小鼠超数排卵及附植前不同发育阶段胚胎采集与结构观察
哺乳动物附植前胚胎是胚胎学、发育生物学及动物细胞与胚胎工程的重要研究对象(1)研究哺乳动物的生殖结构(2)对不同发育阶段的干预的影响(3)遗传病的诊断。显微镜观察法实验方法原理小鼠体内精卵结合形成受精卵的过程是在输卵管壶腹部进行。小鼠第一次卵裂在受精后18~24小时;以后每隔12小时左右分裂一次。根据这一规律,基本上可以推算出早期卵裂胚胎各个时期的时龄,2-细胞为受精后约24~38小时,4-细胞为38~50小时,8-细胞为50~60小时,16-细胞为60~72小时。小鼠胚胎卵裂到8-细胞阶段时开始致密化,致密化的细胞分裂后,形成16-细胞的桑椹胚,在桑椹胚阶段,胚胎由输卵管进入子宫。在16~32细胞期(66~82小时)出现小的囊腔而进入囊胚期。囊胚期可分为四个阶段:16~32细胞期,囊胚腔很小,不易看见,为早期囊胚;有完整的囊胚腔,并能明显区分为内细胞团时为晚期囊胚;囊腔的体积进一步扩大,镜下像一个水泡,内细胞团相对较小的时期为......阅读全文
小鼠超数排卵及附植前不同发育阶段胚胎采集与结构观察
哺乳动物附植前胚胎是胚胎学、发育生物学及动物细胞与胚胎工程的重要研究对象(1)研究哺乳动物的生殖结构(2)对不同发育阶段的干预的影响(3)遗传病的诊断。显微镜观察法实验方法原理小鼠体内精卵结合形成受精卵的过程是在输卵管壶腹部进行。小鼠第一次卵裂在受精后18~24小时;以后每隔12小时左右分裂一次。根
小鼠超数排卵及附植前不同发育阶段胚胎采集与结构观...
小鼠超数排卵及附植前不同发育阶段胚胎采集与结构观察实验实验方法原理 小鼠体内精卵结合形成受精卵的过程是在输卵管壶腹部进行。小鼠第一次卵裂在受精后18~24小时;以后每隔12小时左右分裂一次。根据这一规律,基本上可以推算出早期卵裂胚胎各个时期的时龄,2-细胞为受精后约24~38小时,4-细胞为38~5
小鼠输卵管卵母细胞采集与结构观察实验
显微镜观察法 实验方法原理 哺乳动物的卵子发生在卵巢的卵泡内进行。在卵母细胞成熟发育阶段,初级卵母细胞发生生发泡破裂(germinal vesicle b
小鼠输卵管卵母细胞采集与结构观察实验
实验方法原理 哺乳动物的卵子发生在卵巢的卵泡内进行。在卵母细胞成熟发育阶段,初级卵母细胞发生生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)现象,并完成第一次成熟分裂(减数分裂,以同源染色体分离为特征),并排出第一极体。一般认为,GVBD的发生和第一极体的排出是卵
小鼠输卵管卵母细胞采集与结构观察实验
显微镜观察法 实验方法原理 哺乳动物的卵子发生在卵巢的卵泡内进行。在卵母细胞成熟发育阶段,初级卵母细胞发生生发泡破裂(germinal vesicle b
小鼠输卵管卵母细胞采集与结构观察实验_显微镜观察法
小鼠输卵管卵母细胞采集与结构观察可应用于认识小鼠的雌性生殖器官结构组成及其位置,认识卵巢、输卵管、子宫等生殖器官。实验方法原理哺乳动物的卵子发生在卵巢的卵泡内进行。在卵母细胞成熟发育阶段,初级卵母细胞发生生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)现象,并完成第一次成
小鼠睾丸/输精管精子采集、运动能力检测与结构观察实验
本实验目的是:(1)掌握小鼠睾丸、附睾及输精管精子采集方法;(2)掌握血球计数板法精子计数和运动能力检测的方法;(3)通过睾丸、附睾及输精管精子运动能力检测,认识精子在睾丸产生后,在附睾内成熟的过程;(4)掌握精子抹片方法;(5)掌握染色法进行精子结构观察和顶体结构观察的方法,认识精子的正常结构。血
着床前小鼠胚胎线粒体功能障碍胚胎与胎盘发育的影响
实验概要本研究利用线粒体功能高度被抑制的体外胚胎模型,直接研究线粒体功能损伤对着床前后胚胎以及胎盘发育的影响。实验步骤1. 胚胎培养基用含4mg/ml BSA的MOPS-G1工作液收集受精卵。胚胎培养液分对照组培养液与试验组培养液(G1.2/G2.2,注:G1.2为对照组培养液;G2.2为试验组
绵羊胚胎附植期间母胎对话新机制获揭示
近日,中国农业大学动物科学技术学院教授田见晖团队的青年拔尖人才安磊教授在Journal of Biological Chemistry(《生物化学杂志》)在线发表研究论文。该研究利用绵羊作为模型,不仅建立了首个胚胎附植期间母胎对话的蛋白质图谱,还揭示了孕体利用糖酵解产生的乳酸作为妊娠信号,通过增强母
小鼠睾丸、附睾及输精管精子采集、运动能力检测与结构...
