DNA荧光染色的样品制备实验

试剂、试剂盒PBS仪器、耗材DNA荧光染料流式细胞仪实验步骤DNA是细胞内含量比较恒定的参量,随着细胞增殖周期的各时相而发生变化。荧光染料(如PI)可选择性地定量嵌入核酸(DNA/RNA)的双螺旋碱基之间,与细胞特异性结合,DNA含量与荧光染料的结合量成正比,因此通过测定荧光强度可获知细胞的增殖情况。1. 将固定过的细胞离心(500~1000rpm,5min)弃上清液,再用PBS洗涤2次。2. 用PBS调整细胞浓度,每份为1×106个细胞/100μl。3. 加入1000μl DNA 荧光染料(通常用Coulter公司提供的DNA染色试剂盒),室温下避光染色15 min。4. 上流式细胞仪检测。样品的制备可分析细胞周期各时相的百分比,同时可粗略观察有无凋亡细胞现象,如果用对照液(鸡红细胞)作参照标准,可进行细胞DNA倍体分析,通过DNA指数(DNA index,DI)衡量DNA的相对含量,DI可用下式计算:DI=样品G0/G1期的......阅读全文

DNA荧光染色的样品制备实验

试剂、试剂盒PBS仪器、耗材DNA荧光染料流式细胞仪实验步骤DNA是细胞内含量比较恒定的参量,随着细胞增殖周期的各时相而发生变化。荧光染料(如PI)可选择性地定量嵌入核酸(DNA/RNA)的双螺旋碱基之间,与细胞特异性结合,DNA含量与荧光染料的结合量成正比,因此通过测定荧光强度可获知细胞的增殖情况

DNA荧光染色的样品制备实验

            试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪 实验步骤

DNA荧光染色的样品制备实验

            试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪 实验步骤

DNA荧光染色的样品制备

试剂、试剂盒 PBS仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪实验步骤 DNA是细胞内含量比较恒定的参量,随着细胞增殖周期的各时相而发生变化。荧光染料(如PI)可选择性地定量嵌入核酸(DNA/RNA)的双螺旋碱基之间,与细胞特异性结合,DNA含量与荧光染料的结合量成正比,因此通过测定荧光强度可获知细胞的

微量全血直接荧光染色法流式细胞术样品制备实验

实验步骤目前制备全血细胞样品的方法很多,且很成熟,常用的方法是用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞,然后进行特异性荧光染色,其染色方法与前面介绍的方法相同。下面主要介绍与流式细胞仪配套的Q-PREP(免疫学样品处理器)进行快速制备微量全血样品的方法。1. 取肝素或EDTA抗凝全血(100μl/份),置12×

微量全血直接荧光染色法流式细胞术样品制备实验

目前制备全血细胞样品的方法很多,且很成熟,常用的方法是用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞,然后进行特异性荧光染色,其染色方法与前面介绍的方法相同。下面主要介绍与流式细胞仪配套的Q-PREP(免疫学样品处理器)进行快速制备微量全血样品的方法。1. 取肝素或ED

微量全血直接荧光染色法流式细胞术样品制备实验

实验步骤 目前制备全血细胞样品的方法很多,且很成熟,常用的方法是用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞,然后进行特异性荧光染色,其染色方法与前面介绍的方法相同。下面主要介绍与流式细胞仪配套的Q-PREP(免疫学样品处理器)进行快速制备微量全血样品的方法。1

病毒免疫荧光实验_病毒染色标本的制备

实验材料待检测病毒试剂、试剂盒丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯仪器、耗材玻片实验步骤1. 培养细胞小玻片标本的制备 根据所检测病毒种类,选择敏感细胞进行培养,如乙型肝炎病毒用乳地鼠肾细胞 (BHK21 细胞)培养,森林脑炎病毒用绿猴肾细胞 (Vero 细胞)培养,登革热病毒用白纹伊蚊

DNA测序电泳的样品制备

  当在预电泳时,即可进行样品的制备,将反应完毕的样品在沸水浴中加热1~3分钟,立即置于冰上即可。如果样品长时间不用,则应重新处理。可使用4~6%聚丙烯酰胺凝胶,胶厚0.4 mm。厚度小于0.4 mm的胶可能导致信号太弱。加样时不必吸去上层覆盖的矿物油,但要小心地吸取矿物油下的蓝色样品。

LSCM荧光样品的制备要求

荧光样品的制备要求荧光标记反应的特异性强、荧光定位准确保持样品应有的结构形态完整性荧光信号的响应准确、灵敏、具有可重复性荧光强度适宜荧光稳定性好样品的荧光分布均匀两种及两种以上的荧光信号之间荧光光谱交叉可以消除图象背景干净、干扰杂质少

核酸染色实验——DNA

核酸是细胞内的一种大分子化合物,核酸不仅存在于细胞核内,也存在于细胞质中,动物、植物和微生物等都含有核酸。核酸可分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)。经过染料和化学试剂,能够清楚地显示 DNA 和核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)物质。实验方法原理在一般情况下,通过盐酸水解后使 DNA 残基

X射线荧光分析液体样品的制备

  液体样品可直接放在液体样品杯中进行直接测定,所用液体体积尽可能达到无限厚,体积应保持恒定。样品杯由不锈钢、聚四氟乙烯等材料制成,并用厚度为几个微米的聚酯、聚乙烯、聚丙烯等薄膜作为支撑保护。  液体样品也可以经富集,再将其转移到滤纸片、 Mylar膜或聚四氟乙烯基片上,经物理浓缩,使分析物成固体残

SYPRO-Orange-荧光染色实验

实验材料单向凝胶电泳分离后的蛋白样品仪器、耗材铝箔荧光扫描仪塑料容器实验步骤1.电泳结束后,将凝胶置于盛有试剂 A 的塑料容器中,试剂 A 的量要足够覆盖整块凝股。例如,一’块典型的 mini 胶(8 cmXIOcm 或 8 cmX8 cm) 需用 50~IOOml 的试剂 A。2.用铝箔遮盖好容器

SYPRO-Ruby-荧光染色实验

实验方法原理到目前为止,在常用来检测经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后的蛋白质的方法中,SYPRORUBY 可能是最灵敏的突光染色方法了,它能检测出仅含 1?2ng 蛋白的条带。遗憾的是,如此微量的蛋白条带经染色后用肉眼却不可见,需要一个荧光扫描仪检测(SYPRORuby 的最大激发光和发射光的波长分别是

质粒DNA的大量制备实验

实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制备也简单易行,但得到的DNA比较粗制。高纯度的质粒DNA可通过氯化铯/溴化乙锭平衡离心法或层析法进一步纯化粗制DNA得到。实验材料 培养基菌株试剂、试剂盒 EDTASDS乙醇乙酸钾异丙醇仪器、耗材 离心管实验

质粒DNA的小量制备实验

实验方法原理 碱裂解法是最常用的小量制备质粒DNA的方法。实验材料 培养基试剂、试剂盒 EDTASDS乙醇VTE仪器、耗材 平板实验步骤 1.  接种一个单菌落于5 ml无菌LB培养液中,在37°C培养至饱和状态(过夜)。2.  取1.5 ml培养液以最大转速离心20 S。弃上清。3.  沉淀用10

质粒DNA的大量制备实验

碱裂解法 氯化铯/溴化乙锭平衡离心法 层析法             实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制

DNA-亲和介质的制备实验

DNA 亲和介质的制备实验             试剂、试剂盒 ATP [y-32P]ATP T4多核苷酸激酶

DNA-亲和介质的制备实验

试剂、试剂盒ATP[y-32P]ATPT4多核苷酸激酶乙酸铵乙醇酚 氯仿氯仿 异戊醇NaOAcT4 DNA连接酶酚异丙醇重蒸水Sepharose CL-2B溴化氰NN-二甲基甲酰胺NaOH磷酸钾KClCNBr-活化的Sepharose*.4BHClT4 多核苷酸激酶缓冲液TE接头-激酶缓冲液乙醇胺-

质粒DNA的小量制备实验——

实验采用国产的质粒小量抽提试剂盒。它是一种新型的离子交换柱,在特定的条件下,使质粒能在离心过柱的瞬间,结合到质粒纯化柱上,在一定条件下又能将质粒充分洗脱,从而实现质粒的快速纯化。实验材料DNA试剂、试剂盒LB培养基卵清溶菌酶异丙醇TE仪器、耗材离心机漩涡混合器水浴锅实验步骤一、实验步骤1.  接种一

质粒DNA的小量制备实验

实验方法原理 当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。碱裂解法是最常用的小量制备质粒DNA的方法。实验材料 细菌克隆试剂、试剂盒 LB培养基抗生素葡

质粒DNA的小量制备实验

碱裂解小量制备法 煮沸法             实验材料 DNA 试剂、试剂盒

流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验

实验方法原理取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。实验材料实验样品试剂、试剂盒抗体、PBS溶液仪器、耗材移液器移液吸头离心机实验步骤一、不同来源样品的处理1 . 培养细

流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验

            实验方法原理 取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实

流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验

            实验方法原理 取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实

DNA荧光组织化学染色的方法

一步双染色法先将两种荧光标{己抗体按适当比例混合(A+B),按直接法进行染色。二步双染色法先用TRITC标记的A抗体进行免疫荧光染色,再用FITC标记的B抗体染色,根据两种抗体的动物种属不同,可用直接法也可用间接法,结果A抗原呈现橘红色荧光,而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中,常用的方法是免疫荧光组织

X射线荧光分析固体样品的制备介绍

  固体样品包括粉末样品、固体金属和非金属样品、固体块状样品。对于固体样品,可以采取将其制成溶液后按液体样品方式测定的方法,也可以直接以固体形态进行测定。而对于金属样品一般直接取样分析。  粉末样品制样方式比较多,通常采取压片法和熔融法。两者各有优缺点,压片法操作简便快捷但是干扰严重,测量精密度和准

质粒DNA大量制备实验

实验方法原理 这一方案科能是最常用的质粒制备方法,该法不仅相当决捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 葡萄糖TrisEDTATENaOHSDS异丙醇乙醇乙酸甲仪器、耗材 离心机漩涡混合器水浴锅实验步骤 1.  往2 ml 烧瓶中加入500 ml ,含有适当抗生素的L

质粒DNA大量制备实验

碱裂解法 平衡离心法             实验方法原理 这一方案科能是最常用的质粒制备方法,该法不仅相当决捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。

X荧光样品制备中化学富集技术

化学富集法有沉淀-共沉淀法、电沉积法、离子交换、液一液萃取法、鳌合一固定法和色层法等。 1)沉淀法螯合物沉淀法(DDTC法)是使溶液中的各金属阳离子与螯合物试剂反应后沉淀过滤,鳌合物沉淀剂常用的有DDTC(铜试剂)、PAN(1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚),8-羟基喹啉,其特点是均可与近20种元素产