诱变物质的微核测定实验

1、了解微核测定的方法与意义2、寻找新的测试系统及新的更安全有效的植物诱变剂实验方法原理微核(micronuclei)简称(MCN)是真核类生物细胞中的一种异常结构,往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。在细胞间期,微核呈圆形,游离于主核之外,大小应在主核1/3以下。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样,也具有伍万DNA的能力。一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒断片产生的。研究工作证实:整条染色体或好几条也能形成微核。这些断片或染色体在比细胞分裂未期被两个子细胞核所排斥便形成了第三个核块。已经证实微核率的大小是和用药的剂量或辐射累积效应呈正相关,这一点和染色体畸变的情况是一样的。所以许多人认为可用简易的间期微核计数来代替繁杂的中期畸变染色体计数。由于大量新的化合物的合成,原子能的应用,各种各样的工业废物的排出,使人们需要有一套高度灵敏,技术简单的测试系统来监视环境的变化。只有真核类的测试系统更能直接推测诱变物质对人类......阅读全文

诱变物质的微核测定实验

实验方法原理 微核(micronuclei)简称(MCN)是真核类生物细胞中的一种异常结构,往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。在细胞间期,微核呈圆形,游离于主核之外,大小应在主核1/3以下。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样,也具有伍万DNA的能力。一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝

诱变物质的微核测定实验

1、了解微核测定的方法与意义2、寻找新的测试系统及新的更安全有效的植物诱变剂实验方法原理微核(micronuclei)简称(MCN)是真核类生物细胞中的一种异常结构,往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。在细胞间期,微核呈圆形,游离于主核之外,大小应在主核1/3以下。微核的折光率及细胞化学反应性

诱变物质的微核测定实验

实验方法原理:微核(micronuclei)简称(MCN)是真核类生物细胞中的一种异常结构,往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。在细胞间期,微核呈圆形,游离于主核之外,大小应在主核1/3以下。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样,也具有伍万DNA的能力。一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝

诱变物质的微核测定

实验概要1、了解微核测定的方法与意义 2、寻找新的测试系统及新的更安全有效的植物诱变剂实验原理微核(micronuclei)简称(MCN)是真核类生物细胞中的一种异常结构,往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。在细胞间期,微核呈圆形,游离于主核之外,大小应在主核1/3以下。微核的折光率及细胞化学

微核检测实验

实验方法原理遗传毒物或致突变因子作用于间期细胞染色质,有丝分裂染色体和纺锤体时,能导致染色体断裂成断片或整条染色体从纺锤体脱落和染色体子星群脱离,形成落后的孤立染色体,继而在分裂末期及以后的间期细胞中形成与主核脱离的徽核。因此微核实质上是孤立畸变染色体在间期的存在形式。微核检测既可直接检测体内细胞,

微核检测实验

实验方法原理 遗传毒物或致突变因子作用于间期细胞染色质,有丝分裂染色体和纺锤体时,能导致染色体断裂成断片或整条染色体从纺锤体脱落和染色体子星群脱离,形成落后的孤立染色体,继而在分裂末期及以后的间期细胞中形成与主核脱离的徽核。因此微核实质上是孤立畸变染色体在间期的存在形式。微核检测既可直接检测体内细胞

USE-诱变实验

            实验材料 带 mutS 表型(例如 BMH71-18) 的转化用大肠杆菌感受态 带 mut+表型的转化用大肠杆菌感受态 试剂、试剂盒

USE-诱变实验

本方法中,两条寡核苷酸引物杂交到变性重组质粒 DNA 双链的同一条链上。一条引物(诱变引物)携带一个拟引进靶 DNA 序列的突变,第二条引物携带一个能破坏质粒单一限制酶位点的突变。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料带 mutS 表型(

USE-诱变实验

实验材料 带 mutS 表型(例如BMH71-18) 的转化用大肠杆菌感受态带 mut+表型的转化用大肠杆菌感受态试剂、试剂盒 退火缓冲液贮存液合成缓冲液噬菌体 T4DNA 连接酶噬菌体 T4DNA 聚合酶或测序酶单一位点的限制性内切核酸酶琼脂糖凝胶诱变引物选择引物质粒 DNA仪器、耗材 70°C

诱变-PCR-实验

试剂、试剂盒 氯仿 异戊醇乙醇矿物油或者一个蜡珠3mol L NaOAc5 mmol L MnCl2突变 PCR 缓冲液DNA 聚合酶Native Taq 或 AmpliTaq DNA 聚合酶高纯度的脱氧核苷 5'-三磷酸dNTP 混合物模板 DNA引物琼脂糖凝胶用溴化乙锭染色仪器、

诱变-PCR-实验

诱变 PCR 最大的优势是以一种没有偏好的方式引入了各种类型的突变,而不是获得高水平的单一的扩增。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒氯仿 异戊醇乙醇矿物油或者一个蜡珠3mol L NaOAc5 mmol L MnCl2突变 PCR 缓冲液DNA 聚合酶Nati

诱变-PCR-实验

            试剂、试剂盒 氯仿 异戊醇 乙醇 矿物油或者一个蜡珠 3mol L NaOAc 5 mmol L MnCl2 突变 PCR 缓冲液

微核的用途

在细胞间期,微核呈圆形或椭圆形,游离于主核之外,大小应在主核1/3以下。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样,也具合成DNA的能力。一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体断片产生的。有实验证明,整条染色体或几条染色体也能形成微核。这些断片或染色体在分裂过程中行动滞后,在分裂末期不能进入主

