微生物的诱发突变实验_亚硝基胍法
实验方法原理亚硝基胍（NTG，N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍）是一种有效的化学诱变剂，在低致死率的情况下也有很强的诱变作用，故有超诱变剂之称。它的主要作用是引起 DNA 链中 GC→AT 的转换，亚硝基胍也是一种致癌因子，在操作中要特别小心，切勿与皮肤直接接触。凡有亚硝基胍的器皿，都要用 1 mol/L NaOH 溶液浸泡，使残余的亚硝基胍分解破坏。实验材料枯草芽孢杆菌 BF7658试剂、试剂盒淀粉培养基LB 液体培养基亚硝基胍碘液无菌生理盐水仪器、耗材玻璃涂棒血细胞计数板振荡混合器实验步骤1. 菌悬液制备1.1 将试验菌斜面菌种挑取一环接种到含 5 ml 淀粉培养液的试管中，置37℃ 振荡培养过夜。1.2 取 0.25 ml 过夜培养液至另一支含 5 ml 淀粉培养液的试管中，置 37℃ 振荡培养 6～7 h。2. 平板制作将淀粉琼脂培养基礅化，倒平板 10 套，凝固后待用。3. 涂平板取 0.2 ml 上述菌液放......阅读全文
反应时间对产物形成的影响实验_二硝基水杨酸法
实验方法原理酶反应的时间进程曲线的起始部分在某一段时间范围内呈直线，其斜率代表酶反应的初速度。随着反应时间的延长，曲线斜率不断减小，说明反应速度逐渐降低，这可能是因为底物浓度降低和产物浓度增高而使逆反应加强等原因所致，因此测定准确的酶活力，必须在进程曲线的初速度时间范围内进行，测定这一曲线和初速度的
关于化学诱变剂的种类介绍
综述： 指引起突变的化学物质。已知的有烷化剂、碱基类似物(base analog)、羟胺(hydroxylamine)、吖啶色素等。常用化学诱变剂的种类及作用机制 1、烷化剂 是栽培作物诱发突变的最重要的一类诱变剂。药剂带有一个或多个活泼的烷基。通过烷基置换，取代其它分子的氢原子称为"烷化
亚磷酰胺法的方法特点
中文名称亚磷酰胺法英文名称phosphoramidite method定 义核酸化学合成的策略之一，合成核酸链的每一个循环是经过高效率且化学性质活泼的核苷酸3′-亚磷酸酰胺中间体，氧化后成为稳定的五价磷酸三酯。为目前最常用的DNA自动化固相合成方法。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与
亚磷酰胺法的合成步骤
第一步是将预先连接在固相载体CPG上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应，脱去其5'-羟基的保护基团DMT，获得游离的5'-羟基。 [2] 第二步，合成DNA的原料，亚磷酰胺保护核苷酸单体，与活化剂四氮唑混合，得到核苷亚磷酸活化中间体，它的3'端被活化，5'-羟基仍
2.4二硝基苯肼法
一、原理： 用酸处理过的活性炭把还原型的抗坏血酸氧化为脱氢型抗坏血酸再继续氧化为二酮古乐糖酸。二酮古乐糖酸与2.4-二硝基苯肼偶联生成红色的络合物。其呈色的强度与二酮古乐糖酸浓度成正比，可以比色定量。 二、试剂： (1) 1％草酸溶液。 (2) 2％草酸溶液。 (3) 酸处理过的活
Q－Exactive高分辨质谱检测分析药物中6种亚硝胺类基因毒...
