流式细胞仪检测全血的人淋巴细胞
实验步骤基本方案材 料(打 V 项 目 见 附 录 1)全血,通 常 用 E D T A 抗凝P B S ,有 或 无 0.1% (m /V ) 叠氮钠,过滤除菌单 克 隆 抗 体(标记的,未标记的或生物素化的),通过滴定确定最佳工作浓度间 标 二 抗(仅用于未标记的一抗)F T T C 标记的链霉亲和素或 P E 标记的链霉亲和素(仅用于生物素化的一抗)裂解液:如低渗平衡盐溶液,去离子水, A C K 裂 解 液(附 录 1),或商品化的裂解液(如 FACs-Iyse, Becton-Dickinson; Immuno-lyse, Coulter; Whole BloodLyse and Fix reagent, Gen Trak)1 % (m /V ) 多聚甲醛, p H 7.412m m X 75m m 圆 底 离 心 管(Falcon)Beckman 带 有 JS-4. 2 转子的 J-6M 冷 冻 离 心 机(或替代离......阅读全文
流-式-细-胞-仪-检-测-全-血-的-人-淋-巴-细-胞
实验步骤基本方案材 料(打 V 项 目 见 附 录 1)全血,通 常 用 E D T A 抗凝P B S ,有 或 无 0.1% (m /V ) 叠氮钠,过滤除菌单 克 隆 抗 体(标记的,未标记的或生物素化的),通过滴定确定最佳工作浓度间 标 二 抗(仅用于未标记的一抗)F T T C 标记的链霉
干细胞的鉴定实验——流-式-细-胞-仪-检-测-分-析-技-术
实验步骤流 式 细 胞 仪 检 测 分 析 技 术实 验 材 料(1) 不同来源的干细胞,细胞数不少于 5xl0 5 个/管。(2) 荧光标记的抗体或抗体及荧光二抗。(3)PBS。实 验 步 骤(1) 将 细 胞 用 PBS 充分洗涤后重悬于 5000 PBS 中,如果细胞收集和鉴定不能同天完成,可
ELISPOT方-法-检-测-分-泌-细-胞-因-子-的-细-胞
实验步骤基本方案材 料包被缓冲液洗液:含 0.25% (v/v) Tween 20 的 PBS 溶液阻断缓冲液:含 5 % (m/V) BSA 或 FCS 的 PBS 溶液VRPMMO 完全培养基(或其他适宜培养基)分泌细胞因子的细胞(小鼠或人的)丝裂原,抗原或其他促细胞因子分泌的刺激物带有标记物的
细-胞-毒-性-T-淋-巴-细-胞-的-诱-导-及-检-测
实验步骤基 本 方 案 1 从 C TL 前体中诱导细胞毒性注意:反应细胞应根据抗原的种类选择是否需要进行体内致敏。材 料反应细胞来源:未致敏的或者体内致敏的小鼠脾脏细胞(见辅助方案 1 和 2致敏培养基刺激细胞来源:未修饰或半抗原修饰的小鼠脾脏细胞(见辅助方案 3)R P M I -1 0 完全培
B-细-胞-分-泌-抗-体-的-检-测
实验步骤基 本 方案材 料外周 血 单 个 核 细 胞(P B M C ; 单 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培养基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 养 板(Costar)1 . 计 数 PBMC (附录 3A ) , 用 RPMI-5 完全培养基调整浓度至 4 X 10
BrdU-检-测-丁-细-胞-和-B-细胞增殖
实验步骤基本方案材 料实验动物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液(口 服用)或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液(注射用)P B S , p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D
小-鼠-巨-噬-细-胞-的-表-型-检-测
实验步骤基 本 方 案 直 标 法 检 测 小 鼠 巨 噬 细 胞 的 表 型材料Sorvall RT 6000B 离心机I . 准 备 4 只 12m m X 75m m 试管,将试管编号为 1〜4。每 管 中 加 入 2 X IO7个细胞/ml细胞悬液 50ul。2.每管加入 3 mg/ml 阻
