细胞骨架观察实验——鬼笔环肽显示微丝蛋白染色法
实验材料细胞试剂、试剂盒PBS三硝基甲苯甘油仪器、耗材显微镜实验步骤1. 盖片培养细胞（70 %～80 %汇合），PBS洗3 次；2. 2 %的甲醛/PBS 液（甲醛按37 %）固定3 分钟；3. 0.5 %的三硝基甲苯/PBS处理3 次，每次10 分钟；4. PBS漂洗3 次；5. 用罗丹明（Rodamine）标记的鬼笔环肽（Phalloidin）（1:10）室温中反应15 分钟；6. PBS漂洗3 次；7. 60 %甘油+荧光防淬剂封片；8. 荧光显微镜检。展开......阅读全文
细胞骨架观察实验——鬼笔环肽显示微丝蛋白染色法
实验材料细胞试剂、试剂盒PBS三硝基甲苯甘油仪器、耗材显微镜实验步骤1. 盖片培养细胞（70 %～80 %汇合），PBS洗3 次；2. 2 %的甲醛/PBS 液（甲醛按37 %）固定3 分钟；3. 0.5 %的三硝基甲苯/PBS处理3 次，每次10 分钟；4. PBS漂洗3 次；5. 用罗
细胞骨架观察实验
鬼笔环肽显示微丝蛋白染色法 抗管蛋白免疫染色法 考马斯亮蓝染色法 实验材料 细胞
关于鬼笔环肽的物质介绍
鬼笔环肽是最早发现的环状肽之一。它是从Amanita phalloides中分离出来的，并于1937年由Feodor Lynen和Ulrich Wieland结晶。它的结构不同寻常，因为它包含一个半胱氨酸-色氨酸键，形成一个双环七肽。这种连接以前没有被表征过，这使得鬼笔环肽的结构阐明变得更加困难
细胞骨架观察实验—抗管蛋白免疫染色法
实验方法原理细胞骨架微管的主要成分主要为管蛋白（Tublin），用免疫荧光法能显出其清晰结构。实验材料细胞试剂、试剂盒PBS丙酮甲醛仪器、耗材碟皿恒温箱实验步骤1. 细胞培养用支持物细胞培养法，把细胞培养在小盖片上；2. 漂洗用镊子挟出小盖片，在温PBS中漂洗3 次，每次30 秒；3. 固定在
细胞骨架的荧光探针标记方法
细胞骨架主要有微管(micmtuble, MT)，微丝(microfilament, MF)，中间丝(intermediate filament, IF三种类型。它们分别由不同的蛋白单体组装而成，其中微管蛋白(tubulin)、肌动蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是细胞骨架的重要组
关于鬼笔环肽用作显影剂的介绍
荧光鬼笔环肽（红色）标记内皮细胞中的肌动蛋白丝鬼笔环肽的特性使其成为研究F-肌动蛋白在细胞中分布的有用工具，方法是用荧光类似物标记鬼笔环肽并用它们对肌动蛋白丝染色以进行光学显微镜检查。鬼笔环肽的荧光衍生物在定位活细胞或固定细胞中的肌动蛋白丝以及体外观察单个肌动蛋白丝方面非常有用。开发了一种高分辨
关于鬼笔环肽的基本介绍
鬼笔环肽（phalloidin），是从一种剧毒蘑菇(Amanita phalloides（Vaill ex Fr.）Secr.) （伞菌目，毒伞属的毒伞）中分离出来的一种多肽物质，属于毒伞肽类毒素，是一种强烈毒素。无色，细针状结晶。鬼笔环肽中毒的主要症状是由于肝细胞的破坏引起的急性饥饿。它通过结
简述鬼笔环肽的作用机理
鬼笔环肽结合F-肌动蛋白，防止其解聚并中毒细胞。 鬼笔环肽特异性结合在F-肌动蛋白亚基之间的界面，将相邻的亚基锁定在一起。 鬼笔环肽（一种双环七肽）与肌动蛋白丝的结合比与肌动蛋白单体的结合更紧密，从而导致肌动蛋白亚基从丝端解离的速率常数减小，这通过防止丝解聚而基本稳定了肌动蛋白丝。此外，发现鬼笔
关于鬼笔环肽的毒性介绍
发现后不久，科学家将鬼笔环肽注射入小鼠体内，并通过IP注射发现其LD50为2 mg / kg。 当暴露于最小致死剂量时，这些小鼠死亡需要几天时间。 鬼笔环肽中毒的唯一明显副作用是极度饥饿。 这是因为鬼笔环肽仅通过胆汁盐膜转运蛋白被肝脏吸收。 一旦进入肝脏，鬼笔环肽会结合F-肌动蛋白，从而阻止其解
细胞骨架观察实验—考马斯亮蓝染色法
