巨噬细胞抗肿瘤活性的检测
实验步骤基本方案 [111In] 释放法检测巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤作用材 料辅助方案 [111In ] 标记肿瘤靶细胞材 料展开......阅读全文
巨－噬－细－胞－抗－肿－瘤－活－性－的－检－测
实验步骤基本方案 [111In] 释放法检测巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤作用材 料辅助方案 [111In ] 标记肿瘤靶细胞材 料展开
巨－噬－细－胞－一－氧－化－氮－的－检－测
实验步骤基本方案材料展开
小－鼠－巨－噬－细－胞－的－表－型－检－测
实验步骤基 本 方 案 直 标 法 检 测 小 鼠 巨 噬 细 胞 的 表 型材料Sorvall RT 6000B 离心机I . 准 备 4 只 12m m X 75m m 试管，将试管编号为 1〜4。每 管 中 加 入 2 X IO7个细胞/ml细胞悬液 50ul。2.每管加入 3 mg/ml 阻
巨－噬－细－胞－吞－噬－功－能－和－杀－伤－功－能－的－检－测
实验步骤基本方案1 巨噬细胞吞噬功能的检测材 料单核/巨噬细胞：如巨噬细胞株、小鼠腹腔巨噬细胞[单元6.1，需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸盐肉汤]，或 人 P B M C (单 元 8.1)平衡盐溶液（balanced salt solution， BSS)细菌（如单核
小－鼠－巨－噬－细－胞－的－分－离
实验步骤基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离材料小鼠，洁 净 环 境 中 饲 养（最好置层流柜中饲养）7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 盐 肉 汤（Brewerthioglycollate medium，分离炎性腹腔巨嗤细
NK/L－A－K－细－胞－杀－伤－活－性－的－检－测
实验步骤基 本 方案 51C r 释 放 法检 测 NK/LA K 细胞杀伤活性材 料展
B－细－胞－分－泌－抗－体－的－检－测
实验步骤基 本 方案材 料外周 血 单 个 核 细 胞（P B M C ; 单 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培养基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 养 板（Costar)1 . 计 数 PBMC (附录 3A ) ， 用 RPMI-5 完全培养基调整浓度至 4 X 10
细－胞－毒－性－T－淋－巴－细－胞－的－诱－导－及－检－测
实验步骤基 本 方 案 1 从 C TL 前体中诱导细胞毒性注意：反应细胞应根据抗原的种类选择是否需要进行体内致敏。材 料反应细胞来源：未致敏的或者体内致敏的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 1 和 2致敏培养基刺激细胞来源：未修饰或半抗原修饰的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 3)R P M I -1 0 完全培
ELISPOT方－法－检－测－分－泌－细－胞－因－子－的－细－胞
实验步骤基本方案材 料包被缓冲液洗液：含 0.25% (v/v) Tween 20 的 PBS 溶液阻断缓冲液：含 5 % (m/V) BSA 或 FCS 的 PBS 溶液VRPMMO 完全培养基（或其他适宜培养基）分泌细胞因子的细胞（小鼠或人的）丝裂原，抗原或其他促细胞因子分泌的刺激物带有标记物的
流－式－细－胞－仪－检－测－全－血－的－人－淋－巴－细－胞
实验步骤基本方案材 料（打 V 项 目 见 附 录 1)全血，通 常 用 E D T A 抗凝P B S ，有 或 无 0.1% (m /V ) 叠氮钠，过滤除菌单 克 隆 抗 体（标记的，未标记的或生物素化的），通过滴定确定最佳工作浓度间 标 二 抗（仅用于未标记的一抗）F T T C 标记的链霉
