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实验方法原理去除培养基，加人胰蛋白酶短暂作用，孵育，以培养基分散细胞，计数，稀释并再接种。实验材料A549细胞WI-38MRC-5胰蛋白酶D-PBS试剂、试剂盒70%乙醇喷壶仪器、耗材生长培养基吸管离心管培养瓶移液器吸耳球吸水纸巾吸管桶抗乙醇记号笔血细胞计数板实验步骤1. 准备超净工作台，将试剂及材料置于超净台，开始实验。2. 仔细检査培养物有无污染或衰退迹象。3. 依据标准和你对该培养物行为的了解，决定是否需要传代（做练习 13者应记录细胞密度和状态，如有丝分裂、多层、细胞变性）。若需要传代，如下进行。4. 将培养物置于无菌工作区域，除弃旧培养基。各种细胞（A 549细胞，以 2×104 /ml 接种在 25 cm2 培养瓶中7 天和14天；WI-38，MRC-5，或同样正常二倍体成纤维细胞，以 2×104 /ml 接种在 25 cm2 培养瓶中7 天和14天）分开进行，每种细胞均重复从......阅读全文
小牛血清和胎牛血清有何区别？应用注意事项？ 来源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清，新生牛（小牛）血清（Calf serum, CS）采自出生10至14 天的小牛。 组份与比例不同：两者所含的促细
细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。一般使用蛋白水解酶（比如胰蛋白酶）消化贴壁细胞
(二)原代细胞的维持 1、贴壁细胞（包括半贴壁细胞的换液） 贴壁细胞长成网状或基本单层时，由于营养缺乏，代谢产物增多，pH变酸，不适宜细胞生长，此时细胞还未长成单层，未达到饱和密度，仍需继续培养，因此，需采取换液方式来更新营养成分以
多数细胞系和原代细胞都会以一种单层的形式生长（单层细胞）或者覆盖在玻璃或经处理的塑料物体表面。为了保持细胞的健康与活跃增殖，通常需要对细胞进行有规律的传代。最常见的传代方法是使用蛋白酶如胰酶或胶原酶破坏细胞间以及细胞与培养介质间的连接。当细胞被解离成单细胞悬液时，再将它们稀释并分发至新的培养容器中。
一、体内、外细胞的差异和分化1、差异：细胞离体后，失去了神经体液的调节和细胞间的相互影响，生活在缺乏动态平衡的相对稳定环境中，日久天长，易发生如下变化：分化现象减弱；形态功能趋于单一化或生存一定时间后衰退死亡；或发生转化获得不死性，变成可无限生长的连续细胞系或恶性细胞系。因此，培养中的细胞可视为一种
一、原代细胞的培养与维持1、静置贴壁细胞（包括半贴壁细胞的培养）凡经消化液处理实体组织来源的细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性，细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L,培养基可用 Eagle（MEM）或DNEM培养，小牛血清浓度为10%~80%。在起始的2天中尽量减少振荡，以
实验概要了解传代细胞的传代方法及操作过程，学习观察体外培养细胞的形态及生长状况。实验原理传代培养是指细胞从一个培养瓶以1：2或1：2以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。这种培养，第一步也是制备细胞悬液，当细胞长成致密单层时，它很容易被蛋白水解酶和EDTA)所破坏。所以—般采用胰蛋白酶和EDTA(
细胞培养品 名:细胞培养拼音:xibaopeiyang英文名称：culture of cells说明:包括微生物细胞、植物细胞和动物细胞培养。将动植物组织或细胞从机体取出，分散成单个细胞或直接以单细胞生物，使其在含有必要生长条件的培养基或培养瓶中继续生长与增殖。细胞培养是细胞生物学研究方面十分重要的
一、原代细胞培养 (一)原理：细胞培养(Cell culture)是模拟机体内生理条件，将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。近年来，广泛地应用于分子生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学、细胞工程等领域，发展成一种重要生物技术
实验步骤2.3 小 鼠 胚 胎 饲 养 细 胞（MEF) 的 制 备最广泛地用于支持 h E S 的伺养层细胞来自小鼠胚胎 [丁]^〇 1113 〇 1161&1,， 1998;Reu-binoffetal. ， 2000]，如小鼠胚胎饲养细胞（MEFs) ，尽管它们可能是最原始的间叶细胞的
2 结果2.1 体外培养的胎儿脐动脉血管平滑肌细胞的形态观察 实验中观察到脐动脉组织块贴壁后5~7d可见有细胞以垂直方向从组织块周围游走出来（见图1），但并不是所有的组织块周围都有细胞游出，离组织块较远的区域也可以看到细胞，此为平滑肌细胞的漂移性生长特性（见图2），细胞形态多样，大小不一，多为长梭形