实验方法原理荧光免疫染色法显示细胞骨架具有清晰优点，但操作过程较复杂；考马斯亮蓝染色法简便易行，清晰度稍差，但如分化处理适当能提高清晰度。实验材料细胞试剂、试剂盒磷酸二氢钠磷酸氢二钠戊二醛甲醇冰醋酸蒸溜水考马斯亮蓝仪器、耗材培养瓶实验步骤1. 固定液准备0.1 M 磷酸二氢钠（NaH2PO4·2H
细胞骨架的显示和观察
一、实验目的 掌握植物细胞骨架的光镜标本制作方法。二、实验原理 细胞骨架是指细胞质中纵横交错的纤维网络结构，按组成成分和形态结构的不同可分为微管、微丝和中间纤维。它们对细胞形态的维持、细胞的生长、运动、分裂、分化和物质运输等起重要作用。光学显微镜下细胞骨架的形态学观察多用1% Triton
关于鬼笔环肽的生物合成介绍
鬼笔环肽是一种双环七肽，含有不寻常的半胱氨酸-色氨酸键。 编码鬼笔环肽合成的基因是死亡帽蘑菇中MSDIN家族的一部分，编码34个氨基酸的前肽。 脯氨酸残基位于七个残基区域的两侧，稍后将变成鬼笔环肽。 翻译后，必须对肽进行蛋白水解切除，环化，羟基化，使Trp-Cys交联形成色氨酸，并差向异构化以形
关于鬼笔环肽的配制内容介绍
0.1mg鬼笔环肽溶于1ml无水甲醇（也可用DMSO或无水乙醇溶解）配成贮存液，可在-20度避光的条件下长期保存，工作液的浓度为5ug/ml，由贮存液加生理盐水PBS稀释20倍即可。 一、染色程序 1、生理盐水PBS清洗细胞2次，每次10分钟； 2、3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分
细胞形态的观察实验——微丝的电镜照片观察
实验材料微丝仪器、耗材光学显微镜镊子平皿载片实验步骤1. 恒河猴脊髓内神经纤维中微丝电镜照片，可见微丝是实心结构，直径5~8cm。2. 它均匀地分散于细胞基质中，或排列成束和网状。
细胞骨架系统的显示与观察
细胞骨架(cytoskeleton)是指真核细胞胞质中错综复杂的纤维状网络结构，主要包括微管（microtubule，MT，20~25 nm）和纤丝（filament）两大类；另外，胞质中还散布着一些3~6 nm的细小纤维。按纤维的直径、组成成分以及组装结构的不同，纤丝又可分为微丝（micr
细胞中的微丝染色及微丝与细胞形态的实验观察
一、成纤维细胞微丝的染色及其对细胞松驰素B的反应(一)原理微丝普遍存在于多种细胞，对细胞的形状和运动有一定作用。细胞松驰素B可与微丝的亚单位肌动蛋白结合，从而破坏微丝，改变细胞的形状。(二)细胞松驰素B处理成纤维细胞与染色观察1、在平皿中有三张成纤维细胞贴壁生长的盖片，在超净工作台内将一张盖片移入另
细胞中的微丝染色及微丝与细胞形态的实验观察
实验概要掌握考马斯亮蓝R250 染细胞骨架微丝的方法，了解动物细胞骨架的基本形态结构。实验原理真核细胞胞质中纵横交错的纤维网称为细胞骨架(cytoskeleton)。根据纤维直径、组成成分和组装结构的不同，分为微管(microtubule, MT)、微丝(microfilament, MF) 和中
关于鬼笔环肽的化学合成介绍
由于鬼笔环肽因其结合和稳定肌动蛋白聚合物的能力而被开发利用，但细胞无法轻易吸收，因此科学家发现鬼笔环肽衍生物在研究中更有用。 本质上，它遵循典型的使用羟脯氨酸的小肽合成。 合成的主要困难是色氨酸的形成（半胱氨酸-色氨酸交联）。 以下是Anderson等人进行的一般合成机理。在2005年进行了a
量子点标记技术实现分子马达在活细胞的示踪
基于量子点的单分子荧光示踪技术，对于体外研究分子马达在细胞骨架上的行走模式具有重要意义。目前对于细胞内分子马达运动特性的研究，是通过对内吞体、黑素体等细胞器的示踪而间接实现的。这些细胞器通过分子马达运输，因此，对细胞器的运动监测可间接分析分子马达的运动特性。巴黎第六大学Giovanni Capp
植物细胞骨架的显示及光镜观察
实验概要植物细胞骨架的显示及光镜观察实验原理 细胞内由微丝、微管、中间纤维等交织形成一个十分复杂的立体网络结构。它们对于细胞形状的保持、细胞内物质运输、细胞运动、细胞内各结构相对位置的固定都有重要作用，故而称为细胞骨架。 细胞骨架在通常固定条件下不稳定，如低温、高压、酸处理等。当采用适当