外－源－性－抗－原－向－T－细－胞－的－呈－递
实验步骤基本方案 一 种 抗 原 加 工 处 理 和 呈 递 的 检 测 体 系材 料具有增殖能力的（如转化的 B 细胞）或非增殖的且与 T 杂交瘤细胞 M H C 匹配的抗原呈递细胞（单 元 7.1)D M E M -1 0 完全培养基， 37°C对数生长期的 T 杂交瘤细胞抗原：溶解于水的蛋白质
BrdU－检－测－丁－细－胞－和－B－细胞增殖
实验步骤基本方案材 料实验动物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液（口 服用）或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液（注射用)P B S ， p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D
表现为骶前占位的髓外造血病例分析
１ 病例资料 患者，男，６５岁，以“反 复 头 昏、乏 力 １０ 年，再 发１周”于２０１６年７月２９日 收 住 我 科。患 者１０ 年前无明显诱因出现头昏、乏力，伴皮肤黄染，无胸 闷心慌，无酱油色尿 及 肉 眼 血 尿，在当地卫生院就 诊，血常规提示 Ｈｂ９０ｇ／Ｌ 上下，随即至武汉同济 医院就
B－细－胞－功－能－的－增－殖－检－测－方－法
实验步骤基 本 方 案 抗 I g M 与 L P S 刺激的 B 细胞增殖材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)纯化的静息 B 细 胞（单 元 2. 5)，采 用 Percoll 梯度离心制备V D M E M -10 完全培养基山羊抗 IgM (JacksonImmunoresearch) 或
PCR－检－测－细－胞－因－子－m－R－N－A－的表达
实验步骤基 本 方 案 定 量 IL -2 mRNA表达水平材 料内参照：转 录 质 粒 载 体（含有临床生物检测标本相关的c D N A )胍盐溶液50 U/ul RNasin5 X 反转录酶缓冲液0.5m g / m l olig (d T )16l m g /m l 乙酰化的B S A4d N
α、－β和－γ干－扰－素－诱－导－的－抗－病－毒－活－性－的－检－测
实验步骤基 本 方 案 小 鼠 干 扰 素 诱 导 的 抗 病 毒 活 性 的 检 测材 料干扰素敏感的 L 929 成纤维细胞E M E M 培 养 基（Eagle 氏最低要求培养基）胰酶消化液检 测 样 品（具干扰素活性的血清或培养上清）小鼠干扰素的参照标准品 α -干扰素、β-干扰素、 γ-干
表现为巨块型肿物的肝淋巴瘤病例分析
男，39岁，因双侧腹股沟淋巴结肿大20年，检查发现肝、肺占位半月余来诊。患者近来无发热、贫血、盗汗、皮肤瘙痒等症状，周身无痛，二便正常，体质量无明显变化。 超声检查：肝左叶巨大团块状肿物，大小约14.5 cm×8.3 cm×15.0 cm，有包膜，轮廓清晰，其内回声不均，高回声为主，呈细网状
P－C－R－检－测－小－鼠－T－细－胞－受－体－表－达
实验步骤 基本方案 I P C R 分析小鼠 T C R 基因表达材 料正常小鼠的组织匀浆或者是 H B S S 制备的单个细胞悬液（IO4〜IO7) (附 录 1)无菌水展开
干细胞的鉴定实验——流－式－细－胞－仪－检－测－分－析－技－术
实验步骤流 式 细 胞 仪 检 测 分 析 技 术实 验 材 料(1) 不同来源的干细胞，细胞数不少于 5xl0 5 个/管。(2) 荧光标记的抗体或抗体及荧光二抗。(3)PBS。实 验 步 骤(1) 将 细 胞 用 PBS 充分洗涤后重悬于 5000 PBS 中，如果细胞收集和鉴定不能同天完成，可
P－C－R－检－测－人－T－细－胞－受－体－基－因－的－表－达
实验步骤 基 本 方 案 PCR检 测 人 T 细胞受体基因的表达展
外周血和脐带血中分离单个核细胞
