荧光偏振法进行高通量PLpro抑制剂筛选
COVID-19 的全球传播是对公共卫生的严重威胁,有效的治疗方法仍然非常有限。因此,新型抗病毒药物的发现是抗击新冠肺炎最为迫切和紧要的任务。在 COVID-19 的致病病原体 SARS-CoV-2 的生命周期中,木瓜样蛋白酶 (PLpro) 在新病毒颗粒的成熟和释放中起作用,并能抑制 Ⅰ 型干扰素的产生,同时逃避疫苗的免疫。因此,PLpro 被认为是开发抗病毒药物的一个非常有吸引力的靶点。阻断了 PLpro ,这种病毒的产生就会受到抑制,同时人体细胞的先天性免疫反应也会增强。近期皖南医学院陈雨云教授带领的团队,开发了一种强大而简单的三明治状荧光偏振 (FP) 筛选方法,用于 PLpro 抑制剂的发现。通过实验,该团队确定了盐酸是体外靶向 PLpro 的竞争性抑制剂,IC50 值达到 24.26 ± 0.4 μM 。因此,这种强大、简单、可靠的 FP 筛选方法对于快速筛选靶向 PLpro 的抗病毒药物至关重要,并可能为发现病毒蛋......阅读全文
荧光偏振简介
Perrin于1926年首先描述了荧光偏振理论,他观察到溶液中的荧光分子在受到偏振光激发时,如果在激发时分子保持静止,该分子将发出固定偏振平面的发射光(发射光仍保持偏振性)。然而,如果分子旋转或翻转那么发射光的偏振平面将不同于初始激发光的偏振平面。分子的偏振性与分子旋转驰豫时间成比例,分子旋转驰豫时
偏振荧光分析
任何物质都处于不断运动中,液体环境中的荧光分子也不例外。因此当受到偏振光激发时,荧光分子的运动状态(如旋转或翻转)、荧光分子与其他因子相互作用(如相互结合或排斥)、其所处环境的性质(如溶液的黏度、温度_等因素都可能对荧光分子受激发后发出的偏振光的性质产生影响。对此进行分析比较,就可能揭开物质活动的内
荧光偏振的用途
荧光偏振免疫分析常用于测定半抗原的药物浓度。反应系统内除待测抗原外,同时加入一定量用荧光素标记的小分子抗原,使二者与有限量的特异性大分子抗体竞争结合。当待测抗原浓度高时,经过竞争反应,大部分抗体被其结合,而荧光素标记的抗原多呈游离的小分子状态。由于其分子小,在液相中转动速度较快,测量到的荧光偏振程度
FPA荧光偏振仪器
哨兵Sentry 200 是一款坚固,轻便,便携的单管仪器,专为进行荧光偏振分析而设计。所有必要的光学,电子和计算能力都包含在仪器中,可以独立于计算机使用。哨兵 Sentry 200 采用由Diachemix LLC 开创的革命性 LCD 光偏振技术(LCDp)。LCDp比传统的过滤开关技术运行
荧光偏振法进行高通量-PLpro-抑制剂筛选
COVID-19 的全球传播是对公共卫生的严重威胁,有效的治疗方法仍然非常有限。因此,新型抗病毒药物的发现是抗击新冠肺炎最为迫切和紧要的任务。在 COVID-19 的致病病原体 SARS-CoV-2 的生命周期中,木瓜样蛋白酶 (PLpro) 在新病毒颗粒的成熟和释放中起作用,并能抑制 Ⅰ 型干扰素
荧光偏振度和荧光强度
荧光偏振免疫分析法(fluorescencepolarizationimmunoassay,FPIA)是一种定量免疫分析技术,其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后,吸收光能跃入激发态,随后回复至基态,并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。荧光强度,指发射荧光的光的强度。荧光
荧光偏振度和荧光强度
荧光偏振免疫分析法(fluorescencepolarizationimmunoassay,FPIA)是一种定量免疫分析技术,其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后,吸收光能跃入激发态,随后回复至基态,并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。荧光强度,指发射荧光的光的强度。荧光
荧光偏振免疫分析的作用