巨-噬-细-胞-一-氧-化-氮-的-检-测
实验步骤基本方案材料展开
P-C-R-检-测-人-T-细-胞-受-体-基-因-的-表-达
实验步骤 基 本 方 案 PCR检 测 人 T 细胞受体基因的表达展
B-细-胞-功-能-的-增-殖-检-测-方-法
实验步骤基 本 方 案 抗 I g M 与 L P S 刺激的 B 细胞增殖材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)纯化的静息 B 细 胞(单 元 2. 5),采 用 Percoll 梯度离心制备V D M E M -10 完全培养基山羊抗 IgM (JacksonImmunoresearch) 或
NK/L-A-K-细-胞-杀-伤-活-性-的-检-测
实验步骤基 本 方案 51C r 释 放 法检 测 NK/LA K 细胞杀伤活性材 料展
巨-噬-细-胞-抗-肿-瘤-活-性-的-检-测
实验步骤基本方案 [111In] 释放法检测巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤作用材 料辅助方案 [111In ] 标记肿瘤靶细胞材 料展开
PCR-检-测-细-胞-因-子-m-R-N-A-的表达
实验步骤基 本 方 案 定 量 IL -2 mRNA表达水平材 料内参照:转 录 质 粒 载 体(含有临床生物检测标本相关的c D N A )胍盐溶液50 U/ul RNasin5 X 反转录酶缓冲液0.5m g / m l olig (d T )16l m g /m l 乙酰化的B S A4d N
P-C-R-检-测-小-鼠-T-细-胞-受-体-表-达
实验步骤 基本方案 I P C R 分析小鼠 T C R 基因表达材 料正常小鼠的组织匀浆或者是 H B S S 制备的单个细胞悬液(IO4〜IO7) (附 录 1)无菌水展开
巨-噬-细-胞-吞-噬-功-能-和-杀-伤-功-能-的-检-测
实验步骤基本方案1 巨噬细胞吞噬功能的检测材 料单核/巨噬细胞:如巨噬细胞株、小鼠腹腔巨噬细胞[单元6.1,需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸盐肉汤],或 人 P B M C (单 元 8.1)平衡盐溶液(balanced salt solution, BSS)细菌(如单核
人-NK-T-细-胞-的-分-离-和-扩-增
实验步骤基本方案 1 NK T 细胞的鉴定材 料外周肝素抗凝血P B SR P M I -1640 培养基,含 1 0 % (V /V ) 人血清或 F C S 以 及 10U /m l I L -2 (可选)流 式 细 胞 缓 冲 液(flow cytometry buffer, FCbuffer
血检可测人体生物钟
据英国《每日邮报》9月10日报道,美国芝加哥西北大学研究员发现昼夜节律失调和糖尿病、抑郁等多种疾病的联系,并研究出名为“时间记号”的血液检测,用于检测人体生物钟,以此调整病人作息时间并预防多种潜在致命疾病的威胁。 人体生物钟可指明昼夜节律,比如人体睡眠觉醒周期。研究团队发现,有些人的生物钟和实
血细包分裂
一是有丝分裂(间接分裂) 在细胞分裂时,有特殊的丝体出现,故称为有丝分裂。有丝分裂是血细胞增殖的主要形式。正常人循环血中不出现有丝分裂细胞。有丝分裂细胞在造血组织中的数量,反映其增殖的程度和状态。分裂过程可分为4期,主要表现在核的变化上。 (1)前期(又称单丝球期):细胞开始分裂时,胞体变成
人全血Foxp3实验步骤
需要试剂Human Regulatory T Cell Whole Blood Staining Kit (#88-8996-40)包含组分:(1)、1X RBC Lysis Buffer: 200 mL (2)、Flow Cytometry Staining Buffer: 600 mL (3)、
人末梢血微量全血培养染色体显示法
