动物病毒毒力测定实验——TCID50的测定方法

病毒感染能力测定是评估其毒力的常用方法之一,通常采用测定实验动物的半数致死量(50% lethel dose,LD50)和测定细胞培养物的半数组织(细胞)培养物感染量(50% tissue culture infectious dose,TCID50)来评估病毒的感染能力(毒力)。用细胞培养物测定病毒的 TCID50 较实验动物的 LD50 简便、经济,且易控制实辁条件,加之细胞系的同质性高,敏感性比较一致,沒:有个体间的遗传差异。所以本实验介绍 TCID50 的测定方法。实验方法原理溶细胞性病毒的毒力与其致细胞病变的能力直接相关,固可用不同含量的病毒液接种敏感的宿主细胞培养物测定毒力。实验中病毒的毒力以其致细胞病变效应(cytopathic effect CPE)的程度确定,即观察病毒致细胞病变的最高和最低量,以半数细胞病变为病毒感染剂量。然而,实验中所能观察到的是不同稀释病毒致细胞病变的定性结果......阅读全文

实验动物局部麻醉方法

动物局部麻醉方法:用局部麻醉药阻滞周围神经末梢或神经干、神经节、神经丛的冲动传导,产生局部性的麻醉区,称为局部麻醉。其特点是动物保持清醒,对重要器官功能干扰轻微,麻醉并发症少,是一种比较安全的麻醉方法。适用于大中型动物各种短时间内的实验。局部麻醉操作方法很多,可分为表面麻醉、局部浸润麻醉、区域阻滞麻

微生物实验纸片法测定测定抗生素效价方法的实验步骤

实验前准备:4个培养皿,2支移液管,1支涂布棒,并将培养皿包好灭菌,取一定的蒸馏水灭菌制成无菌水.1、配制营养琼脂培养基:称取营养琼脂9.6g,加入300ml蒸馏水,加热煮沸后将培养基导入锥形瓶,然后包扎灭菌(121°C,20min).2、倒平板:在无菌环境操作下,将上述培养基倒入4个平板,并编号1

病毒的培养方法实验

实验方法原理 鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。实验步骤 1.  鸡胚的检查将9~11 日龄鸡胚置于检卵器上,照视观察

清除艾滋病病毒新法动物实验成功

  德国研究人员22日报告说,他们正开发一种新方法,有望帮助患者从体内清除艾滋病病毒。目前动物实验已取得成功。   艾滋病病毒与其他逆转录病毒一样,在繁殖时其遗传物质会整合到人体宿主基因组上进行复制。虽然目前的抗逆转录病毒疗法可有效抑制艾滋病病毒繁殖,但却不能根除这类整合性病毒。因此病毒可以在治疗期

溶菌酶的测定实验

实验方法原理肽聚糖乙酰胞壁酰脱氢酶,胞壁酸酶。在肽聚糖中,水解在 N-乙酰胞壁酸和 N-乙酰基-D-葡糖胺残基的 1,4-β-键(这一过程也会弱化几丁质酶的活性)细菌滕黄微球菌(M.luteus)裂解以后,取混浊液进行酶的实验。实验材料酶样品试剂、试剂盒磷酸钾滕黄微球菌冷冻细胞的悬浊液仪器、耗材分光

溶菌酶的测定实验

实验方法原理 肽聚糖乙酰胞壁酰脱氢酶,胞壁酸酶。在肽聚糖中,水解在 N-乙酰胞壁酸和 N-乙酰基-D-葡糖胺残基的 1,4-β-键(这一过程也会弱化几丁质酶的活性)细菌滕黄微球菌(M.luteus)裂解以后,取混浊液进行酶的实验。实验材料 酶样品试剂、试剂盒 磷酸钾滕黄微球菌冷冻细胞的悬浊液仪器、耗

溶菌酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 肽聚糖乙酰胞壁酰脱氢酶,胞壁酸酶。在肽聚糖中,水解在 N-乙酰胞壁酸和 N-乙酰基-D-葡糖胺残基的 1,4-β-键(这一过程也会弱化

