冰冻组织制备及切片实验
实验材料冰冻组织试剂、试剂盒异戊烷OCT多聚-L-赖氨酸仪器、耗材滤纸切片机加热槽冰冻机细毛刷实验步骤1. 将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶（或敞口聚苯乙烯盒）中冰冻，烧杯中加CryoKwik（或异戊烷）。2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签，用镊子将样品放于另一端。 3. 保证CryoKwik 呈液状（必要的话，通过接触一热的金属棒使其熔化），将样品浸于冷的CryoKwik 中1 min。 4. 置带样品的滤纸条于冰冻切片仪的样品槽中，并固定在有一薄层OCT化合物的切片托盘上。图一、切片程序5. 将冰冻切片仪中的样品切片托盘放入预冷的加热槽中或CO2喷射型冰冻器中冰冻，直至OCT化合物凝结，并在冰冻切片仪中放置10 min 以上，使温度均衡。6. 用一预冷的剃须切片，将样品块修成梯形（在不会影响样品形态情况下），撕去滤纸。7......阅读全文
微生物实验冰冻切片的方法及注意事项
一、实验前准备⒈清理实验台及仪器⒉开启冷冻切片机并将冷冻切片机预降至所需温度（- 15~-20 ℃*）⒊准备好处理好的载玻片、刀片、胶水以及药品二、取材解剖之后迅速取出所需的新鲜组织，用干纱布或滤纸擦干后不需固定直接取材（24×24×2mm*）,以防形成冰晶造成切片中形成形状不一的空泡,使细胞内结构
冰冻切片的制作技巧及心得（一）
下面发一个有关冰冻切片制作的资料，来自于国外病理医生的经验和心得，现翻译过来供大家参考，欢迎提出不同的见解。冰冻切片技术1.从锋利的刀片开始我发现使用新的锋利的刀片时常常做出高质量的片子。我觉得在医疗场合中某些尽量省钱的做法显得有些因小失大。一般我对每位患者的标本都使用一组新的刀片，当片子的质量开始
冰冻切片的制作技巧
这个主要看组织固定包埋技术和冰冻切片机性能吧，固定包埋因人而异，因为需要快速出诊断报告，这一点要求切片机的速冻效果好，机器能马上进入工作状态。这一点我觉得深圳瑞沃德厂家的冰冻切片机设计的很好，可以上班前自动唤醒（无需人员手动），上班了，机器也就可以马上进入工作状态。样本快速制冷，2-3分钟就可以了
徕卡冰冻超薄切片技术
徕卡冰冻超薄切片技术是使样品迅速冷冻，然后用冷冻切片机进行徕卡冷冻超薄切片。它省去了普通超簿切片法中繁杂的化学固定与包埋操作，在细胞化学研究中有着特殊的用途。为了很好保存形态结构，必须使游离水形成玻璃态的冰，防止产生冰晶。这就要求很高的冰冻速率（~度/秒），这对于传热性能差的生物材料来说是困难的。
怎么切好冰冻切片
冰冻组织的取材，就是选择好合适的组织块，放在一个小的金属托上进行速冻，冻到一定的硬度后，就在病理切片机进行切片。然后将切片放入酒精或者专有的固定液里固定，最后进行相应的染色及封片。再盖上盖玻片，贴上病理号标签，这样一张冰冻切片就制作完成了。
冰冻切片免疫荧光
实验概要冰冻切片免疫荧光实验原理抗原抗体结合主要试剂固定液、梯度蔗糖、磷酸盐缓冲液、封闭液、一抗、荧光标记的二抗、DAPI、荧光抗淬灭封片剂主要设备冰冻切片机、荧光显微镜或激光共聚焦显微镜实验材料组织切片实验步骤切片1.提取新鲜组织置于4%多聚甲醛中固定；2.梯度蔗糖脱水：10%-20%-30%；3
冰冻切片的制作步骤
冷冻切片 1、取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速放于冷冻台上冰冻，用吸热器压住组织，至包埋剂与组织冻结成白色冰体即可切片（1~3分种）。 2、将冷冻好的组织块，夹紧于切片机持承器上，启动粗进退键，转动旋钮，将组织修平。 3、调好欲切的厚度，根据不同的组织而定，原则上是细胞密集的薄切，纤