小鼠睾丸、附睾及输精管精子采集、运动能力检测与结构观察实验实验方法原理 哺乳动物的精子形成后必须经过在附睾内发生一系列形态、生理和生化方面的变化而最终达到成熟后,才能获得向前运动的能力,这种向前运动是精子受精能力的重要指标。哺乳动物精子包括头部和尾部二个主要部分,颈部介于头部和尾部之间,形成头部和尾
小鼠胚胎的长时间、6D活细胞观察
哺乳动物细胞胚胎植入发育和时间空间的变化协调是密不可分的,因此,对于这些发育过程的分析也必须是实时,动态而且3D的。我们过去经常使用的荧光蛋白表达技术,mRNA显微注射以及时相荧光显微观察使得活细胞成像成为了可能,但传统的荧光显微镜得到的数据却不能用来构建三维构象,这是由于荧光显微镜不能透过胚胎的厚
揭示反刍动物孕囊延伸与附植的分子调控网络
反刍动物早期胚胎发育的显著特征是胚胎在附植前会发生快速的孕囊延伸(Conceptus Elongation)过程(最长可达20厘米)。这种发育策略可以增加滋养层与子宫内膜的接触面积,弥补胚胎侵入程度的不足。胚胎在此期间经历复杂的细胞命运转变,并分泌干扰素τ(Interferon tau)等多种因
小鼠干细胞可在体外形成“类胚胎”结构
两个“类囊胚” 图片来源:《自然》杂志官网 一个欧洲科学家团队3日在英国《自然》杂志发表医学论文称,他们仅利用小鼠干细胞,在培养皿中培育出了类似早期胚胎的结构。其为研究人员提供了一个关于早期发育的细胞培养模型,有助于阐明支撑这一重要生命阶段的关键过程。 哺乳动物的受精卵经过卵
分离小鼠胚胎实验
实验方法原理 无菌条件下切除孕鼠(已知怀孕时间)子宫,分离胚胎。实验材料 DBSS试剂、试剂盒 70%乙醇仪器、耗材 培养皿尖镊子尖剪刀超净工作台本生灯实验步骤 1. 交配。将分笼的雄鼠和雌鼠合笼进行交配,雌鼠 3 天后可进入动情期,此时交配的成功率最高。这一过程可以有计划地进行,使胚胎在适宜的时间
分离小鼠胚胎实验
分离小鼠胚胎可以用于:(1)体外培养小鼠胚胎,摸索适宜培养条件。(2)使用胚胎进行发育生物学研究。实验方法原理胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期,三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟,称神经沟,沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合,致使神
分离小鼠胚胎实验
实验方法原理 胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期,三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟,称神经沟,沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合,致使神经演变为纵贯胚体的神经管。神经管和神经
暗视野显微镜与普通光镜在结构及观察结果上有什么不同
暗视野实际是暗场照明发。它的特点和明视野不同,不直接观察到照明的光线,而观察到的是被检物体反射或衍射的光线。因此,视场成为黑暗的背景,而被检物体则呈现明亮的象。这与普通明视野观察不同
暗视野显微镜与普通光镜在结构及观察结果上有什么不同
暗视野实际是暗场照明发。它的特点和明视野不同,不直接观察到照明的光线,而观察到的是被检物体反射或衍射的光线。因此,视场成为黑暗的背景,而被检物体则呈现明亮的象。这与普通明视野观察不同
mESCs二倍体胚胎嵌合
实验概要mESCs二倍体胚胎嵌合主要试剂孕马血清促性腺激素(Pregnant Mare Serum Gonadotropin,PMSG)、H-CZB、人绒毛膜促性腺激素(Human Chorionic Gonadotropin,hCG)实验材料注射器、手术剪、手术镊、35 mm培养皿、15 mL离心
小鼠腹腔巨噬细胞收集及形态观察