Q Exactive高分辨质谱检测分析药物中6种亚硝胺类基因毒性杂质前言：亚硝胺的化学式是NR 2 NO（R代表H或烃基）。大量的动物实验已确认，亚硝胺是强致癌物，并能通过胎盘和乳汁引发后代肿瘤。同时，亚硝胺还有致畸和致突变作用。人群中流行病学调查表明，人类某些癌症，如胃癌、食道癌、肝癌、结肠癌和膀
上海有机所亚硝基烯反应和天然产物合成应用获进展
吗啡烷(morphan，或称 2-azabicyclo[3.3.1]nonane) 结构一直以来是合成化学的研究热点。在著名的生物碱morphine 和strychnine 以及近十年来akuammiline 家族系列生物碱的全合成中，该核心骨架是新方法和新策略研究的方向标。尽管吗啡烷的合成方法
微生物液体培养实验——大体积培养法
实验材料细菌试剂、试剂盒胰化蛋白胨酵母提取物氯化钠NaOH仪器、耗材接种针培养瓶摇床实验步骤1. 按1：100的比例将过夜培养物加入到一个无菌烧瓶中，烧瓶的体积应该是培养液体积的5倍以上。2. 于37℃，约300 r/min 剧烈揺动培养。注意事项1. 如果不揺动培养细胞，所用烧瓶的体积应比培
测定微生物数量实验_平板菌落计数法
实验方法原理平板菌落计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的现象进行的，也就是说一个菌落即代表一个单细胞。计数时，先将待测样品作一系列稀释，再取一定量的稀释菌液接种到培养皿中，使其均匀分布于平皿中的培养基内，经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可换算
微生物分离纯化实验——稀释涂布平板法
实验方法原理该方法操作简便，普通用于微生物的分离与纯化。其基本原理包括两方面：1. 选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养、酸碱度、湿度和氧等要求或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其他微生物生长的环境，从面淘汰一些不需要的微生物。2. 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个
良性脑膜瘤的症状及病因
症状 1、头痛是良性脑瘤最早和最多见的症状，见于82%~90%的病人，程度各人不同。初为间歇性，以早晨清醒时及晚间较多且较重。多以额部或两颞部的搏动性钝痛或胀痛和变为持续性。咳嗽、用力、喷嚏、俯身、低头时可使头痛加剧。小儿因颅骨未闭，颅压增高时颅缝分开，故可没有头痛，只诉头昏。头痛往往以一般止
二甲双胍格列本脲胶囊（Ⅱ）的鉴别方法
(1)取本品的内容物适量(约相当于盐酸二甲双胍50mg),加水10ml,振摇使盐酸二甲双胍溶解,滤过,取续滤液2m1,加10%亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-10%氢氧化钠溶液(等体积混合,放置20分钟使用)10ml,3分钟内溶液呈红色(2)取含量测定盐酸二甲双胍项下的供试品溶液,照紫外-可见分光
二甲双胍格列本脲片（Ⅱ）的鉴别方法
(1)取本品的细粉适量(约相当于盐酸二甲双胍omg),加水10ml,振摇使盐酸二甲双胍溶解,滤过,取续滤液2ml,加10%亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-10%氢氧化钠溶液(等体积混合,放置20分钟使用)10ml,3分钟内溶液呈红色。(2)取含量测定盐酸二甲双胍项下的供试品溶液,照紫外-可见分光光
二甲双胍格列本脲片（Ⅰ）的鉴别方法
(1)取本品的细粉适量(约相当于盐酸二甲双胍50mg),加水10ml,振摇使盐酸二甲双胍溶解,滤过,取续滤液2ml,加10%亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-10%氢氧化钠溶液(等体积混合,放置20分钟使用)10m1,3分钟内溶液呈红色(2)取含量测定盐酸二甲双胍项下的供试品溶液,照紫外-可见分光光
二甲双胍格列本脲胶囊（Ⅰ）的鉴别方法
(1)取本品的内容物适量(约相当于盐酸二甲双胍50mg),加水1oml,振摇使盐酸二甲双胍溶解,滤过,取续滤液2ml,加10%亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-10%氢氧化钠溶液(等体积混合,放置20分钟使用)10ml,3分钟内溶液呈红色。(②)取含量测定盐酸二甲双胍项下的供试品溶液,照紫外可见分光
猕猴桃汁抑制小鼠肺癌发展
在所有癌症中，肺癌是5年生存率最低的癌症之一。临床上确定的事实是，各种水果中的活性成分可最大限度地降低罹患癌症等慢性疾病的风险。日本冈山大学研究人员使用小鼠模型证明，猕猴桃汁及其组分异槲皮素有助预防和抑制肺癌发展。研究结果近日发表在《基因与环境》上。 猕猴桃是多酚和维生素C最丰富的来源之一。此前
DNA片段的亚克隆实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 CIPdNTPDNA聚合酶T4聚合酶DTTATP仪器、耗材 水浴锅电泳仪培养箱实验步骤 1. 在20 μl 反应体积内用合适的酶完全消化DNA。75℃加热15 min，灭活酶。如若无需进一步的酶促处理，接歩骤6。2. 如果5’磷酸需要去除，加入2 μl 10×CIP