脲酶的测定实验

pH 稳定计法 光度计测定法             实验方法原理 实验材料 脲酶

谷胱甘肽的测定实验

双抗夹心ELISA法 免疫组织法             实验方法原理 先将康体包被于反应板上,加入待测抗原,然后再加入酶标康体,显色后即可测得抗原含量。

熔点的测定实验

实验方法原理纯净的晶体有机物具有一定的熔点,熔程不超过0.5℃,当有杂质时熔点下降,熔程加宽。利用测定熔点可以判断出固体有机化合物的纯度,鉴别不同的有机化合物。熔点:在大气压下,化合物受热由固态转变为液态,此时固液两相蒸气压一致,固液两相平衡共存,这时的温度称为化合物的熔点。试剂、试剂盒乙酰苯胺苯甲

谷胱甘肽的测定实验

实验方法原理 先将康体包被于反应板上,加入待测抗原,然后再加入酶标康体,显色后即可测得抗原含量。实验材料 抗体试剂、试剂盒 碳酸盐缓冲液Na2CO3磷酸盐缓冲液NaClKClTMB二甲基亚砜牛血清蛋白仪器、耗材 酶标仪培养箱实验步骤 一、材料准备1.  包被液:0.05 mol/l(pH9.6)碳酸

谷胱甘肽的测定实验

谷胱甘肽(glutathiose,r-glutamyl cysteingl +glycine,GSH)是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽,由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成。存在于几乎身体的每一个细胞。实验方法双抗夹心ELISA法 免疫组织法 实验方法原理 先将康体包被于反应板上,加入待测抗原,然后再加入酶

脲酶的测定实验

实验方法原理 实验材料 脲酶试剂、试剂盒 脲HCl仪器、耗材 pH 稳定计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」9 ml 0.2 mol/L 脲0.2 ml 脲酶自动滴定管充满 0.1 mol/L HCl,通过 pH 稳定计使得 pH 保持在 6.1,大约每 10 min 记录一次通过自动滴定管每

熔点的测定实验

实验方法原理 纯净的晶体有机物具有一定的熔点,熔程不超过0.5℃,当有杂质时熔点下降,熔程加宽。利用测定熔点可以判断出固体有机化合物的纯度,鉴别不同的有机化合物。熔点:在大气压下,化合物受热由固态转变为液态,此时固液两相蒸气压一致,固液两相平衡共存,这时的温度称为化合物的熔点。试剂、试剂盒 乙酰苯胺

实验室水分测定方法蒸馏法测定水分的操作和计算

准确称2.00~5.00g样品→于250ml水分测定蒸馏瓶中→加入约50~75ml有机溶剂→接蒸馏装置→徐徐加热蒸馏→至水分大部分蒸出后→在加快蒸馏速度→至刻度管水量不在增加→读数计算:水分=V/WV——刻度管中水层的容量mlW——样品的重量(g)

mBio:惊人发现!肥胖或会增加流感病毒的毒力!

  日前,一篇发表在国际杂志mBio上的研究报告中,来自圣犹大儿童研究医院等机构的科学家们通过研究发现,肥胖或会促进流感病毒的毒力,相关研究发现或许部分能够解释为何流感病毒每年变化很大,目前研究人员非常担忧,因为肥胖的流行已经对全球的公共健康的威胁越来越大,目前全球有超过50%的成年人都处于超重或肥

测定动物源食品中甲状腺抑制剂残留量实验

气相色谱-质谱法             实验材料 动物组织 牛奶 尿样

麻疹病毒IgM测定的简介

  麻疹是由麻疹病毒引起的一种急性病毒性传染病,以皮丘疹、发热及呼吸道症状为特征,是危害儿童生命健康极其严重的传染病之一。WHO已把麻疹列为第3类消灭的急性传染病,我国也提出控制麻疹的根本措施是提高免疫接种率。虽然麻疹疫苗的问世使麻疹发病率大大下降,但由于麻疹是一种人类和灵长类共患的疾病,并且还有病

饲料中粗蛋白测定的实验方法

饲料分析是饲料生产中其原料和品质鉴定的重要依据,也是评价饲料质量好坏的标准。就比如饲料中粗蛋白含量将直接决定饲料的营养价值,因此,饲料分析过程少不了粗蛋白的检测,不仅如此,还需要掌握饲料粗蛋白测定的实验方法,用到的实验设备是粗蛋白测定仪,样品制备及操作方法如下:选取具有代表性的试样用四分法缩减至20