实验方法原理50% 终点 (50% endpoint) 法是将病毒悬浮液经一系列稀释后，接种至动物、鸡胚或培养成单层的细胞，将每个稀释度造成的动物、鸡胚致死量或细胞病变做成曲线，找出造成 50% 动物、鸡胚死亡或细胞病变的终点稀释度。 LD50 (50 % Lethal dose) 为造成 50%动
实验方法原理 实验材料 病毒试剂、试剂盒 含 2%小牛血清的 Eagle's 维持液仪器、耗材 细胞培养箱、细胞培养板实验步骤 1. 制备细胞 先制备好单层细胞培养物，在低倍显微镜下观察，挑选生长良好的细胞，按「传代细胞培养」法进行，将细胞单层洗涤、消化
细胞的传代培养实验可以用于：（1）扩增细胞数量；（2）扩大细胞培养。内容来源：中国医科大学实验指导手册。实验方法原理体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭
晶状体是一个双凸透镜状富于弹性的透明体。位于虹膜、瞳孔之后，玻璃体之前，借晶状体悬韧带与睫状体联系。晶状体后表面的凸度大于前面，是重要的屈光间质之一。晶状体囊膜是在胎生期内有晶状体上皮细胞分泌的具有基底性质的胶原弹性膜，是一层无细胞的透明薄膜，完整地包绕在晶状体周围。前囊膜下一层立方晶状体上皮细胞分
实验方法原理 实验材料 草地夜蛾（Sf 9）细胞试剂、试剂盒 70％乙醇0.4％(m V)台盼蓝仪器、耗材 无血清昆虫细胞培养基60 mm 培养皿或 25 cm2 培养瓶 27℃ 培养箱旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台离心机带螺口盖的冻存管液氮罐实验步骤 1. 将 3 ml 含 10％ 胎牛血清的昆虫细
长期以来，科学家多依赖永生化的细胞系来进行各种研究，但在过去十年，随着细胞生物学的发展，细胞培养领域发生了巨大变化，新型的技术和培养试剂让使用原代细胞作为研究对象成为可能。相比于细胞系，原代细胞更多保留了体内原始组织的生物学特征，如生长和衰老，因此通过原代细胞可建立更好的细胞疾病模型。 原
基本方案 实验方法原理 实验材料
基本方案实验方法原理实验材料草地夜蛾（Sf 9）细胞 &nbs
实验概要初步掌握哺乳动物细胞的原代培养与传代培养的基本操作过程，为生物工程在医学上的应用打下基础。实验原理1. 细胞培养(Cell culture)是模拟机体内生理条件，将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研
实验方法原理 体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间
实验方法原理 体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间
一、产品简介 平台编号：bio-74173 产品规格：25cm2 培养瓶 拉丁属名：原代细胞取组织现分 中文名称：鸡卵泡颗粒细胞 英文名称：Chicken follicular granulosa cells 组织来源：鸡卵泡 培养基信息：
实验方法原理单层生长的细胞增殖，融合成片，并长满细胞瓶表面。有些细胞靠频繁地换液可维持细胞在平台期数天至数周；而许多其他细胞系需要胰蛋白酶处理、传代培养后才能存活下来，用胰蛋酶处理可将细胞从生长物表面分离下来以促进传代培养。后种细胞系不易呈现出接触抑制并继续增殖，达到极限后细胞则从细胞瓶表面脱落,
实验方法原理 单层生长的细胞增殖，融合成片，并长满细胞瓶表面。有些细胞靠频繁地换液可维持细胞在平台期数天至数周；而许多其他细胞系需要胰蛋白酶处理、传代培养后才能存活下来，用胰蛋酶处理
下面为美国标准细胞库或细胞银行（ATCC）入库细胞的基本要求： （1）培养简历 组织来源日期、物种、组织来源、性别、年龄、供体正常或异常健康状态，细胞已传代数等。 （2）冻存液 培养基和保护剂名称。 &
细胞培养之如何将细胞培养的更漂亮？ 1、收到细胞，先要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如2
一、实验原理细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养；当原代培养的细胞增殖达到一定密度后，则需要做再培养， 即将培养的细胞分散后，从一个容器以1：2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养，为传代培养，传代培养的累积次数就是细胞的代数。细胞冻存及复苏的基
一、实验原理细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养；当原代培养的细胞增殖达到一定密度后，则需要做再培养， 即将培养的细胞分散后，从一个容器以1：2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养，为传代培养，传代培养的累积次数就是细胞的代数。细胞冻存及复苏的基
原代培养:即第一次培养，是指将培养物放置在体外生长环境中持续培养，中途不分割培养物的培养过程。有几方面含义： ●培养物一经接种到培养器皿（瓶）中就不在分割，任其生长繁殖； ●原代培养中的“代”并非细胞的“代”数，因为培养过程中细胞经多次分裂已经产生多代子细胞； ●原代培养过程