荧光偏振免疫分析,是一种定量免疫分析技术,其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后,吸收光能跃入激发态,随后回复至基态,并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。适宜检测小至中等分子物质,常用于药物、激素的测定。荧光偏振免疫分析法(fluorescence polarization
荧光偏振免疫分析的作用
荧光偏振免疫分析,是一种定量免疫分析技术,其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后,吸收光能跃入激发态,随后回复至基态,并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。适宜检测小至中等分子物质,常用于药物、激素的测定。荧光偏振免疫分析法(fluorescence polarization
荧光偏振技术的相关概述
荧光偏振(FP)检测技术是一种以荧光标记的检测技术,它把荧光物质标记在特定物质上,使原本微弱的反应信号转化成较强的荧光信号,起到信号增强的作用。与此同时,在检测系统中加上起偏器和检偏器,当从光源发出的一束光线经垂直起偏器后成为垂直偏振光, 样品被垂直偏振光激发而产生偏振荧光, 此荧光经检偏器后可
荧光偏振技术的原理简介
将磷酸化底物进行荧光标记,蛋白激酶产生的磷酸化产物不进行荧光标记。让两种磷酸化产物与抗丝氨酸抗体(丝氨酸和苏氨酸是最常见的磷酸化位点,因为其结构末端含有羟基,羟基很活泼,可以与磷酸基团结合)相竞争结合。当反应液中没有蛋白激酶产生的磷酸化产物时,荧光标记的磷酸化物与抗体相结合形成复合体,由于复合体
使用引物延伸荧光偏振探测法的高通量基因分型实验1
单重 PCR 的引物延伸法实验材料目的基因组DNA试剂、试剂盒10 X PCR 缓冲液4dNTP 混合液Taq DNA 聚合酶SNP 引物仪器、耗材384孔黑色 PCR 板多管移液器或液体操作工作站384孔 PCR 板封口垫带加热盖的热循环仪FP 读板设备实验步骤展开
使用引物延伸荧光偏振探测法的高通量基因分型实验2
四重 PCR 的引物延伸法实验材料目的基因组DNA试剂、试剂盒10XPCR扩增缓冲液Taq DNA 聚合酶4dNTP 混合液PCR 引物混合液AcydoTerminator混合液仪器、耗材384孔透明 PCR 板和黑色 PCR 板多管移液器或液体操作工作站384孔 PCR 板封口垫带加热盖的热循环
荧光偏振免疫测定的方法评价
荧光偏振免疫测定样品用量少; 荧光素标记结合物稳定,使用寿命长; 方法重复性好; 快速,易自动化; 试剂盒专属性强,适于检测小分子和中等分子物质,不适宜测定大分子物质; 灵敏度较非均相荧光免疫测定法低。
荧光光谱仪的偏振荧光分析和时间分辨荧光分析
1、偏振荧光分析。荧光体的荧光偏振与荧光各向异性值的测定,能够提供与荧光体在激发态寿命期间动力学相关的信息,因此荧光偏振技术被广泛应用于研究分子间的作用,例如蛋白质与核酸、抗原与抗体、蛋白质与多肽的结合作用等。 2、时间分辨荧光分析。由于不同分子的荧光寿命不同,可在激发与检测之间延缓一段时间,
荧光偏振法快速准确高通量检测IgG和含Fc段衍生物
荧光偏振法快速、准确、高通量检测IgG和含Fc段衍生物Dr. Carolanne DohertyValitacell, NIBRT, Fosters Avenue, Blackrock, Dublin, Ireland BMG多功能酶标仪可应用于定量IgG的新技术Valita™TITER
荧光偏振(polarizer)及各向异性 (anisotropy ) 测量
在荧光光度计的激发和发射光路上分别加上起偏器和检偏器,即可仪对检偏器的取向平行或或垂直于起偏器的取向的情况下分别观察到荧光强度。。荧光偏振不仅与荧光体分子形状荧光物质吸光对偏振激发的取向,光选择性以及与激发矩和发射距是否为共线的共振偶极体有关,而且许多外界因素,如环境的黏度等都会影响和改变其偏振度,
自动化荧光免疫分析系统—荧光偏振免疫分析仪
荧光偏振免疫分析仪 荧光偏振免疫测定(FPIA)为一种均相荧光免疫测定方法,荧光强度与荧光标志物质在溶液中旋转的速度与分子大小成反比,分子大,转动速度慢,荧光强度大;分子小,转动速度快,荧光强度小。常采用抗原抗体竞争反应原理,适用于小分子半抗原(如药物浓度)的检测。 第四节 自动化酶联免疫
偏振X射线荧光光谱仪的贵金属分析