中和试验的检查过程相关介绍

  (一)简单定性中和试验  本法主要用于检出病料中的病毒,亦可进行初步鉴定或定型。先根据病毒易感性选定试验动物(或鸡胚、细胞培养)及接种途径。将病料研磨,并稀释成一定浓度(约100 LD50-1 000LD50或TCID50)。污染的病料需加抗生素(青霉素、链霉素各200-1 000单位),或用细

中和试验的检查过程

(一)简单定性中和试验  本法主要用于检出病料中的病毒,亦可进行初步鉴定或定型。先根据病毒易感性选定试验动物(或鸡胚、细胞培养)及接种途径。将病料研磨,并稀释成一定浓度(约100 LD50-1 000LD50或TCID50)。污染的病料需加抗生素(青霉素、链霉素各200-1 000单位),或用细菌滤

中和试验的检查过程

(一)简单定性中和试验  本法主要用于检出病料中的病毒,亦可进行初步鉴定或定型。先根据病毒易感性选定试验动物(或鸡胚、细胞培养)及接种途径。将病料研磨,并稀释成一定浓度(约100 LD50-1 000LD50或TCID50)。污染的病料需加抗生素(青霉素、链霉素各200-1 000单位),或用细菌滤

中和试验的检查过程

(一)简单定性中和试验  本法主要用于检出病料中的病毒,亦可进行初步鉴定或定型。先根据病毒易感性选定试验动物(或鸡胚、细胞培养)及接种途径。将病料研磨,并稀释成一定浓度(约100 LD50-1 000LD50或TCID50)。污染的病料需加抗生素(青霉素、链霉素各200-1 000单位),或用细菌滤

饲料粗蛋白测定的测定方法

实验概要 Method for the determination of crude protein in feedstuffs 本标准参照采用ISO5983-1979《动物饲料-氮含量的测定和粗蛋白含量计算》。 1  主题内容与适用范围 本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。 本标准适用于配合饲

用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验4

在细胞培养板内做病毒空斑形成单位试验实验材料病毒试剂、试剂盒95% 酒精胰酶含 5%小牛血清的 Eagle仪器、耗材细胞培养板实验步骤(1) 用细胞培养板 (6孔),若用旧板,洗净后浸于 95% 酒精中5 min, 再用紫外线照射 2-4 h备用,新板可直接使用。(2) 将传代细胞系经胰酶消化分散后

用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验3

用传代细胞系平皿法测量病毒空斑形成单位实验材料病毒细胞系试剂、试剂盒含 10% 小牛血清、89%水解乳蛋白一酵母浸液培养液仪器、耗材培养皿实验步骤(1) 将单层细胞 (2X 106/ml, 6 ml)培养在直径 60 mm 的平皿上,生长液为含 10% 小牛血清、89%水解乳蛋白一酵母浸液培养液,加

用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验2

虫媒病毒在鸡胚成纤维细胞中的空斑形成单位试验实验方法原理病毒常杀死被病毒感染的细胞 即产生致细胞病变作用。用只染活细胞(如中性红)或只染死细胞(如台盼兰)的染料对单层细胞染色以检测空斑。也可以使用活性染料溴化二苯基四氮唑(MTT) 进行染色,使用 MTT 的优点是黄色的 MTT 能将活细胞染成深蓝色

实验室方法之氨氮的不同测定方法

  氨氮(NH3-N)以游离氨(NH3)或氨盐(NH4+)形式存在水中,两者的组成比取决于水的pH值。当pH值偏高时,游离氨的比例较高,反之,则氨盐的比例较高。   水中氨氮的来源主要为生活水中的含氮有机物受微生物作用的分解产物,某些工业废水,如:焦化废水和合成氨化肥厂废水等,以及农田排水。此外,

血糖测定实验

酶法             实验方法原理 血糖中β-D葡萄糖在葡萄糖氧化酶催化下,氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下,氧化氧的受体——邻联甲苯胺产生有色化合

血糖测定实验

实验方法原理 血糖中β-D葡萄糖在葡萄糖氧化酶催化下,氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下,氧化氧的受体——邻联甲苯胺产生有色化合物。在有足够的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶存在下,形成有色化合物的量和葡萄糖的量成正比,并在625 nm处有最大吸收。实验材料 葡萄糖试剂、试剂盒 邻联