转运反应成分的制备实验——制备藻胆色素蛋白标志物
试剂、试剂盒APC 悬浮液HEPESNaClSMCC仪器、耗材微量离心管Sephadex G50 脱盐柱实验步骤1. 在一微量离心管中,4℃,10000 g 离心 APC 悬浮液 5~10 分钟,吸走上清。2. 用 0.1 mol/L HEPES(pH 7.4),0.1 mol/L NaCl 重悬浮沉淀至浓度为 5 mg/ml。用这种缓冲液透析几次去除残留的硫酸铵。3. 临用前用透析液溶解硫代 SMCC,浓度为 10 mg/ml。4. 按 0.1 mg 硫代-SMCC/1 mg APC 的比例将硫代-SMCC 加到蛋白质中,冰上孵育 45 分钟。5. 将修饰后的 APC 过一 5 ml 的 Sephadex G50 脱盐柱,柱子预先用 0.1 mol/L HEPES,(pH 7.4),0.1 mol/L NaCl 和 1 mmol/L EDTA 平衡。6. 通过真空透析或用一离心浓缩装置将 APC 浓缩为 5 mg/ml。7. ......阅读全文
转运反应成分的制备实验——制备藻胆色素蛋白标志物
试剂、试剂盒APC 悬浮液HEPESNaClSMCC仪器、耗材微量离心管Sephadex G50 脱盐柱实验步骤1. 在一微量离心管中,4℃,10000 g 离心 APC 悬浮液 5~10 分钟,吸走上清。2. 用 0.1 mol/L HEPES(pH 7.4),0.1 mol/L NaCl 重悬浮
转运反应成分的制备实验——转运反应
试剂、试剂盒磷酸肌酸肌酸磷酸激酶ATPGTP仪器、耗材微量离心管实验步骤1. 将反应混合物加入一在冰上放置的微量离心管中。能量重建系统成分如下:5 mmol/L 磷酸肌酸20 单位/ml 肌酸磷酸激酶0.5 mmol/L ATP0.5 mmol/L GTP2. 滴一滴孵育混合物到一片位于带盖子的湿盒
转运反应成分的制备实验
制备藻胆色素蛋白标志物 胞质液的制备 细胞通透化 转运反应 试剂、试剂盒 APC 悬浮液
转运反应成分的制备实验
试剂、试剂盒 APC 悬浮液HEPESNaClSMCC仪器、耗材 微量离心管Sephadex G50 脱盐柱实验步骤 1. 在一微量离心管中,4℃,10000 g 离心 APC 悬浮液 5~10 分钟,吸走上清。2. 用 0.1 mol/L HEPES(pH 7.4),0.1 mol/L NaCl
转运反应成分的制备实验
制备藻胆色素蛋白标志物胞质液的制备细胞通透化转运反应试剂、试剂盒APC 悬浮液 HEPES
转运反应成分的制备实验——胞质液的制备
实验材料血试剂、试剂盒酸-柠檬酸盐-葡萄糖溶液裂解缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、网状细胞和红细胞胞质液的制备1. 自动物身上采血,每 7 ml 血加 1 ml 酸-柠檬酸盐-葡萄糖溶液(ACD;75 mmol/L 柠檬酸三钠,38 mmol/L 柠檬酸,136 mmol/L 葡萄糖,pH 5.0
转运反应成分的制备实验——细胞通透化
实验材料细胞试剂、试剂盒毛地黄皂苷转运缓冲液实验步骤1. 制备用于同透化的细胞(1) 对于在盖玻片上生长的细胞① 将在标准条件下培养的细胞或从组织采集的原代细胞铺在置于 6 孔培养板中的 18x18 mmol/L 的盖玻片上,生长过夜。② 实验前 2~4 小时,换新培养液,重新放回培养箱中。③ 吸出
酪蛋白的制备实验