实验概要 人末梢血微量全血培养染色体显示法实验步骤1.培养液准备:取15ml培养瓶数个,每瓶内分别充入5ml培养液(pH 7.2),内含:1640培养液(含10%~15%小牛血清),PHA 0.1ml,青霉素100单位和链霉素100微克/毫升 培养液2.抽血针管准备:取2~5ml针管一
T-细-胞-克-隆-的-建-立
实验步骤基本方案 1 产生和维持同种反应性 T h 和 CTL 克隆尽管同种反应性 T 细胞可以从未刺激的脾细胞或淋巴结细胞中产生,但如果细胞在初次混合淋巴细胞(M L C ) 中第一次被同种抗原刺激,反应细胞的得率会更高。见以下介绍。材 料同种反应性小鼠脾脏 T 细胞V H B S S (可选使用
小-鼠-巨-噬-细-胞-的-分-离
实验步骤基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离材料小鼠,洁 净 环 境 中 饲 养(最好置层流柜中饲养)7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 盐 肉 汤(Brewerthioglycollate medium,分离炎性腹腔巨嗤细
822人末梢全血5种无机元素分析
分析5种无机元素在不同年龄段的变化情况.方法:用原子吸收光谱法测定了822名受试者末梢全血中铜、锌、铁、钙和镁浓度,并将受试者按年龄分为4个组进行统计学分析.结果:婴儿组(A组)微量元素铜与幼儿组(B组)、学龄前儿童组(C组)和学龄儿童及成人组(D组)均存在明显差异;微量元素锌在各组之间均存在明显差
微量元素分析仪发检和血检方式对比
微量元素分析主要用于卫生防疫、医院、妇幼保健质量监视、环保科研高校等部门做各种微量剖析与痕量分析。经过对样品微量元素的分析给用户提供一些可行性分析察看数据,以便对人体健康及营养停止监控。仪器集电位溶出剖析和极谱伏安于一体,这可以大大增加仪器的检测范围值。微量元素分析仪也叫微量元素检测仪,其功用多、操
全血输血的应用
全血是指血液的全部成分,包括各种血细胞及血浆中各种成分,还有抗凝剂及保存液。全血有保存全血及新鲜全血之分,常用的是保存4±2摄氏度的全血。新鲜全血定义难以统一规定,要依输血的目的而定,为了补充新鲜的红细胞,可用保存5天的ACD全血或10天的CPD全血;如同时还要补充血小板或白细胞,则应分别用保存1天
全血锰的概述
人体内含锰12-18mg。锰主要在肠道吸收,通过肝脏随胆汁排入粪便,少量可由肠道再吸收。经尿排泄的锰尚不到总排出量的10%。骨骼中锰积蓄量约占全身总量43%。由于锰参与多种酶的组成和激活作用,既与蛋白质合成有关,又可改善动脉粥样硬化者的脂质代谢。锰还能促进铁吸收和利用,参与黏多糖合成(黏多糖是软
老年人胃食管反流病的食管测压检查
可测LES的长度和部位,LES压、LES松弛压、食管上括约肌压及食管体部压力等。能显示LES压低下,LES频发的松弛及食管蠕动收缩波幅低下或消失,这些正是胃食管反流的运动病理基础,如LES压<6mmHg易导致反流。由于正常人与胃食管反流者二组测得的LES压数据范围有重叠,用本检查判断胃食管反流不
指夹式血氧仪
通过依次驱动一个红光LED(660nm)和一个红外光LED(910nm),蓝色线条表示血红蛋白不带氧分子的时候接收管对还原血红蛋白感应曲线,从曲线图中可以看下还原血红蛋白对660nm红光的吸收比较强,而对910nm红外光的吸收长度比较弱。红色线条表示血红蛋白并带有氧分子的血红细胞时接收管对氧合血
从全血里纯化单个核细胞(人、大鼠和小鼠)
所需仪器:XL03RH型控温离心机(低速冷冻离心机,可使用24*15ml离心管,水平转子);抽血注射器(大小与抽血体积相一致)试剂:Optiprep;Tricine-缓冲盐溶液(TBS,仅小鼠血)0.85%(质量浓度)NaCl,10mmol/L Tricine-NaOH(ph = 7.4)。 方法:
全血RNA提取
摘要: RNA提取应该说已经成为了一种常见的分子生物学操作步骤了,但是不少科研人员仍然烦恼着如何寻找一种最好的方法,或者找到一种适合于特殊用途方法。比如说传统的血液标本表达谱芯片实验需要先把有核细胞从全血中分离出来,加白细胞分离液、离心等步骤,比较繁琐,如果能进行全血的提取,那就再好不过。RNA提取