冰冻切片免疫荧光
实验原理抗原抗体结合主要试剂固定液、梯度蔗糖、磷酸盐缓冲液、封闭液、一抗、荧光标记的二抗、DAPI、荧光抗淬灭封片剂主要设备冰冻切片机、荧光显微镜或激光共聚焦显微镜实验材料组织切片实验步骤切片提取新鲜组织置于4%多聚甲醛中固定；2.梯度蔗糖脱水：10%-20%-30%；3.冰冻包埋剂包埋并切片，切片
生命科学拉曼测试样品制备篇—冰冻切片
拉曼光谱是一种无损、无标记、非接触式的的分析检测方法，可以为生命科学/医学研究领域的样品提供丰富的分子层面的信息。生命科学/医学研究样品有许多不同的处理和保存方法，本系列教程将介绍如何对生命科学/医学研究样品进行处理及不同处理方法如何进行拉曼测试准备。 冰冻切片 取材 取新鲜组织进行固定或
冰冻切片包埋剂及使用方法
冰冻切片包埋剂是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物，目前已广泛用于免疫组化实验室中，其用途是在冰冻切片时支撑组织，以增加组织的连续性，减少皱折及碎裂。又因OCT 混合物为水溶性，故在漂片时可溶于水，所以在以后的染色中不会增加背景染色。利用OCT 混合物（opti-mum cutting tempe
冰冻切片机小知识
冷冻切片是一种组织不经过脱水、透明处理 ,不需石蜡包埋的制片方法 。冷冻切片分为直接冷冻切片法和明胶冷冻切片法。前者根据组织的制冷方法不同有半导体制冷切片法、甲醇制冷切片法、二氧化碳制冷切片法和低温 恒冷箱冷冻切片法。 CryoStar NX50 型冰冻切片机的设计遵循在市面上流行的 Cry
徕卡冰冻式切片机切片制样方法
电镜样品制备技术直接影响样品的结构和反差。制备高质量的超薄切片，是发挥透 射电子显微镜优良性能的前提。透射电子显微镜的分辨率理论上可达到o．3nm左右， 但是六于样品制备技术的限制，分辨率很难达到理论值。对于生物样品来说，一般只能 达到2nm的水平。 高质量的超薄切片基本特征：①样品应该能耐受电子束
冷冻组织切片的制作实验
实验试剂液氮，干冰，1％明胶，4％多聚甲醛，PBS，含1％NP-40的PBS，3％BSA／PBS稀释抗体，辣根过氧化物酶标记的二抗，DAB／金属盐试剂，3％过氧化氢，0.3％(W／V)氯化镍贮存液，Harris苏木精，乙醇实验设备载玻片，Whatman 1＃滤纸，低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织
组织病理实验_石蜡切片法
实验方法原理石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。实验
冰冻组织固定和蔗糖浸制实验
实验材料冰冻组织试剂、试剂盒PBSPFA蔗糖实验步骤1. 于4℃，在2%PFA固定液（做免疫组织化学时）或4%PFA固定液（做原位杂交时） 中，固定小的组织样品或分离的胚胎（如第7、第8天的小鼠胚胎）30 min。2. 在PBS中清洗组织样品2次。3. 在30%蔗糖中浸制样品，直至组织沉下（1~3
冰冻组织固定和蔗糖浸制实验
实验方法原理 实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 PBSPFA蔗糖实验步骤 1. 于4℃，在2%PFA固定液（做免疫组织化学时）或4%PFA固定液（做原位杂交时） 中，固定小的组织样品或分离的胚胎（如第7、第8天的小鼠胚胎）30 min。2. 在PBS中清洗组织样品2次。3. 在30%蔗糖中浸制样品，直
冰冻切片组织蛋白酶B（CATHEPSIN－B）活性原位荧光染色检...
