昆虫细胞的保存培养实验
实验材料草地夜蛾（Sf 9）细胞试剂、试剂盒70％乙醇0.4％(m V)台盼蓝仪器、耗材无血清昆虫细胞培养基60 mm 培养皿或 25 cm2 培养瓶 27℃ 培养箱旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台离心机带螺口盖的冻存管液氮罐实验步骤1. 将 3 ml 含 10％ 胎牛血清的昆虫细胞培养基 TNM-FH 加入到一个 60 mm 组织培养皿或 25 cm2 培养瓶中。2. 取出一支冻存 Sf 9 细胞的安瓿，迅速置于 37℃ 水浴，用手前后摇动融化。当安瓿的内容物几乎完全融化时，将安瓿浸入 70％ 乙醇，消毒外壁。3. 打碎安瓿颈部，将内容物转移至步骤 1 的 60 组织培养皿或 25 cm2 培养瓶。用手轻轻摇动，使细胞分散均匀，置 27℃ 温育 2～3 h 直到细胞贴壁。4. 除去旧培养液，换 3 ml 新鲜培养液 TNM-FH/10％FBS，继续温育。每 3 天换液一次（除去旧培养液换新鲜的），直到细胞生长汇......阅读全文
简介流式细胞术实验样本的保存
样本的保存：理想状态下，样本应在采集后立刻进行处理和染色。肝素抗凝的血和骨髓通常可保存至48-72小时/室温（16-25）；EDTA抗凝的外周血和骨髓可保存12-24小时/室温（16-25）；ACD抗凝的外周血可保存至72小时/室温（16-25）；对于只作胞内染色的样本，可固定细胞以长期保存。但
细胞培养实验
实验方法原理 实验材料 冻存细胞试剂、试剂盒 70% 乙醇PBS胰酶／EDTA仪器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤 1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒，打开安瓿，用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料 冻存细胞
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料 冻存细胞
上皮细胞类培养实验_内皮细胞培养实验
实验方法原理内皮细胞易于从血管分离进行培养成单层细胞，对研究内皮细胞再生生、肿瘤促血管生长因子（TAF）等有很大应用价值。人内皮细胞培养可应用人脐带脐静脉、动物大动脉等，用灌流消化法获取细胞最为简便。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液PBS仪器、耗材注射器离心管培养基实验步骤1. 取产后的新鲜脐
细胞培养实验——贴壁细胞培养
实验材料冻存细胞试剂、试剂盒70% 乙醇PBS胰酶／EDTA仪器、耗材25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒，打开安瓿，用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起始培养基的 25 cm
方案27.7－昆虫细胞的扩增
实验方法原理 用机械法从细胞单层分离细胞，在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。 实验材料 Sf9细胞 二甲基亚砜
培养基的保存方法
第一：培养基灭菌后应立即取出，不得储藏在高压 菌器中，避免影响质量。制备好的应保存在2～25℃、避光的环境。第二：商品化培养基应根据使用说明书上的要求进行储存。标签上应标有批号，生产日期、有效期及有关特性。所采用的保藏和运输条件应使培养基限度失去水分并提供机械保护。第三：保存于密闭容器中，可防止水
病毒的保存实验——冷冻干燥保存
病毒是具有生物活性的最小微生物，由于其结构复杂，各种类型的病毒对物理、化学作用的反应有所不同（温度、 pH 、盐类等）。保存病毒首先必须了解各种病毒的性质，才能恰当的选择保存剂和保护方法。来源：《病毒学检验》实验方法原理含水物质首先经过冷冻，然后在真空中使水分升华，干燥，在这种低温、干燥和缺氧环境下
病毒的保存实验
实验方法原理 含水物质首先经过冷冻，然后在真空中使水分升华，干燥，在这种低温、干燥和缺氧环境下，微生物的生长和代谢暂时停止，因而保存期较长，便于运输。该法需要冻干机等设备，并需保护剂。保护剂一般采用脱脂牛奶或血清等。保护剂的作用机理是在冷冻干燥的脱水过程中稳定病毒结构，防止细胞膜受冷冻或干燥而造成损
盘基网柄菌培养物发育和储存实验_细胞和孢子长期保存
实验材料细胞悬液试剂、试剂盒DMSO仪器、耗材HL5 培养基Eppendorf 管或冻存管实验步骤一、冻存细胞1. 用新鲜的 HL5 培养基收获细胞，使其密度为 2X106 到 4X106，将等分为 1 ml 的细胞悬液加入到 1.5 ml 的 Eppendorf 管或冻存管中，置于冰上。2. 加入
细胞的冷冻保存
1. 注意事项：1.1. 欲冷冻保存之细胞应在生长良好(log phase) 且存活率高之状态，约为80 – 90 ％致密度。1.2. 冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质，例如hybridoma 应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。不宜将冻存细胞放置在0℃～-60℃这一温度范围内过久，低温损
细胞的原代培养实验
实验方法原理 细胞培养(Cell culture)是模拟机体内生理条件，将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。近年来，广泛地应用于分子生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学、细胞工程等领域，发展成一种重要生物技术，并取得显著成就
细胞的原代培养实验
