转运反应成分的制备实验——制备藻胆色素蛋白标志物

试剂、试剂盒APC 悬浮液HEPESNaClSMCC仪器、耗材微量离心管Sephadex G50 脱盐柱实验步骤1. 在一微量离心管中,4℃,10000 g 离心 APC 悬浮液 5~10 分钟,吸走上清。2. 用 0.1 mol/L HEPES(pH 7.4),0.1 mol/L NaCl 重悬浮沉淀至浓度为 5 mg/ml。用这种缓冲液透析几次去除残留的硫酸铵。3. 临用前用透析液溶解硫代 SMCC,浓度为 10 mg/ml。4. 按 0.1 mg 硫代-SMCC/1 mg APC 的比例将硫代-SMCC 加到蛋白质中,冰上孵育 45 分钟。5. 将修饰后的 APC 过一 5 ml 的 Sephadex G50 脱盐柱,柱子预先用 0.1 mol/L HEPES,(pH 7.4),0.1 mol/L NaCl 和 1 mmol/L EDTA 平衡。6. 通过真空透析或用一离心浓缩装置将 APC 浓缩为 5 mg/ml。7. ......阅读全文

质粒DNA的小量制备实验

实验方法原理 当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。碱裂解法是最常用的小量制备质粒DNA的方法。实验材料 细菌克隆试剂、试剂盒 LB培养基抗生素葡

质粒DNA的小量制备实验

碱裂解小量制备法 煮沸法             实验材料 DNA 试剂、试剂盒

DNA-亲和介质的制备实验

DNA 亲和介质的制备实验             试剂、试剂盒 ATP [y-32P]ATP T4多核苷酸激酶

颗粒剂的制备实验

            实验材料 大清叶 板蓝根 连翘 拳参 试剂、试剂盒 纯化水 乙

质粒DNA的大量制备实验

碱裂解法 氯化铯/溴化乙锭平衡离心法 层析法             实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制

亲和柱的制备实验

实验方法原理 溴化氰活化的琼脂糖凝胶用于配体固相化是实验室最常用的固相化技术之一。其原理是溴化氰活化的介质与配体主要的氮基反应形成异脲键。但是这样偶联的亲和柱多次重复使用时,将会有少量配体脱落,所以反复使用的亲和柱应考虑选择其他活化的介质。异脲键的形成伴有荷电基团的增加,将会影响离子交换作用。为了克

散剂的制备实验——示例法

散剂系指药物或与适宜辅料经粉碎、均匀混合而制成的干燥粉末状制剂,供内服或局部用。内服散剂一般溶于或分散于水或其他液体中服用,亦可直接用水送服。局部用散剂可供皮肤、口腔、咽喉、腔道等处应用;专供治疗、预防和润滑皮肤为目的的散剂亦可称撒布剂或撒粉。实验材料碳酸氢钠氧化镁试剂、试剂盒硫酸氢钠仪器、耗材研钵

亲和柱的制备实验

配基固相化技术             实验方法原理 溴化氰活化的琼脂糖凝胶用于配体固相化是实验室最常用的固相化技术之一。其原理是溴化氰活化的介质与配体主要的氮基反应形成异脲键。但是

实验技术:组织切片的制备

【目的】组织标本必须首先被制成组织切片,再经过染色处理,然后才能在显微镜下进行临床诊断和科学研究。【原理】苏木素染色结合伊红染色是常规组织学染色技术,也称为H & E染色。苏木素是碱性染色,细胞核被染成深紫或兰色,常用作核染色;伊红是酸性染色,细胞浆染呈红色,常用作胞浆染色。【材料】1.试剂和溶液(

免疫血清的制备实验

免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。(来源:医学基础免疫学实验指导,主编金伯泉李恩善,第1 版,北京:世界图书出版社,1990)  实验方法原理具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化

质粒DNA的小量制备实验——

实验采用国产的质粒小量抽提试剂盒。它是一种新型的离子交换柱,在特定的条件下,使质粒能在离心过柱的瞬间,结合到质粒纯化柱上,在一定条件下又能将质粒充分洗脱,从而实现质粒的快速纯化。实验材料DNA试剂、试剂盒LB培养基卵清溶菌酶异丙醇TE仪器、耗材离心机漩涡混合器水浴锅实验步骤一、实验步骤1.  接种一

酒剂、酊剂的制备实验

实验材料 谷类酒试剂、试剂盒 当归黄芪蜜炙牛膝防风白酒黄酒蔗糖仪器、耗材 天平烧杯玻璃棒实验步骤 1.  将当归,黄芪(蜜炙),牛膝,防风4味,粉碎或粗粉。2.  按渗漉法,用白酒2400 ml与黄酒8000 ml的混合液作溶剂,浸渍48小时后,缓缓渗漉。3.  在渗漉液中加入蔗糖840 g搅拌溶解

质粒DNA的大量制备实验

实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制备也简单易行,但得到的DNA比较粗制。高纯度的质粒DNA可通过氯化铯/溴化乙锭平衡离心法或层析法进一步纯化粗制DNA得到。实验材料 培养基菌株试剂、试剂盒 EDTASDS乙醇乙酸钾异丙醇仪器、耗材 离心管实验

正丁醚的制备实验

实验步骤在50 mL两颈瓶中加入5.2 mL 正丁醇, 0.8 mL 浓硫酸,两粒沸石,摇动混合均匀,安好装置。分水器内加水至支管后放去0.5 mL水即分水器内有( V-0.5 ) mL水。开始小火加热,保持瓶内液体微沸,开始回流,温度控制在134~135 ℃,待分水器已全部被水充满时表示反应已基本