实验原理巨噬细胞(MΦ)发育:骨髓多能干细胞→定向干细胞(髓样干细胞)→单核母细胞→前体单核细胞→单核细胞→血液→组织(分化为巨噬细胞) MΦ分布:单核细胞主要于血液中,巨噬细胞几乎存在于所有表皮和黏膜下组织。 MΦ形态:有伪足,马蹄状单核,细胞形体大。 MΦ分离纯化:小鼠和大鼠腹腔内有丰富
早期胚胎培养及形态学观察实验
实验方法原理鸡胚胎发育可分为两个阶段:成蛋阶段的发育与成雏阶段的发育。1、胚胎在卵形成过程中的发育即母体内的发育,是成蛋阶段的发育。这个阶段的发育过程是:受精卵→卵裂→囊胚期→原肠期。当胚胎发育到原肠期时,已分化形成内胚层和外胚层,从外观上看形如一个圆盘状体即为胚盘,当卵排出体外,因温度下降,胚胎生
早期胚胎培养及形态学观察实验
实验方法原理 鸡胚胎发育可分为两个阶段:成蛋阶段的发育与成雏阶段的发育。1、胚胎在卵形成过程中的发育即母体内的发育,是成蛋阶段的发育。这个阶段的发育过程是:受精卵→卵裂→囊胚期→原肠期。当胚胎发育到原肠期时,已分化形成内胚层和外胚层,从外观上看形如一个圆盘状体即为胚盘,当卵排出体外,因温度下降,胚胎
氮吸附脱附测出来吸附孔径分布与脱附为什么不同
氮吸附脱附测出来的吸附孔径分布与脱附孔径分布为什么有很大的不同?哪个更能真实的表征孔?吸附和脱附是有很大不同的,吸附时发生的是物理吸附和化学吸附,脱附时只可将物理吸附时的物质脱附下来,而化学吸附由于化学键力的存在很难被脱附!在所测试出来的吸附和脱附曲线上的表现是其吸附和脱附曲线并不可能完全的重合,吸
通过扫描电镜成像观察不同的微结构
通过扫描电镜成像观察不同的微结构 通过调整一些蚀刻参数,例如时间(如图3所示的SEM图像)和KOH浓度(如图4所示),可以制作出不同形状的微结构。 在*种情况下,温度影响到微金字塔的高度和墙壁结构。通过改变浓度,微观结构的形状从正方形变为八角形,方角变为了圆形。 图3: 通过 SEM 对在不同时间段
关于胚胎干细胞的研究进展—猪ES细胞的介绍
Piedrahita J A等采用STO、猪成纤维细胞和猪子宫上皮细胞作为饲养层,以DMEM为基础培养液,从猪囊胚ICM分离ES细胞,发现猪囊胚ICM在STO或PMEF饲养层上可以附着增殖,而在猪胎儿成纤维细胞饲养层上虽可附着但增殖甚微,传不过4代即发生死亡。Evans等将6天~7天猪囊胚直接培
人胚胎干细胞系:衍生与培养—小鼠胚胎饲养细胞的制备
实验步骤2.3 小 鼠 胚 胎 饲 养 细 胞(MEF) 的 制 备最广泛地用于支持 h E S 的伺养层细胞来自小鼠胚胎 [丁]^〇 1113 〇 1161&1,, 1998;Reu-binoffetal. , 2000],如小鼠胚胎饲养细胞(MEFs) ,尽管它们可能是最原始的间叶细胞的前体细胞
Cell:受精卵早期发育的分子机制有望理解生命起源
受精卵前100个细胞(囊胚)的组织方式对于妊娠是否成功、器官形成甚至以后对个体疾病(比如阿尔兹海默病等)的发生都有着非常深远的影响;然而,截止到目前为止,研究人员并没有找到一个好的方法来模拟囊胚形成的方式。 近日,一项刊登在国际杂志Cell上的研究报告中,来自索尔克研究所等机构的科学家们通过研
动物实验基本技术4
三、实验动物的准备本文主要叙述制备转基因鼠的实验程序。(一)不育雄性公鼠:结扎公鼠与母鼠交配以后产生假孕母鼠。受结扎的公鼠需8周以上,对种系无特殊要求。在正式实验前,结扎公鼠需与性成熟的雌性小鼠交配,反复交配两次或三次,经检查雌体有阴道栓,但均不怀孕产仔,则证明结扎成功。结扎公鼠使母鼠产生阴道栓的能
大小鼠的血液采集途径及方法——静脉血
1、尾静脉:此途径大鼠采血量一般为0.05-0.2ml,小鼠为0.05-0.1ml;适用于血糖测定及需求血清量极少的指标检测;采血量少,但是很方便,无需麻醉哟~2、颈静脉:此途径大鼠采血量适用于单次采血在0.5ml以上;小鼠0.1ml以上,高手可不麻醉盲穿采血,新手可麻醉状态下盲穿或解剖后穿刺;亦可
小鼠骨髓细胞染色体标本制作与观察
实验目的掌握动物骨髓染色体标本制备基本过程,了解操作步骤的原理实验原理小鼠骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。实验原理制备方法包括以