近期全新推出SPECTROCUBE型X射线贵金属测试仪器,采用高分辨、高计数检测器技术,缩短了样品的测量间隔,仪器软件直观、简捷,测试流程轻松流畅,大大减少了宕机时间。 贵金属分析 SPECTROCUBE型X射线贵金属测试仪器作为新仪器的推出,为测试中心、纯度标识和分析实验室,以及珠宝制造
偏振X射线荧光光谱仪的应用和分析
它分析专业、检出下限低,灵敏度高、稳定性好,还能应对欧洲WEEE、RoHS指令以及SONY STM-0083标准。 SPECTRO XEPOS多功能偏振型X射线荧光光谱仪应用广泛,应用于石油、化工、冶金、矿业、制药、食品、环保、地质、建材、废物处理以及再加工工业等。以油中各种元素的分析为例,
荧光偏振免疫测定的原理及主要用途
利用荧光物质在溶液中被单一平面的偏振光照射后,可吸收光能而产生另一单一平面的偏振发射荧光,该荧光强度与荧光标记物质在溶液中旋转的速度与分子大小成反比,主要用于测定小分子药物浓度。
圆二色及圆偏振荧光光谱仪概述
圆二色及圆偏振荧光光谱仪是一种用于化学领域的分析仪器,于2014年7月13日启用。 技术指标 ① 光 源: 150W氙灯;300W氙灯 ② 激发单色器: 1200 l/mm, 350nm双凹面光栅; ③ 发射单色器: 1200 l/mm, 450nm双凹面光栅; ④ 波长范围: 185-11
荧光偏振免疫测定是什么?方法评价是什么?
利用抗原抗体竞争反应原理,根据荧光素标记抗原与其抗原抗体复合物的荧光偏振程度的差异,测定体液中小分子物质的含量。(一)基本原理荧光偏振免疫测定常用异硫氰酸荧光素(FITC)标记小分子抗原。(二)方法评价荧光偏振免疫测定样品用量少;荧光素标记结合物稳定,使用寿命长;方法重复性好;快速,易自动化;试剂盒
偏振光的定义和偏振类型
偏振光( polarized light ),光学名词。光是一种电磁波,电磁波是横波。而振动方向和光波前进方向构成的平面叫做振动面,光的振动面只限于某一固定方向的,叫做平面偏振光或线偏振光。
荧光分析法荧光相关术语概念
根据波兹曼 (Boltzmann)分布,分子在室温时基本上处于 电子能级的基态。当吸收了紫外-可见光后,基态分子中的电子只能跃迁到激发单重态的各个不同振动-转动能级,根据自旋禁阻选律, 不能直接跃迁到激发三重态的各个振动-转动能级。处于激发态的分子是不稳定的,通常以辐射跃迁和无辐射跃迁等方式释放多余
荧光磁粉探伤法与非荧光磁粉探伤法比较
(1)荧光磁粉探伤法对比率高。由于磁粉探伤主要依据观察缺陷形成的磁痕来判断缺陷的存在与否及其分布严重程度。因此,磁痕与周围背景之间的亮度或颜色差别是十分重要的,这种差别称为对比度。它们对光的反射的相对量称为对比率,其间之差别越大越容易识别。在强光下人跟对光强度的微小区别不敏感但对颜色识别能力很强
偏振显微镜的偏振光相关简介
偏振光是振动限于一定方向的光。在普通光(和其他类型的电磁辐射[electromagnetic radiation])中,电场和磁场的横向偏振在所有可能的平面上互为直角。线偏振光中电场的偏振限于一个层面,磁场的偏振限于与它成直角的另一层面。可通过特定角度的反射(参见“布儒斯特定律”[Brewste
药物鉴别法荧光反应鉴别法
荧光反应鉴别法常用的荧光发射形式有以下类型。(1)药物本身可在可见光下发射荧光。(2)药物溶液加硫酸使呈酸性后,在可见光下发射荧光,如苯并二氮杂类药物。(3)药物和溴反应后,在可见光下发射荧光。(4)药物和间苯二酚反应后,发射出荧光或药物经其他反应后发射荧光。
荧光免疫分析法
荧光免疫分析法是将免疫学反应的特异性和荧光技术的敏感性结合起来的一种方法。荧光免疫分析在医学的基础研究及临床诊断中占有重要地位,而性能优良的标记探针的开发则是发展这一技术的决定性因素。近年来,半导体荧光纳米晶由于其特殊的物理、化学性质,吸引了人们的广泛关注,并已作为新一代荧光标记物开始被广泛应用
荧光pcr法是什么
荧光pcr法是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。也叫实时荧光定量PCR技术。荧光-PCR法技术原理:将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规