抗肽抗体的制备实验

提高免疫原性肽的抗血清,是最简单的方法,获得非隔离的蛋白质的抗体,例如,对来自DNA序列信息的推定蛋白质序列。 这种方法也是有用的,当隔离的抗原是困难或费时,或当抗原是一个大的蛋白家族的成员。实验步骤:  将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠

DNA-亲和介质的制备实验

试剂、试剂盒ATP[y-32P]ATPT4多核苷酸激酶乙酸铵乙醇酚 氯仿氯仿 异戊醇NaOAcT4 DNA连接酶酚异丙醇重蒸水Sepharose CL-2B溴化氰NN-二甲基甲酰胺NaOH磷酸钾KClCNBr-活化的Sepharose*.4BHClT4 多核苷酸激酶缓冲液TE接头-激酶缓冲液乙醇胺-

培养基的制备记录及成分提取

  培养基的制备记录  每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源.和各种成份的牌号。最终pH值、消毒的温度和时间制各的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。  培养基成分的称取  培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱.最好

不均一核糖核蛋白复合物的制备实验

            实验方法原理 在核内,RNA 聚合酶 Ⅱ 的转录产物同大量不同类型的核前体 mRNA/mRNA 结合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP)  结合形成 hnRNP 复

不均一核糖核蛋白复合物的制备实验

在核内,RNA 聚合酶 Ⅱ 的转录产物同大量不同类型的核前体 mRNA/mRNA 结合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP)  结合形成 hnRNP 复合物。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理在核内

不均一核糖核蛋白复合物的制备实验

实验方法原理 在核内,RNA 聚合酶 Ⅱ 的转录产物同大量不同类型的核前体 mRNA/mRNA 结合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP)  结合形成 hnRNP 复合物。实验材料 HeLa S3 细胞抗体试剂、试剂盒 免疫

关于WB实验中蛋白样品制备的常见问题分析

 WB实验又称免疫印迹实验,是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术,具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。    对于一直都在做蛋白研究的你,在样品制备

弹性蛋白酶的制备方法

一般由动物的胰脏用水提取而得,也可用细菌的培养液在低温下用水提取而得。包装和贮藏:密封包装后贮于阴冷处。

融合蛋白的制备具体步骤

1、进行目的基因的克隆:根据基因序列互补原则,设计合适的引物序列,以cDNA为模板,利用PCR技术扩增不同的目的DNA片段。2、在载体中进行重组:通过限制内切酶将两个DNA片段进行酶切并回收,然后通过连接酶将两个具有相同末端酶切位点的基因片段进行体外连接,并克隆到高表达质粒载体中,构建重组质粒。3、

肌肉收缩蛋白质的制备

  肌球蛋白分子能够尾部对尾部地聚集,然后平行排列成肌原纤维的粗丝,分子的头部伸出粗丝的表面,形成与细丝联结的“横桥”。在横纹肌的肌原纤维中两个肌球蛋白分子头部间的距离是14.3纳米,而头部在粗丝上分布的周期是42.9纳米。这是粗丝面向同一方向的两个头部之间的间距。  平滑肌的肌球蛋白其大小和形状和

关于酪蛋白的制备方法介绍

  (1)新鲜牛奶脱脂,加酸(乳酸、乙酸、盐酸或硫酸),将pH调至4.8,使干酪素微胶粒失去电荷而凝固沉淀。用这种方法得到的干酪素称为酸酪蛋白,加酸的种类不同得到的酸酪蛋白却几乎毫无区别。酸酪蛋白是白色至淡黄色粉末或颗粒,稍有奶臭和酸味。在水中只是溶胀,若加入氨、碱及其盐时,则可分散溶解于水中。可溶

关于酪蛋白的制备方法介绍

  (1)新鲜牛奶脱脂,加酸(乳酸、乙酸、盐酸或硫酸),将pH调至4.8,使干酪素微胶粒失去电荷而凝固沉淀。用这种方法得到的干酪素称为酸酪蛋白,加酸的种类不同得到的酸酪蛋白却几乎毫无区别。酸酪蛋白是白色至淡黄色粉末或颗粒,稍有奶臭和酸味。在水中只是溶胀,若加入氨、碱及其盐时,则可分散溶解于水中。可溶

三种不同蛋白的制备

  小麦粉的主要化学成分为蛋白质、碳水化合物、脂肪、水分、灰分、酶及少量的矿物质和维生素等。蛋白质的含量和质量决定小麦粉的加工品质和面条的蒸煮品质,可以作为预测评价面条品质的重要指标。面条的品质主要与小麦籽粒品质、面粉中蛋白质和面筋的量与质、淀粉的特性,色素含量、酶活性、脂类组成等有关。因此,测定面

关于菜豆蛋白的制备方法介绍

  1、从白芸豆中提取菜豆素;  2、用曲霉(Aspergillus sojae)为诱导剂,诱导红芸豆产生菜豆素;  3、从刺桐(Erythrina addisoniae)中分离得到;  4、采用功能性寡糖(例如壳寡糖、果胶寡糖、纤维二糖、褐藻酸寡糖等)作为诱导剂,激发芸豆生成菜豆素。

转基因小鼠制备实验

1、 选取7~8周龄雌性小鼠,阴道口封闭,作为供体,下午3:00左右,每只小鼠腹腔注射PMSG(10 IU)。 2、 47~48小时后,每只小鼠腹腔注射HCG(0.8 IU),并与正常公鼠合笼;另取数只适龄母鼠(2月龄以上)作为受体,阴道口潮红,与结扎公鼠合笼。 3、第二天上午9:00前观察供体、受

营养琼脂平板制备实验

实验方法原理用于纯化菌种,保存菌种。实验步骤成分:蛋白胨:                  10 g牛肉膏:                  5 g氯化钠:                  5 g琼脂:                    20 g蒸馏水: