径?
等效粒径是指当一个颗粒的某一物理特性与同质球形颗粒相同或相近时,我们就用该球形颗粒的直径来代表这个实际颗粒的直径。根据不同的测量方法,等效粒径可具体分为下列几种: 1) 等效体积径:即与所测颗粒具有相同体积的同质球形颗粒的直径。激光法所测粒径一般认为是等效体积径。
什么是等效粒径?
等效粒径的定义是:当一个颗粒的某一物理特性(如体积、重量、沉降速度等)与同质的球形颗粒相同或相近时,我们就用该球形颗粒的直径来代表这个非球形颗粒的直径。根据不同的粒度测试方法,等效粒径可具体分为下列几种:等效体积径:即与所测颗粒具有相同体积的同质球形颗粒的直径。激光法所测粒径就是等效体积径。等
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料 大鼠 试剂、试剂盒 裂解缓冲液 浓蔗糖溶液
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料大鼠试剂、试剂盒裂解缓冲液浓蔗糖溶液仪器、耗材超速离心机组织研磨器实验步骤1. 配制裂解缓冲液和浓蔗糖溶液(PMSF 在使用前添加),冰上放置。裂解缓冲液:0.25 mol/L 蔗糖网织红细胞标准缓冲液(RSB)0.25 mol/L 蔗糖(超级纯)10 mmol/ Tris-HCl (pH7
渗透溶胀法制备细胞核实验
实验材料HeLa 细胞试剂、试剂盒Earle’s 平衡盐溶液RSB仪器、耗材玻璃盖玻片实验步骤1. 悬浮培养出 HeLa 细胞,600 g 离心 5 分钟收集细胞。2. 沉淀细胞用 5 倍体积 4℃ 预冷的 Earle’s 平衡盐溶液重新悬浮。3. 重悬浮的细胞在 4℃,600 g 离心 5 分钟,
渗透溶胀法制备细胞核实验
用渗透溶胀法从HeLa细胞悬浮培养物中制备细胞核实验材料HeLa 细胞 试剂、试剂盒Earle’s 平衡盐溶液
渗透溶胀法制备细胞核实验
实验材料 HeLa 细胞试剂、试剂盒 Earle’s 平衡盐溶液RSB仪器、耗材 玻璃盖玻片实验步骤 1. 悬浮培养出 HeLa 细胞,600 g 离心 5 分钟收集细胞。2. 沉淀细胞用 5 倍体积 4℃ 预冷的 Earle’s 平衡盐溶液重新悬浮。3. 重悬浮的细胞在 4℃,600 g 离心 5
渗透溶胀法制备细胞核实验
实验材料 HeLa 细胞 试剂、试剂盒 Earle’s 平衡盐溶液 RSB
四膜虫的保存实验——四膜虫的冷冻
实验材料细胞试剂、试剂盒Tris仪器、耗材培养基实验步骤1. 在培养基中将细胞培养至对数生长中期。如需要,可使用抗生素和/或杀真菌剂。2. 在 pH 7.4 的 10 mmol/L Tris 中低速离心轻洗细胞 1 次,弃上清,低速离心重悬细胞,弃上清。3. 用 10 mmol/L Tris 重悬细
镍柱纯化后的蛋白,上下翻转混匀时易聚沉
镍柱纯化后纯度不错,但是很不稳定。为了防止蛋白浓缩前就沉在浓缩管中,我会在15ml管中预混合几管蛋白,如果小心操作,用移液枪吹吸混匀,最高可以浓缩到5mg/ml左右;如果上下翻转混匀,就会在管中迅速沉淀,伴有大量泡沫(絮状沉淀会挂在气泡上)而吹吸混合几乎不产生泡沫。
沉降法粒度测量原理
沉降法是通过测量颗粒在液体中的沉降速度来反映粉体粒度分布的一种方法。众所周知,在液体中大颗粒沉降速度快,小颗粒沉降速度慢。沉降速度(V)与等效粒径(D)的数量关系可以从下面的斯托克斯定律的数学表达式得到:式中ρs:样品密度ρf :沉降介质密度η:沉降介质粘度g:重力加速度 从斯托克斯定
沉降法粒度测量原理