等电点沉淀法 实验方法原理 牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物,等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理,将牛
岩藻多糖的制备方法
岩藻多糖是一种水溶性的多糖,多采用水提法、酸提法或CaCl2法从褐藻或海带中提取出来;新近报道的提取方法还有超声波提取法和超滤膜提取法等。水提法主要是利用岩藻多糖易溶于热水、不溶于乙醇等有机溶剂的特点,得到岩藻多糖粗品,Wang等将100g的叶剪切后,放到3500mL、120℃的沸水中蒸煮3h,提取
概述岩藻多糖的制备
岩藻多糖是一种水溶性的多糖,多采用水提法、酸提法或CaCl2法从褐藻或海带中提取出来;新近报道的提取方法还有超声波提取法和超滤膜提取法等。水提法主要是利用岩藻多糖易溶于热水、不溶于乙醇等有机溶剂的特点,得到岩藻多糖粗品,Wang等将100g的叶剪切后,放到3500mL、120℃的沸水中蒸煮3h,
制备肌动蛋白实验
实验材料 肌球蛋白试剂、试剂盒 肌球蛋白抽提溶液仪器、耗材 离心机实验步骤 1. 抽提肌球蛋白时得到的沉淀物用 3 倍于沉淀物体积的肌球蛋白抽提溶液抽提 10 分钟。肌球蛋白抽提溶液:0.5 mol/L KCl0.1 mol/L K2HPO42. 抽提物离心(GSA 转头,13000 r/min,1
制备肌动蛋白实验
从肌肉制备丙酮粉用于纯化肌动蛋白 由骨骼肌丙酮粉制备肌动蛋白 将肌动蛋白纯化成纯品 实验材料 肌球蛋白
无蛋白血滤液制备实验
无蛋白血滤液制备实验可以用于:(1)蛋白质沉淀剂沉淀蛋白;(2)用过滤法或离心法除去沉淀的蛋白。实验方法原理钨酸法实验原理:钨酸钠与硫酸混合,生成钨酸,钨酸可以与血液中蛋白质结合生成蛋白质盐沉淀,经离心将蛋白质除掉。三氯醋酸法实验原理:血液中蛋白质能与三氧醋酸作用于生成不溶性的蛋白质盐沉淀,经离心将
无蛋白血滤液制备实验
实验方法原理 钨酸法实验原理:钨酸钠与硫酸混合,生成钨酸,钨酸可以与血液中蛋白质结合生成蛋白质盐沉淀,经离心将蛋白质除掉。三氯醋酸法实验原理:血液中蛋白质能与三氧醋酸作用于生成不溶性的蛋白质盐沉淀,经离心将蛋白质除去,上清液为无蛋白血滤液.实验步骤 一、钨酸法实验试剂:1. 100g/L钨酸钠溶液:
制备肌动蛋白实验——由骨骼肌丙酮粉制备肌动蛋白
实验材料骨骼肌丙酮粉试剂、试剂盒肌动蛋白解聚缓冲液仪器、耗材超速离心机实验步骤1. 准备贮存液和材料0.1 mol/L K+ATP,pH 7.00.1 mol/L DTT(冻存在 -20℃,避免反复冻融)0.1 mol/L CaCl20.1 mol/L Tris-HCl,pH 8.0肌动蛋白解聚缓冲
制备肌动蛋白实验——从肌肉制备丙酮粉用于纯化肌动蛋白
实验材料肌球蛋白试剂、试剂盒肌球蛋白抽提溶液仪器、耗材离心机实验步骤1. 抽提肌球蛋白时得到的沉淀物用 3 倍于沉淀物体积的肌球蛋白抽提溶液抽提 10 分钟。肌球蛋白抽提溶液:0.5 mol/L KCl0.1 mol/L K2HPO42. 抽提物离心(GSA 转头,13000 r/min,17310
制备和纯化-mRNA-显示蛋白实验
实验材料DNA 库不含甲硫氨酸的翻译混合物试剂、试剂盒MgCl2核苷三磷酸溶液转录缓冲液去离子超滤水T7 RNA 聚合酶固体 EDTA尿素缓冲液NaCl乙醇EDTAATPT4 多核苷酸激酶缓冲液T4 多核苷酸激酶T4 DNA 连接酶缓冲液T4 DNA 连接酶乙酸钾溶液兔网织红细胞裂解物翻译试剂盒氯化
制备和纯化-mRNA-显示蛋白实验