主要用途冰冻切片组织蛋白酶B（CATHEPSIN B）活性原位荧光染色检测试剂是一种旨在通过荧光染料甲酚紫标记的多肽底物作为探针，自由进入细胞内，受到组织蛋白酶B水解后，呈现荧光现象，以分析样品酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种冰冻组织内组织蛋白酶B的
冰冻切片组织冯库萨（VON－KOSSA）染色试剂盒使用说明
主要用途冰冻切片组织冯库萨（VON KOSSA）染色试剂是一种旨在使用银还原技术，分析固定处理的组织细胞样本中钙沉积现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良VON KOSSA方法、成功实验证明的。主要适用于冰冻切片的组织钙沉积和钙化结节检测；同时也适合动物原生代或培养细胞的检测。广泛用
冰冻切片组织冯库萨（VON－KOSSA）染色试剂盒使用说明
冰冻切片组织冯库萨（VON KOSSA）染色试剂盒产品说明书（中文版） 主要用途 冰冻切片组织冯库萨（VON KOSSA）染色试剂是一种旨在使用银还原技术，分析固定处理的组织细胞样本中钙沉积现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良VON KOSSA方法、成功实验证明的。主要适用
用于－PCR－的模板－DNA－制备实验——冰冻片
实验步骤1. 将 10 μl 冰冻切片直接放入含组织裂解液的离心管中。2. 无菌尖头刀片刮下，放入 300～900 μl 组织裂解液中，并加入 20 mg/ml 蛋白酶 K（PK）10～15 μl，封口膜封口，置 55℃ 3 h 以上。3. 其间用指轻弹离心管以利裂解。若有沉淀，再加入 5～10 μ
组织学——组织切片
· Histological techniques (William H. Heidcamp)Very detailed guide to histological techniques, like fixation, dehydration, embedment and subs
TUNEL分析实验——组织切片的－TUNEL－染色
实验材料组织试剂、试剂盒甲醛NaOHPBS二甲苯乙醇蛋白酶 KTris-HCl 溶液仪器、耗材Parafilm 膜实验步骤1. 取下组织，立即用新制备的 4% 甲醛固定，室温过夜。用多聚甲醛制备 4% 的甲醛溶液，在 100 ml 水中加 8 g 多聚甲醛，在通风橱中加热至 50~60℃，加几滴 1
免疫荧光操作步骤（漂片，冰冻切片）
实验概要免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定
免疫荧光操作步骤（漂片，冰冻切片）
实验概要免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定
冰冻切片组织蛋白酶B活性原位荧光染色检测试剂盒
冰冻切片组织蛋白酶B（CATHEPSIN B）活性原位荧光染色检测试剂盒产品说明书（中文版） 主要用途 冰冻切片组织蛋白酶B（CATHEPSIN B）活性原位荧光染色检测试剂是一种旨在通过荧光染料甲酚紫标记的多肽底物作为探针，自由进入细胞内，受到组织蛋白酶B水解后，呈现荧光现象，
组织固定、包埋及切片实操指南
如何做出一张合格的组织切片？ 一般要先取材→固定→透明→包埋→切片，最后进行染色组化等操作。本文着重叙述取材以后如何进行包埋和切片。 包埋可分为OCT包埋（冰冻切片）与石蜡包埋。 冰冻切片对于组织的抗原性保留比较好，但是形态保留比较差，一般用来做原位杂交ISH，免疫荧光IF。冰冻切片较厚一
小鼠组织切片免疫组化实验步骤
实验概要免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学
小鼠组织切片免疫组化实验步骤
实验概要免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学
小鼠组织切片免疫组化实验步骤
材料二甲苯 酒精（100％，95％） EDTA抗原修复工作液（pH8.0，稀释50倍使用） 0.5M Tris-NaCl (TBS) pH7.4（稀释10倍使用） DAB显色液（临用前配制：试剂盒A、B、C各50ul，于1ml水中混匀）。方法1. 石蜡切片置60℃烘箱中烘烤过夜 2.
冷冻组织切片制作
实验试剂液氮，干冰，1％明胶，4％多聚甲醛，PBS，含1％NP-40的PBS，3％BSA／PBS稀释抗体，辣根过氧化物酶标记的二抗，DAB／金属盐试剂，3％过氧化氢，0.3％(W／V)氯化镍贮存液，Harris苏木精，乙醇实验设备载玻片，Whatman 1＃滤纸，低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织