自动细胞成像系统进行细胞表型的多参数评估
简介自动细胞成像是一种分析化合物对包括细胞形态，活力和标志物表达在内的细胞表型的影响的有效方法。这里，我们将展示ImageXpress® Pico自动细胞成像系统和CellReporterXpress 自动成像分析软件如何应用于化合物影响的表型分析。成像和分析方法可提供工具来鉴定细胞活力，细
关于细胞骨架—微丝的基本信息介绍
细胞骨架—微丝微丝（microfilament）也普遍存在于所有真核细胞中，是一个实心状的纤维，直径为4nm-7nm一般细胞中含量约占细胞内总蛋白质的1%-2%，但在活动较强的细胞中可占20%-30%。在一般细胞主要分布于细胞的表面，直接影响细胞的形状。微丝具有多种功能，在不同细胞的表现不同，在
关于细胞骨架系统微丝的结构功能介绍
１、细胞骨架系统微丝的结构 较微管更细的纤丝，D=5（6）—8nm,由球形肌动蛋白和肌球蛋白聚合而成的细丝彼此缠绕成双螺旋丝。不同的细胞还另有不同的蛋白质与之结合。成束或分散在基质内。 ２、细胞骨架系统微丝的功能 ①起更致密的支架作用。 ②与微管配合，控制细胞器的运动和。 ③与胞质流动
细胞形态的观察实验——成纤维细胞微丝的染色
实验方法原理微丝普遍存在于多种细胞，对细胞的形状和运动有一定作用。细胞松驰素B可与微丝的亚单位肌动蛋白结合，从而破坏微丝，改变细胞的形状实验材料成纤维细胞试剂、试剂盒PBSTriton X-100M-缓冲液戊二醛固定液考马斯亮兰染液细胞松驰素BDMEM仪器、耗材光学显微镜镊子平皿载片吸水纸恒温箱实验
技术和方案13－已固定细胞的肌动蛋白染色
试剂、试剂盒PBS固定液实验步骤鬼笔环肽专一性地结合 F 肌动蛋白，荧光标记的鬼笔环肽染细胞与肌动蛋白抗体的染色模式类似。1.在 500 ml 三角瓶中振荡培养 25 ml 酵母菌至密度为 2X107 个/ml。2.添加 17 ml 10% 甲醛（EM 电子显微级）到培养基中至终浓度 4%，在酵母菌
淀粉样β诱导的F肌动蛋白去稳定性突棘丢失对阿尔茨海。。。
淀粉样β诱导的F-肌动蛋白去稳定性突棘丢失对阿尔茨海默症形成的作用阿尔茨海默氏病（AD）是一种神经退行性疾病，表现为认知功能受损和记忆力减退。神经元形态的各种变化是AD临床症状的基础，包括突触丢失；在AD的小鼠模型中，这通过树突棘的丧失来表示。 树突棘富含主要的细胞骨架蛋白螺旋丝状肌动蛋白（F-ac
肌动蛋白的影响简介
有许多毒素可以通过阻止肌动蛋白聚合（latrunculin和细胞松弛素D）或通过稳定它（鬼笔环肽）来干扰肌动蛋白的动力学： Latrunculin是一种由海绵产生的毒素，它与G-肌动蛋白结合，阻止它与微丝结合。 细胞色素D是由真菌产生的生物碱，其与F-肌动蛋白的（+）末端结合，阻止添加新单体
细胞肌动蛋白的影响
有许多毒素可以通过阻止肌动蛋白聚合（latrunculin和细胞松弛素D）或通过稳定它（鬼笔环肽）来干扰肌动蛋白的动力学：Latrunculin是一种由海绵产生的毒素，它与G-肌动蛋白结合，阻止它与微丝结合。细胞色素D是由真菌产生的生物碱，其与F-肌动蛋白的（+）末端结合，阻止添加新单体。已发现Cy
肌动蛋白的生理影响
有许多毒素可以通过阻止肌动蛋白聚合（latrunculin和细胞松弛素D）或通过稳定它（鬼笔环肽）来干扰肌动蛋白的动力学：Latrunculin是一种由海绵产生的毒素，它与G-肌动蛋白结合，阻止它与微丝结合。细胞色素D是由真菌产生的生物碱，其与F-肌动蛋白的（+）末端结合，阻止添加新单体。已发现Cy
原代细胞骨架的染色方法！
一、微丝的显示方法步骤：1、用PBS液漂洗盖片培养的原代细胞3次，每次30s；2、用2%的甲醛/PBS液固定原代细胞3min；3、用0.5%的PBS处理3次，每次10min；4、PBS漂洗3次；5、用罗丹明（rhodamine）标记的鬼笔环肽（phalloidin）（1：10）室温中反应15min；