沉降法是通过测量颗粒在液体中的沉降速度来反映粉体粒度分布的一种方法。众所周知,在液体中大颗粒沉降速度快,小颗粒沉降速度慢。沉降速度(V)与等效粒径(D)的数量关系可以从下面的斯托克斯定律的数学表达式得到:式中ρs:样品密度ρf :沉降介质密度η:沉降介质粘度g:重力加速度 从斯托克斯定律
四膜虫的保存实验—冷冻四膜虫的融解
实验材料细胞仪器、耗材培养基冷冻管实验步骤1. 将 25~50 ml 培养基预热至 30℃。2. 将冷冻管放入 38~40℃ 的热水浴中搅拌,快速温暖细胞,直接加入一些预热的培养基。3. 一旦沉淀层松动,将其倒入装有预热培养基的培养瓶中。4. 30℃ 过夜孵育,中速振摇。5. 次日检测细胞生存力。
四膜虫的保存实验——四膜虫的短期贮存
实验材料健康细胞试剂、试剂盒蛋白酶胨仪器、耗材培养试管实验步骤1. 将少许健康细胞无菌转入装有 5 ml 无菌的 0.1 mg/ml 蛋白酶胨的带旋帽的培养试管中。2. 将试管帽旋松,在室温下垂直保存细胞。
激光粒度仪中的等效粒径的定义
等效粒径的定义是:当一个颗粒的某一物理特性(如体积、重量、沉降速度等)与同质的球形颗粒相同或相近时,我们就用该球形颗粒的直径来代表这个非球形颗粒的直径。根据不同的粒度测试方法,等效粒径可具体分为下列几种: 等效体积径:即与所测颗粒具有相同体积的同质球形颗粒的直径。激光法所测
激光粒度仪中的等效粒径的定义
等效粒径的定义是:当一个颗粒的某一物理特性(如体积、重量、沉降速度等)与同质的球形颗粒相同或相近时,我们就用该球形颗粒的直径来代表这个非球形颗粒的直径。根据不同的粒度测试方法,等效粒径可具体分为下列几种: 等效体积径:即与所测颗粒具有相同体积的同质球形颗粒的直径。激光法所测粒径就是等效体积
活化剂裂解方法制备细胞核实验
实验材料 HeLa 细胞 试剂、试剂盒 TM-2 缓冲液 仪器、耗材
活化剂裂解方法制备细胞核实验
用活化剂裂解方法从悬浮培养的HeLa细胞中制备细胞核实验材料HeLa 细胞 试剂、试剂盒TM-2 缓冲液
活化剂裂解方法制备细胞核实验
实验材料 HeLa 细胞试剂、试剂盒 TM-2 缓冲液仪器、耗材 塑料离心瓶Corex 管实验步骤 1. 转瓶培养 4 升 HeLa 细胞,便细胞浓度达到 1.0x106 细胞/ml。2. 细胞在 1 L 的塑料离心瓶中,用 Sorvall 的 RC-3B 离心机,H-600A 转头,3000 r/
活化剂裂解方法制备细胞核实验
用活化剂裂解方法从悬浮培养的HeLa细胞中制备细胞核实验材料HeLa 细胞试剂、试剂盒TM-2 缓冲液仪器、耗材塑料离心瓶Corex 管实验步骤1. 转瓶培养 4 升 HeLa 细胞,便细胞浓度达到 1.0x106 细胞/ml。2. 细胞在 1 L 的塑料离心瓶中,用 Sorvall 的 RC-3B
细胞的纯化方法介绍(自然纯化和人工纯化)(二)
(1)上皮细胞与成纤维细胞的分离纯化: 两者在胰蛋白酶的作用下,由于成纤维细胞先脱壁,二上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁,特别是在原代细胞初次传代和早期传代中两种差别尤为明显,故可采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开,方法步骤如下。 采用常规消化传代方式将0.25%胰蛋白酶注入培养
细胞的纯化方法介绍(自然纯化和人工纯化)(一)
体外培养的细胞源于人或动物或胚胎组织,体内的细胞都是混杂生长,每一种组织都有血管和间叶组织,因此,来源于上述组织的培养材料的原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等,混杂的细胞会直接影响实验结果,而利用体外培养细胞进