实验方法原理 实验材料 DNA 库不含甲硫氨酸的翻译混合物试剂、试剂盒 MgCl2核苷三磷酸溶液转录缓冲液去离子超滤水T7 RNA 聚合酶固体 EDTA尿素缓冲液NaCl乙醇EDTAATPT4 多核苷酸激酶缓冲液T4 多核苷酸激酶T4 DNA 连接酶缓冲液T4 DNA 连接酶乙酸钾溶液兔网织
制备和纯化-mRNA-显示蛋白实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 DNA 库 不含甲硫氨酸的翻译混合物
低分子质量岩藻多糖的制备方法
岩藻多糖分子质量大、溶解性差,不容易被吸收,严重限制了其应用,但经过部分水解转化成低分子质量岩藻多糖(LMWF)后,溶液的黏度会降低,溶解性增加,生理功能变得多样。常用于岩藻多糖降解的方法包括化学法和酶法。化学降解法是指将岩藻多糖配制成水溶液,加入硫酸、三氟乙酸、盐酸等氧化剂后加热降解得到低分子质量
简述低分子质量岩藻多糖的制备
岩藻多糖分子质量大、溶解性差,不容易被吸收,严重限制了其应用,但经过部分水解转化成低分子质量岩藻多糖(LMWF)后,溶液的黏度会降低,溶解性增加,生理功能变得多样。常用于岩藻多糖降解的方法包括化学法和酶法。化学降解法是指将岩藻多糖配制成水溶液,加入硫酸、三氟乙酸、盐酸等氧化剂后加热降解得到低分子
关于胆色素的生成与转运的介绍
体内铁卟啉化合物包括血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素、过氧化物酶等。正常人每天可生成250~350mg胆色素,其中80%以上来自衰老红细胞在肝、脾、骨髓的单核-吞噬细胞系统破坏释放出血红蛋白。单核-吞噬细胞系统细胞微粒体含有非常活跃的血红素加氧酶,在氧分子和NADPH存在下,血红素加氧酶将血红素转化
酪蛋白的制备
实验方法原理 牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物,等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的pH调到4.7时,酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物,除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。实验材料 牛乳试剂、试剂盒 乙醇 无水乙醚 醋酸 醋酸钠 乙醇
桥粒的制备实验
从牛舌或牛口鼻部分离桥粒分级分离桥粒实验材料牛口鼻部或舌头 试剂、试剂盒柠檬酸缓冲液
桥粒的制备实验
从牛舌或牛口鼻部分离桥粒 分级分离桥粒 实验材料 牛口鼻部或舌头
散剂的制备实验
示例法 实验材料 碳酸氢钠 氧化镁 试剂、试剂盒
血清制备实验
抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。实验材料血仪器、耗材低温离心机4℃冰箱试管–80℃低温储藏箱实验步骤1. 取血后,37℃下,让血液凝固1 到2 小时(不加抗凝剂);2. 4℃冰箱过夜(让
血清制备实验
血清制备实验 实验材料 血 仪器、耗材
制备克隆实验
试剂、试剂盒 ATP -巯基乙醇 IPTG X-gal 平末端限制酶 连接缓冲液 T4DNA 连接酶 平末
血清制备实验
实验材料 血仪器、耗材 低温离心机4℃冰箱试管–80℃低温储藏箱实验步骤 1. 取血后,37℃下,让血液凝固1 到2 小时(不加抗凝剂);2. 4℃冰箱过夜(让血块固缩);3. 当血清自然析出后, 4℃,3000 转/分,离心10 分钟,分离血清,弃去不溶物;4. 将血清移至一干净试管,并分装成小份