原代培养 实验方法原理 原代培养是直接从生物体获取细胞进行培养，由于细胞刚刚从活体组织分离出来，故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生
乳腺干细胞的培养实验
实验方法原理 实验材料 组织标本试剂、试剂盒 无菌DMEM F12 50:50 加人1.2 mg ml重碳酸盐CMD3培养基胶原酶 900 IU mlVitrogen解剖刀培养瓶 25cm2Vitrogen包被 8μg cm2仪器、耗材 摇床离心管实验步骤 (a)手术后，立即将组织标本转移至DMEM
乳腺干细胞的培养实验
实验材料组织标本试剂、试剂盒无菌DMEM F12 50:50 加人1.2 mg ml重碳酸盐CMD3培养基胶原酶 900 IU mlVitrogen解剖刀培养瓶 25cm2Vitrogen包被 8μg cm2仪器、耗材摇床离心管实验步骤(a)手术后，立即将组织标本转移至DMEM/F12(1:1)。(
乳腺干细胞的培养实验
乳房缩小整形术组织标本中上皮细胞的制备IrECM三维培养乳腺干细胞实验方法原理实验材料组织标本试剂、试剂盒无菌DMEM F12 50:50 加人1.2 mg ml重碳酸盐 CMD3培养基 胶原酶 900 IU ml Vitrogen 解剖刀 培养瓶 625px2 Vitrogen包被 8μg
细胞的原代培养实验
实验方法原理 原代培养是直接从生物体获取细胞进行培养，由于细胞刚刚从活体组织分离出来，故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段，同时也为以后传代培养创造条件。最常用的原代培养有组织块培养和分散
细胞的原代培养实验
实验方法原理原代培养是直接从生物体获取细胞进行培养，由于细胞刚刚从活体组织分离出来，故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段，同时也为以后传代培养创造条件。最常用的原代培养有组织块培养和分散细胞培养。组织块培养是将剪碎的组织块直接移植在培养瓶壁上，加入
上皮细胞类培养实验_胃上皮细胞培养实验
实验方法原理胃癌为我国高发癌症之一，培养正常人胃上皮细胞对研究胃癌癌变机理有很大应用价值。近年来培养人的肾脏上皮、气管上皮、前列腺上皮等都有报道，但培养人胃上皮细胞少见成功。近年我研究室通过培养90例正常胃上皮细胞初代培养获得成功，并建成转化细胞系（Ges-1）。培养人正常胃上皮细胞获得成功主要在于
结缔组织类细胞培养实验——巨噬细胞培养实验
实验方法原理巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得，便于培养，并可进行纯化。但属不繁殖型细胞群，难以长期生存，好的条件下仅能生活2~3 周，因之多用作初代培养。巨噬细胞也能建成无限细胞系；大多来自小鼠，如P388D-1、J774A.1、RAW
特殊细胞培养实验_单细胞分离培养法
实验方法原理从理论上说各种培养细胞都可用以进行克隆培养。但实际上，初代培养细胞和有限细胞系（二倍体细胞）比较困难。无限细胞系、转化细胞系和肿瘤细胞等则比较容易。其原因是，当体内任何细胞被置于体外培养后，对培养环境都有一个适应过程。期间细胞对营养液具有同化作用，即从培养液中摄取营养的同时，也向培养液排
小鼠肝细胞培养实验——细胞培养技术
实验方法原理直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步，是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研
细胞原代培养实验
胰酶消化法 组织块直接培养法 实验方法原理 将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成
羊水细胞培养实验
实验方法原理羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞，可在体外培养用以检验胎儿核型。试剂、试剂盒碘酒酒精营养液血清秋水仙素醋酸甲醇仪器、耗材棉签棉球镊子穿针培养瓶实验步骤1. 抽取羊水无菌抽取羊水10～20 ml，立即注入无菌离心管中；2. 离心分离1000 转/分，离心10 分钟，去上清，留0.5 ml；
羊水细胞培养实验
羊水细胞培养实验实验方法原理羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞，可在体外培养用以检验胎儿核型。 试剂、试剂盒碘酒 酒精
ES细胞分化培养实验
实验材料单一胚胎样体仪器、耗材组织培养板巴斯德吸管玻璃盖玻片无菌镊子ES 分化培养基实验步骤1. 准备下列试剂和材料：培养悬液中的单一胚胎样体6 孔组织培养板带棉塞巴斯德吸管明胶包被的玻璃盖玻片无菌镊子ES 分化培养基2. 准备明胶包被的玻璃盖玻片3. 用无菌镊子在 6 孔组织培养板的每孔中放一块明
肿瘤细胞培养实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 培养液Hanks胰蛋白酶EDTA胶原酶仪器、耗材 培养瓶离心管实验步骤 一、成纤维细胞排除法1. 机械刮除法 是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头（用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝），或裹少许脱脂棉制成，装入试管中高压灭菌后备用（也可用特制电热烧灼器刮除）。刮除程序为（1）标记镜下
肿瘤细胞培养实验
肿瘤细胞培养实验 提高肿瘤细胞培养存活率和生长率的实验 实验方法原理 肿瘤组织及细胞在模拟体内生长环境的条件下、与一般组织细胞一样、也能够生长发育乃
传代细胞培养实验
实验方法原理 当原代培养成功以后，随着培养时间的延长和细胞不断分裂，一方面细胞之间相互接触而发生接触性抑制，生长速度减慢甚至停止；另一方面培养基内的营养物不足和代谢物积累不利于细胞生长甚至发生中毒，如果不及时的减少细胞密度，细胞将逐渐衰老死亡