免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白D(IgD)的纯化实验
实验步骤备 选 方 案 1 硫 酸 铵 沉 淀 法 纯 化 IgM此法适用于多数 IgM 抗体，尤其是一些在水中不能形成沉淀的 IgM 抗体。附 加 材 料（其 他 材 料 见 基 本 方 案 1 )饱和硫酸铵（SAS)硫酸铵结晶（CAS)硼酸缓冲液，可选备 选 方 案 2 甘 露 聚 糖 结 合 蛋 白 亲 和 纯 化 IgM备 选 方 案 3 IgM 纯化试剂盒本 方 案 2 凝 集 素 亲 和 层 析 法 纯 化 小 鼠 IgD 展开......阅读全文
痘苗病毒纯化实验
实验方法原理 对于很多研究，部分纯化的病毒就足够了（进行到本实验步骤 14）， 如果是纯化 MVA 病毒，则不能用胰酶消化，也不能用 CEF 细胞或 BHK-21 细胞代替 HeLa 细胞。实验材料 痘苗病毒储液HeLa S3 细胞（悬浮培养）试剂、试剂盒 胰酶Tris • Cl蔗糖仪器、耗材 旋转
痘苗病毒纯化实验
大规模纯化 实验方法原理 对于很多研究，部分纯化的病毒就足够了（进行到本实验步骤 14）， 如果是纯化 MVA 病毒，则不能用胰酶消化，也不能用 CEF 细胞
痘苗病毒纯化实验
痘苗病毒通常采用蔗糖密度梯度离心的方法纯化。纯化的病毒可用于制备痘苗病毒 DNA ，用于不允许存在感染细胞蛋白污染的研究中，同时也可以用作高滴度的病毒储液。对于大规模的纯化（至少 1 L 的培养物），最好的方法是用 HeLa 细胞悬液作为感染的对象，而不要用单层培养的细胞。内容来源于《精编分子生物学
Western－Blot的过程与优化，着重于化学发光检测
实验步骤 一、蛋白质印迹法 蛋白质印迹 (Western Blotting) 法是在混合的复合物中鉴定和定量特定蛋白质的一种有效且常用的方法 (Towbin et al. ,1979)。这一技术对固定在硝酸纤维素膜或聚偏二氟乙烯
高性能微球在多肽药物分离纯化中的应用（一）
由于多肽药物结构复杂、稳定性差、浓度低且目标分子与杂质的结构相类似，有的只有一个氨基酸的差别，因此多肽药物的分离纯化一直是多肽药物生产过程中最具挑战性的一部分，多肽分离纯化也主要依赖于高性能的微球制备色谱填料，其具有分离效果好、分辨率高、重复性好、回收率高等优点，是目前多肽药物的主要分离纯化方法。无
柔嫩艾美耳球虫子孢子的DE52纯化方法
实验概要球虫子孢子广泛应用于球虫的体外研究和球虫的攻毒实验等实验中，它的纯化收集的效率直接影响着实验的进程。DE-52是一个被广泛应用的纤维柱纯化体系，其纯化效率高，子孢子获得量较大。实验步骤1. DE-52维素层析柱的制备 1) 称取DE-52纤维素2.0g，用去离子水浸泡24小时，使其溶胀，
高性能微球在多肽药物分离纯化中的应用（二）
01 「 多肽分离纯化色谱填料的选择 」一个理想的多肽药物分离纯化色谱填料必须满足以下特性：（a）高选择性，高分离度；（b）柱效高，分辨率高；（c）载量大；单位体积填料处理多肽样品的能力大（d）化学性能稳定，适用pH范围宽（1-14）；可在线清洗， 耐脏性强，使用寿命长；（e）机械强度大，反压低
高性能微球在多肽药物分离纯化中的应用（三）
「 色谱填料孔径对多肽分离纯化的影响 」 除了体积排阻色谱外，其它色谱分离机理都离不开样品与色谱填料表面的作用。 色谱填料孔径大小、分布及比表面积对多肽分离性能也有重大的影响，对于分子量小于1000的多肽样品，一般选择孔径在100Å 以下的就可以。 对于大多数分离模式来说有效的比表面积越大，载量越大
新发现！山东莱阳发现恐龙蛋新蛋种，命名“变形蛋”