基 本 方 案 FicoH-Hypaque梯度离心法分离单个核细胞材 料肝 素 抗 凝 血（附 录 3 G ) 或 者 肝 素 化 的 脐 带 血（I Oml脐 带 血 加 入 I m l 含 250U 的P B S 为宜）P B S聚蔗糖-泛影葡胺（Ficoll-Hypaque) 溶液H B S
子宫阔韧带室管膜瘤病例分析
1 临床资料 患者，女， 45 岁，因“发现子宫肌瘤 6 个月，近期增大”于 2017 年 3 月 6 日收入院。妇科检查: 外阴发育正常; 阴道通 畅;黏膜皱襞滑润，伸展良;宫颈表面光滑;子宫后位，略大于 正常，表面不平，活动尚可。子宫偏右侧触及约 4．0cm×4．0cm 大的囊实性包块，
T－细－胞－中－丝－裂－原－活－化－的－蛋－白－激－酶（MAPK)－活性分析
实验步骤基 本 方 案 1 免疫复合物蛋白激酶测定此方法可用于测定 E R K 、 J N K 和 p38 M A P K 的活性，也可使用针对每个 M A P K组分的商品化抗体。然而，特定的抗体对各组分内特定的亚型会显示一定的特异性。材 料基本方案 2 固相蛋白激酶法检测 J N K 活性这种方
抗中性粒细胞胞浆抗体阴性肉芽肿性多血管炎病例报告2
图3 牙龈活组织检查 苏木精-伊红染色。A、C：箭头显示大量炎细胞浸润；B：箭头显示血管炎；D：箭头显示多核巨细胞。 此外，免疫组织化学检查显示：免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）G4为阴性，梅毒螺旋体（Treponema pallidum）为阴性；原位杂交实验显示：Epstein-
抗中性粒细胞胞浆抗体阴性肉芽肿性多血管炎病例报告1
肉芽肿性多血管炎（granulomatosis with polyangiitis，GPA）原称韦格纳肉芽肿病（Wegener’s granulomatosis，WG），是一种以坏死性肉芽肿性血管炎为主要特征的全身性疾病，为少见的自身免疫性疾病。GPA的临床表现复杂、多变，早期诊断困难，易被
淋－巴－细－胞－活－化－过－程－中－肌－醇－磷－脂－周－转－的－分－析
实验步骤基 本 方 案 1 通 过 道 威 克 斯（DOWEX) 离 子 交 换 层 析 分 析 [3H] 肌醇磷酸材料备 选 方 案 通 过 HPLC 方 法 分 析 [3H] 肌醇磷酸附加材料[3 H ] InsP 样 本（见基本方案，步 骤 6) 和标准品除 气 的 H PLC 级水2mol/
T－细－胞－克－隆－的－建－立
实验步骤基本方案 1 产生和维持同种反应性 T h 和 CTL 克隆尽管同种反应性 T 细胞可以从未刺激的脾细胞或淋巴结细胞中产生，但如果细胞在初次混合淋巴细胞（M L C ) 中第一次被同种抗原刺激，反应细胞的得率会更高。见以下介绍。材 料同种反应性小鼠脾脏 T 细胞V H B S S (可选使用
皮下脂膜炎性T细胞淋巴瘤的诊断
此瘤的诊断主要靠活组织病理检查。最有助于诊断的特点为：结合细胞不典型和病变的结构方式。常需数次活组织检查，在随后标本中瘤细胞不典型性变得较明显时即可确诊。需与下列疾病鉴别： ①组织细胞吞噬性脂膜炎：1980年首先报告，现多认为与此瘤为同一疾病； ②良性反应性脂膜炎(包括结节性红斑、硬红斑)：
关于皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤的－诊断检查介绍
此瘤的诊断主要靠活组织病理检查。最有助于诊断的特点为：结合细胞不典型和病变的结构方式。常需数次活组织检查，在随后标本中瘤细胞不典型性变得较明显时即可确诊。需与下列疾病鉴别： ①组织细胞吞噬性脂膜炎：1980年首先报告，现多认为与此瘤为同一疾病； ②良性反应性脂膜炎(包括结节性红斑、硬红斑)：
幼儿肉芽肿性皮肤松弛症病例分析
1 临床资料 患者男， 5 岁。下腹部、腹股沟、颈部皮肤粗糙伴松弛 2 年 余。患者 2 年前无明显诱因于下腹部、双侧腹股沟处出现大小不等的褐色丘疹、浸润性斑块，其皮面粗糙、干燥，无明显不适 感， 未引起重视，未曾就诊; 3 个月后皮损逐渐扩大至颈部、四肢 近心端，下腹部皮肤水肿变硬，双眼睑水肿，头