DNA片段的亚克隆实验
基本方案 凝胶块中DNA连接 实验材料 DNA 试剂、试剂盒
细胞转化的概念、方式和基本过程
体外培养的细胞，由于环境因子因素的影响，有时会发生自发转化，由原来的二倍体核型变成多倍体/异倍体核型，细胞的生长特性也随之发生改变而获得永生化，失去接触抑制，可无限繁殖传代。但之二中自发产生的转化不仅时间长，而且转化率极低，介于10-6-10-4之间，需要大量细胞，成功的把握不大，条件也难以控制。人
微生物污染的排除实验——巨噬细胞吞噬法
实验步骤从动物腹腔采取巨噬细胞，为排除其它细胞成分。可先进行纯化。然后再加入被支原体污染的细胞培养液中混合培养。在培养过程中，为检验支原体是否已被消除干净，可利用支持物培养法验证；取出支持物逐日染色、镜检观察，至支原体已被消除干净为止。注意事项巨噬细胞不纯化亦可，但难免混杂有少许间皮细胞，这些细胞因
测定温度对微生物的影响实验——法二
实验方法原理温度通过影响蛋白质、核酸等生物大分子的结构与功能以及细胞结构如细胞膜的流动性及完整性来影响微生物的生长，繁殖和新陈代谢。过高的环境温度会导致蛋白质或核酸的变性失活，而过低的温度会使酶活力受到抑制，细胞的新陈代谢活动减弱。每种微生物只能在一定的温度范围内生长，低温微生物最高生长温度不超过
异硫氰酸胍酚法植物组织总RNA的制备
异硫氰酸胍—酚法提取RNA的原理如下：GIT与β－巯基乙醇共同作用抑制RNase的活性；GIT与 十二烷基肌氨酸钠 （Sarcosyl）作用使蛋白质变性，从而释放RNA；酸性条件下DNA极少发生解离，同蛋白质一起变性被离心下来，RNA则溶于上清中。该法所提 RNA纯度高完整性好较适合纯化mR
植物组织总RNA的制备：异硫氰酸胍—酚法
异硫氰酸胍—酚法提取RNA的原理如下：GIT与β－巯基乙醇共同作用抑制RNase的活性；GIT与 十二烷基肌氨酸钠 （Sarcosyl）作用使蛋白质变性，从而释放RNA；酸性条件下DNA极少发生解离，同蛋白质一起变性被离心下来，RNA则溶于上清中。该法所提RNA纯度高完整性好较适合纯化mRNA，
维生素C测定：硝基苯肼法
1．原理总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸。样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。 2．适用范围GB12392-90本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。 3.仪器3.1恒温箱：
关于纤维素酶的菌种选育介绍
菌种选育是纤维素酶生产的基础性工作，国内外许多专家进行了大量研究，为了生产高质量的纤维素酶产品，王家林等（1996）在吸收国内外经验的基础上，先后引进了绿色木霉木10、绿色木霉Sn-91014、康氏木霉NT-15、黑曲霉XX-15A，在此基础上，采用了紫外线、特定电磁波辐射、线性加速器，亚硝基胍
关于亚计量沉淀法的介绍
取甲和乙两份等量放射性同位素溶液,各含待测元素。克,其放射性为Ao,放射性比度为w。将乙溶液加到含x克待测元素的试液中,进行同位素稀释后,其放射性比度为s1。如果从甲和乙(已与试液混合)溶液中分另l]等量沉淀出待测元素w0克,分别测得其放射性为Aa和Ab。 这样的方法就避免了用一般化学法定量，
微生物分离纯化实验——平板划线分离法
实验方法原理该方法操作简便，普通用于微生物的分离与纯化。其基本原理包括两方面：1. 选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养、酸碱度、湿度和氧等要求或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其他微生物生长的环境，从面淘汰一些不需要的微生物。2. 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个
硝基芳香污染物微生物降解新机制
硝基芳香化合物是一类重要的化工原料，广泛应用于医药、农药、染料、杀虫剂等化工产品的生产。该类化合物大多具有较高的毒性，在食物链中具有富积和放大效应，对人体具有致畸、致癌、致突变等性质，严重威胁人类健康。2,6-二溴-4-硝基酚（2,6-dibromo-4-nitrophenol，2,6-DBNP
亚硝基R盐分光光度法测定合金钢中的钴
一、方法要点在硫磷混酸介质中，当有乙酸钠缓冲溶液存在下，钴与亚硝基R盐生成红色络合物，根据颜色的深浅而测得钴的含量，铁、镍、铜等元素也与亚硝基R盐形成有色络合物，但可采用硫酸来破坏其络合物的办法而消除干扰。本法适用于含钴量在1％～5％的测定。二、试剂与仪器(1)盐酸(密度为1．19g／mL)、硝酸(
微生物污染的排除实验——抗生素除菌法
实验方法原理细胞培养中用抗生素是杀灭微生物的主要手段；但迄今尚无对抗支原体特效抗生素。各种抗生素性的性质不同，联合应用比单用效果好；一般在已发生微生物污染后，再使用抗生素，常难以根除．预防性应用比污染后使用更好。有时抗生素仅对细菌有抑制作用，而无杀灭效应；反复使用抗生索还能使微生物产生抗药性，且对细