近日，一项恐龙蛋研究最新成果被刊发。通过对山东莱阳出土恐龙蛋化石的深入研究，古生物研究人员建立了一个新蛋种，并将其命名为“变形蛋”。研究人员从“变形蛋”的径切面观察，发现其内部发育大量的锥形蛋壳单元组合，它们之间有较大的间隙；中间发育柱状蛋壳单元和小孔；最外层发育壳单元的分支，形成灌木状微结构。研究
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验3
三、蛋白质的硝化修饰酪氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸侧链的硝化与亚硝化作用构成了蛋白质硝化PT M 的主要部分。这些加成反应由发育、氧化应激及衰老过程中产生的活性氮介导。活性氮的增加是由一氧化氮和活性氧的过度反应或调控紊乱造成的（Yeo et al.，2008)。活性氮和活性氧能够靶向于DNA、脂
实验室球磨机高能球磨与普通球磨的区别
随着实验室球磨机的种类越来越多，如何选择合适的球磨机成了一个难题。如行星式球磨机、实验滚筒球磨机、实验搅拌球磨机……一系列实验室球磨机，了解其区别，成了快速选择合适机型的一种方法。实验室球磨机的区别从研磨方式分有行星式、滚筒式、搅拌式等等，研磨方法有干法研磨和湿法研磨，而普通球磨和高能球磨是以磨球研
mRNA的提取及纯化实验
实验材料 mRNA试剂、试剂盒 mRNA分离试剂盒异丙醇NaAC仪器、耗材 仪器水浴离心机取液器分光光度计实验步骤 一、生物素标记的Oligo（dT）探针与mRNA的煺火1. 在DEPC处理过的1.5 ml Eppendof管中，加入0.2-1 mg 的总RNA和无RNase的水至终体积为0.5
随机序列库的纯化实验
实验方法原理 实验材料 DNA 库 试剂、试剂盒 氢氧化铵
噬菌体克隆的纯化实验
基本方案 实验材料 噬菌体 试剂、试剂盒
染色末端的清洁纯化实验
试剂、试剂盒 乙醇 洗脱上样液 仪器、耗材 磁性分离装置 平板夹 平板架
蛋白质的纯化实验
不发生电泳现象，蛋白质粒子带负电荷，在电场中向负极移动，蛋白质粒子带正电荷；在等电点偏碱性溶液中，在电场中向正极移动，可以将蛋白质进行分离纯化。这种现象称为蛋白质电泳(Electrophoresis).蛋白质的分离纯化的一般原则①高回收率②高纯度③高活性④方便与快捷⑤经济蛋白质的分离纯化的一般步骤①
RNA－的提取和纯化实验
虽然 FDD 利用了真核 mRNA 的多聚腺苷酸 [poly(A)+] 位点，但并不推荐使用 poly(A)+RNA，因为在反转录反应中可能污染寡核苷酸，并因此增加假阳性的概率。所以建议使用总 RNA 做 FDD 分析。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒氯仿焦
噬菌体克隆的纯化实验
实验材料 噬菌体试剂、试剂盒 LB顶层琼脂糖氯仿SMMgSO4仪器、耗材 培养箱牙签硝酸纤维素膜实验步骤 1. 在直径82 mm LB平极上倒入含200 μl 宿主菌的3 ml 0.7%顶层琼脂糖，放置10 min。 2. 通过放射自显影胶片上的杂交斑点确定阳性噬斑在原平板上的位置，用牙签轻轻插
随机序列库的纯化实验
实验方法原理实验材料DNA 库试剂、试剂盒氢氧化铵正丁醇TE 缓冲液尿素上样缓冲液NaCl乙醇仪器、耗材荧光薄层层析板（VWR）紫外灯剃刀刀片小孔注射器能耐受极端温度的 13 ml 离心管（Sarstedt）90℃水浴旋转混合器实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 寡核苷酸
蛋白质的纯化实验
