报告基因实验——荧光蛋白（FP)的显微检测
实验材料活体组织仪器、耗材落射荧光显微镜汞灯实验步骤表达突光蛋白的材料一般首先用落射荧光显微镜（epi-fluorescent microscopy) 来观察 ，尤其当研究表皮上表达的荧光蛋白或者用反褶积软件去掉从焦点之外采集的荧光时[18]。然而，对于较厚的材料，必须使用共聚焦显微镜，因为它可以穿过产生荧光的样品，深入材料 50 um 或更厚的地方，从而产生很薄的（0.5~1.5 um ) 光切片。此外 ，如果对多种荧光蛋白成像，共聚焦显微镜也十分有用，它可以同时检测多种发射波长（参见注释 3 4 )。共聚焦显微镜的主要缺点是使用激光照射样品，因为通常可用的激光激发波长范围有限，所以激发波长必然会与激发效率相冲突，而激发效率取决于发色团的物理特性，虽然只需要 25% 的激发效率，但是 80% 或者更高的效率更合适。正确选择滤光片非常重要（见注 35 ) ，不管使用哪种显微镜，次优的滤光片都会导致所观察到的荧光蛋白亮......阅读全文
GUS报告基因的定性和定量检测
一、GUS报告基因的定性检测 GUS能与显色底物X-gluc 反应，显现蓝色，因而可以通过组织化学染色定性研究GUS的表达水平和表达模式。GUS 染色的稳定性好，组织定位精确，成为在植物中运用很广的报道基因。 1. GUS染色底物的配制 试剂名称 母液
双荧光素酶报告基因实验怎么转染目的和内参两种质粒
（1） 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。（2）设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒（pGL3-basic）中。（3）筛选阳性克隆，测序。扩增克隆并提纯质粒备用。
双荧光素酶报告基因实验怎么转染目的和内参两种质粒
（1） 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。（2）设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒（pGL3-basic）中。（3）筛选阳性克隆，测序。扩增克隆并提纯质粒备用。
生物发光技术在生命科学中的应用
随着发光(luminescence)技术在多种生物实验中的广泛应用，生物发光(bioluminescence)技术越来越成为首选的生物检测手段。在这篇文章中，我们将详细讨论生物发光技术在生物检测中的应用，以及它与其它发光检测手段相比所显示出的优点。 1 生物发光的特点 根据产生光子的
核蛋白的免疫荧光定位实验
实验方法原理 免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体（或抗原）作为探针，检测待测组织、细胞标本中的靶抗原（或抗体），形成的抗原抗体复合物带有荧光素，在荧光显微镜下，由于受高压汞灯光源的紫外光照射，荧光素发出明亮的荧光，这样就可以分辨出抗原（或抗体）的所在位置及其性质，并可利用荧光定量技术计算
核蛋白的免疫荧光定位实验
实验方法原理：免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体（或抗原）作为探针，检测待测组织、细胞标本中的靶抗原（或抗体），形成的抗原抗体复合物带有荧光素，在荧光显微镜下，由于受高压汞灯光源的紫外光照射，荧光素发出明亮的荧光，这样就可以分辨出抗原（或抗体）的所在位置及其性质，并可利用荧光定量技术计算
核蛋白的免疫荧光定位实验
免疫荧光定位法 实验方法原理 免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体（或抗原）作为探针，检测待测组织、细胞标本中的靶抗原（或抗体），形成的抗原抗体复合
核蛋白的免疫荧光定位实验
免疫荧光技术又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种免疫荧光技术。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。实验方法免疫荧光定位法 实验方法原理 免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体（或抗原）作为探针，检测待测组织、细胞标本中的靶抗原（或抗体），形成的抗原抗
核蛋白的免疫荧光定位实验
核蛋白的免疫荧光定位可应用于：（1）定位细胞内核蛋白分布；（2）病毒研究。实验方法原理免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体（或抗原）作为探针，检测待测组织、细胞标本中的靶抗原（或抗体），形成的抗原抗体复合物带有荧光素，在荧光显微镜下，由于受高压汞灯光源的紫外光照射，荧光素发出明亮的荧光，这
报告基因实验——利用MUG检测－β葡萄糖醛酸酶（GUS）
报告基因实验可以用于：（1）植物分子生物学研究；（2）用以鉴别基因的表达模式；（3）在获得稳定转化植株的过程中也可用作转化细胞的标记。实验方法原理报告基因是一个分子生物学概念，它是指一类在细胞、组织/器官或个体处于特定情况下会表达并使得他们产生易于检测、且实验材料原本不会产生的性状的基因。作为报告基
荧光偏振法进行高通量－PLpro－抑制剂筛选
COVID-19 的全球传播是对公共卫生的严重威胁，有效的治疗方法仍然非常有限。因此，新型抗病毒药物的发现是抗击新冠肺炎最为迫切和紧要的任务。在 COVID-19 的致病病原体 SARS-CoV-2 的生命周期中，木瓜样蛋白酶 (PLpro) 在新病毒颗粒的成熟和释放中起作用，并能抑制 Ⅰ 型干扰素
双萤光素酶报告基因检测
萤光素酶报告基因系统广泛应用于真核生物基因表达和细胞生理学研究，包括受体活性、转录因子、细胞信号转导、mRNA加工和蛋白质折叠等。萤光素酶是理想的报告基因，因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶，一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。单萤光素酶报告基因实验往往会受到各种实验条件的影响，而双萤光素
蛋白产物的检测实验
一、组织蛋白的裂解提取：1.分别取-70℃保存的各组动物的样品（半个脑、0.5g肌肉），放入小离心管中，在冰浴上以PBS充分洗涤2次，除去残留血液。2.用无菌手术剪和镊子将大鼠肌肉剪碎（脑样品不用剪碎），放入另一小离心管中，于0℃以PBS充分洗涤，4℃，3000 rpm离心5分钟。3.吸出上清夜，尽
荧光显微镜检测支原体
荧光显微镜检测支原体实验方法原理检测支原体有两种不同的策略：第一种方法将在下述方案中述及，利用对 DNA 染色的荧光染料 Hoechst 33258, 它对细胞核周围（在细胞表面或胞质中）的特殊物质进行染色，可显示支原体污染；第二种方法是利用 DNA 探针识别细胞提取物中的 DNA 支原体特
荧光显微镜检测支原体
实验方法原理 检测支原体有两种不同的策略：第一种方法将在下述方案中述及，利用对 DNA 染色的荧光染料 Hoechst 33258, 它对细胞核周围（在细胞表面或胞质中）的特殊物质进行染色，可显示支原体污染；第二种方法是利用 DNA 探针
荧光显微镜检测支原体
实验方法原理检测支原体有两种不同的策略：第一种方法将在下述方案中述及，利用对 DNA 染色的荧光染料 Hoechst 33258, 它对细胞核周围（在细胞表面或胞质中）的特殊物质进行染色，可显示支原体污染；第二种方法是利用 DNA 探针识别细胞提取物中的 DNA 支原体特异序列，进行支原体污染的检测
荧光显微镜检测方法（一）
荧光显微镜检测方法（一）一、荧光显微镜荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像（图3-15）。荧光显微镜的结构和主要部件（一）光源现在多采用200W的超高压汞灯作光源，它是用石
荧光显微镜检测支原体
实验方法原理 检测支原体有两种不同的策略：第一种方法将在下述方案中述及，利用对 DNA 染色的荧光染料 Hoechst 33258, 它对细胞核周围（在细胞表面或胞质中）的特殊物质进行染色，可显示支原体污染；第二种方法是利用 DNA 探针识别细胞提取物中的 DNA 支原体特异序列，进行支
SPA－各种免疫检测试剂制备实验——荧光－A－蛋白纯品
实验方法原理荧光 A 蛋白纯品是在弱碱性条件下，由荧光素通过蛋白上的氨基共价包绕于 A 蛋白纯品制成。其制备如下。实验材料A 蛋白纯品试剂、试剂盒氧化钠（含NaCl）平衡盐溶液氢氧化钠（含 NaCl）FITC仪器、耗材Sephadex G-25 柱棕色瓶实验步骤1. 取一定量的 A 蛋白纯品，用内含
报告基因实验——花青素表达的定量
实验材料植物组织试剂、试剂盒酸性乙醇或甲醇花青素-3-O-葡萄糖苷仪器、耗材滤膜实验步骤1. 瞬时表达研究植物组织经基因枪转化培养大约 12 h 后，转化细胞开始表现出深红色或者偶尔为深蓝色的斑点。颜色常常会向整个液泡扩散，从外表上看整个细胞都是红色的。在几天时间里，颜色将会增强，并且能在 1~2
报告基因实验——利用冷型－CCD－像机进行－LUC－的活体检测
实验材料LUC试剂、试剂盒D- 萤光素水溶液仪器、耗材液氮冷却相机实验步骤对于萤光素酶的检测来说，需要解决荧光素渗透进入活体组织这一问题 [7]。多数情况下，用荧光素溶液简单地喷洒植物就可以解决，但是一些组织，如发育后期的种子不能吸收荧光素，需要产生伤口（见 注 27 ) 以利于底物进入 [52,
表达蛋白检测实验
实验方法原理 当重组病毒通过噬斑纯化和扩增后，免疫印迹可用于鉴定重组蛋白，并检测其是否有预期的大小以及是否从感染细胞中分泌。下面的步骤是介绍检测非分泌性（细胞内）蛋白的，如果重组蛋白是分泌到培养基中的，可按注解中的步骤操作。实验材料 生长至汇片的单层 BS-C-1 细胞重组痘苗病毒储液试剂、试剂盒
表达蛋白检测实验
免疫印迹法 免疫沉淀法 点印迹法 实验方法原理 当重组病毒通过噬斑纯化和扩增后，免疫印迹可用于鉴定重组蛋白，并检测其是否有预期的大小以及是
报告基因分类及优缺点
报告基因（reporter gene）是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，其表达产物非常容易被鉴定。把它的编码序列和基因调节序列相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。作为报告基因必须具备的条件：（1）全序列已测定（2）表达产物在手提细胞中不存在，即无背景，
转基因植物Gus报告基因的检测
一、原理Gus (b-glucuronidase)基因作为一种报告基因，在植物遗传转化研究中有广泛的用途。Gus基因来自于大肠杆菌，编码b－葡聚糖苷酶（一种水解酶），可催化底物5－溴－4－氯－3－吲哚葡聚糖醛酸苷（5－bromo-4-chloro-3-indolyl-glucronide，缩写为
生物发光技术在生命科学中的应用
随着发光(luminescence)技术在多种生物实验中的广泛应用，生物发光(bioluminescence)技术越来越成为首选的生物检测手段。在这篇文章中，我们将详细讨论生物发光技术在生物检测中的应用，以及它与其它发光检测手段相比所显示出的优点。 1 生物发光的特点 根据产生光子的
徕卡荧光显微镜的荧光显微术的特点
荧光显微术是普通显微术的重大发展。它具有独特的优越性。荧光显微术是在黑暗的背景下观察标本的彩色图像，有良好的反衬，故观察清楚、方便，易于鉴别，眼睛也不易疲劳。由于荧光染色素的浓度极稀（仪1：100000）便能发出明亮的荧光，因此一般油机体众说是无毒的，为活体观察，如研究功能器官的过程和细微结构，某些
荧光显微镜检测原理及方法
一、荧光显微镜荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像（图3-15）。图3-15 荧光显微镜的结构和主要部件（一）光源现在多采用200W的超高压汞灯作光源，它是用石英玻璃制作，
FP集成电路的封装特点
FP(flat package)扁平封装。表面贴装型封装之一。QFP 或SOP(见QFP 和SOP)的别称。部分半导体厂家采 用此名称。
利用荧光噬菌体开发出更快速简便的检测结核病方法
根据2012年1月25日发表在Journal of Clinical Microbiology期刊上的一篇研究论文，一个国际研究小组优化一种让结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)在显微镜下发出明亮绿色荧光的策略。这种筛选活动性结核病(active tuberculos