实验材料 Sephacryl S-300胶体试剂、试剂盒 缓冲液buffer A-150仪器、耗材 色析管柱铁夹试管铁架水平仪收集器浓缩用离心机 浓缩用离心管实验步骤 一、仪器设备色析管柱 （Pharmacia C column, 1.6×100 cm）、铁架、铁夹及水平仪；部分收集器（frac
染色末端的清洁纯化实验
利用 ABIPRISMRigDye 末端化学法进行自动荧光测序是高效率 DN 八序列测定的方法之一。序列梯度是由标准的 Sanger 方法利用荧光标记链末端的核苷而产生的。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒乙醇洗脱上样液仪器、耗材磁性分离装置平板夹平板架测序反
蛋白质的纯化实验
胶体过滤法 实验材料 Sephacryl S-300胶体 试剂、试剂盒
mRNA的提取及纯化实验
磁珠法 亲和柱层析法 亲和柱层析法 实验材料 mRNA
随机序列库的纯化实验
实验方法原理 实验材料 DNA 库试剂、试剂盒 氢氧化铵正丁醇TE 缓冲液 尿素上样缓冲液NaCl 乙醇仪器、耗材 荧光薄层层析板（VWR）紫外灯剃刀刀片小孔注射器能耐受极端温度的 13 ml 离心管（Sarstedt） 90℃水浴旋转混合器实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他
染色末端的清洁纯化实验
试剂、试剂盒 乙醇洗脱上样液仪器、耗材 磁性分离装置平板夹平板架测序反应纯化系统实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂用于测序的胶洗脱/上样液 (见表 9-4)90% 乙酵洗涤液2. 特殊设备MagnaBotⅡ磁性分离装置（Promega)平板夹 96(Promega)平板架（Promega)3
噬菌体克隆的纯化实验
噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的细菌病毒的总称，作为病毒的一种，噬菌体具有病毒特有的一些特性：个体微小；不具有完整细胞结构；只含有单一核酸。噬菌体基因组含有许多个基因，但所有已知的噬菌体都是在细菌细胞中利用细菌的核糖体、蛋白质合成时所需的各种因子、各种氨基酸和能量产生系统来实现其自身
膜蛋白的纯化实验（一）
一、膜的制备从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法，因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能高表达目的膜蛋白的组织或细胞系就很重要。最近，人们对于将细胞表面蛋白质作为鉴定不同
膜蛋白的纯化实验（二）
三、膜蛋白的纯化一 旦 使 用 了 合 适 的 去 污 剂 将 膜 蛋 白 从 细 胞 膜 中 増 溶 出 来 ，就 可 以 分 离 目 标 蛋 白 质 了 。传 统 色 谱 层 析 技 术 ，如 凝 胶 过 滤 、亲 和 、离 子 交 换 和 层 析 聚 焦 （chromatofocusi
RNA－的提取和纯化实验
试剂、试剂盒 氯仿 焦碳酸二乙酯 乙醇 异丙醇 苯酚-胍盐单相溶液 磷酸盐缓冲液
RNA－的提取和纯化实验
试剂、试剂盒 氯仿焦碳酸二乙酯乙醇异丙醇苯酚-胍盐单相溶液磷酸盐缓冲液仪器、耗材 离心机和转头移液器离心管锥形管平板匀浆器实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂氯仿焦碳酸二乙酯（DEPC) 处理过的 H20(GenHimterR105)乙醇70% 乙醇洗液（用 DEPC 处理过的 H20 配制）