定点诱变实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 TE寡核苷酸引物质粒dNTPDNA聚合酶氯仿石蜡油无水乙醇仪器、耗材 离心管热循环仪离心机实验步骤 1.  利用突变区两侧的限制性内切酶位点将待诱变的DNA片段亚克隆进高拷贝数的载体中。 2.  用小量制备的质粒提取模板DNA,用TE缓冲液重悬100 ng DNA至终浓

定点诱变实验

基本方案 利用PCR引物点突变             实验材料 DNA 试剂、试剂盒

酵母菌细胞的诱变实验——紫外光诱变

实验材料酵母试剂、试剂盒YPD刀豆氨酸仪器、耗材紫外光杀菌灯紫外光放射量测定器实验步骤1.  将过夜培养的酵母菌培养液接种到5 ml YPD培养基中,于30℃培养。离心5~10 s,用1 ml 无菌水重悬沉淀细胞,重复洗涤1次,再用1 ml 无菌水重悬。 2.  检查细胞密度,记录数据后将细胞密度调

酵母菌细胞的诱变实验——甲乙硫醚诱变

实验材料酵母试剂、试剂盒YPD磷酸钠缓冲液甲乙硫醚刀豆氨酸硫代硫酸钠仪器、耗材试管摇床离心机平板实验步骤1.  将过夜培养的待诱变酵母菌株转接于5 ml YPD培养基,于30℃继续培养。检查细胞密度,记录并调整到2×108细胞/ml。2.  转移1 ml 的菌悬液到无菌的离心管中。高速离心5~10

蚕豆根尖微核检测实验——观察法

实验方法原理来自污染环境中的各种理化因子对机体会产生不同的影响。有的会引起染色体的损伤,如微核,染色体桥,染色体断片,染色体环等。本实验利用环境污水及药物处理蚕豆根尖细胞,可观察到上述现象。 实验材料蚕豆试剂、试剂盒水仪器、耗材显微镜载玻片盖玻片实验步骤1.  蚕豆发芽处理,药物或污染源处理。 2.

DNA的接头分区诱变实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 雾水乙醇EDTAT4 DNA连接酶TENaCl仪器、耗材 培养箱水浴锅实验步骤 1.  用Bal 31或外切核酸酶Ⅲ及S1核酸酶在质粒的目的区域产生一嵌套式的5’或3端'缺失突变体。首先在目的序列附近用一限制酶使质粒线性化,在用Bal 31消化时,应确定其切割效

DNA的接头分区诱变实验

            实验材料 DNA 试剂、试剂盒 雾水乙醇 EDTA T4 DNA连接酶 TE

DNA的接头分区诱变实验

Linker scanner mutations (接头分区突变):体外在限制性片段加上位点,使两个DNA分子发生重组产生,结果在重组的位点加上连接序列。实验材料DNA试剂、试剂盒雾水乙醇EDTAT4 DNA连接酶TENaCl仪器、耗材培养箱水浴锅实验步骤1.  用Bal 31或外切核酸酶Ⅲ及S1核

小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的测定

实验原理:染色单体或染色体的无着丝点断片,或因纺锤体受损而丢失的整个染色体,在细胞分裂后期,仍然在细胞质中。末期之后,单独形成一个或几个规则的次核,被包含在子细胞的胞质内,因比主核小,故称为微核。大小应为主核的1/20~1/5。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样。微核率是和用药的剂量或辐射累积

测定物质的密度的实验原理

测定物质的密度的实验原理是密度公式ρ=mV。测定物质密度的原理是密度的公式ρ=mV;实验中用天平来称物体的质量,用量筒来测量物体的体积;在“探究物质质量与体积关系”实验中,需测量的物理量是质量和体积,则所需要测量的物理量是相同的。测量密度时多次实验的目的是为了求平均值减小误差;探究物质的质量与体积的

微核效应的概念

中文名称微核效应英文名称micronucleus effect定  义环境中的有毒物导致染色体结构变化或纺锤体功能失调而形成微核的作用。应用学科遗传学(一级学科),细胞遗传学(二级学科)

细胞核及核内物质

  细胞核(nucleus)是遗传信息的载体,细胞的调节中心,其形态随细胞所处的周期阶段而异,通常以间期核为准。  细胞核外被核膜。核膜由内外二层各厚约3nm的单位膜构成,中间为2~5nm宽的间隙(核周隙);核膜上有直径约50nm的微孔,作为核浆与胞浆间交通的孔道,其数目因细胞类型和功能而异多者可占

微核检测技术

一、实验目的 学会利用所学知识,进行自主实验设计;了解染色体畸变的各种类型及原理,掌握利用微核检测技术监测环境污染的一般方法。二、实验原理 微核(micronucleus, 简称MCN),也叫卫星核,是真核类生物细胞中的一种异常结构,是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。微核往往是各种理化

小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的测定方法

实验原理:染色单体或染色体的无着丝点断片,或因纺锤体受损而丢失的整个染色体,在细胞分裂后期,仍然在细胞质中。末期之后,单独形成一个或几个规则的次核,被包含在子细胞的胞质内,因比主核小,故称为微核。大小应为主核的1/20~1/5。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样。微核率是和用药的剂量或辐射累积

酵母菌细胞的诱变实验

实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD磷酸钠缓冲液甲乙硫醚刀豆氨酸硫代硫酸钠仪器、耗材 试管摇床离心机平板实验步骤 1.  将过夜培养的待诱变酵母菌株转接于5 ml YPD培养基,于30℃继续培养。检查细胞密度,记录并调整到2×108细胞/ml。2.  转移1 ml 的菌悬液到无菌的离心管中。高速离心5

微核的结构和特点

微核(micronucleus, 简称MCN),也叫卫星核,是真核类生物细胞中的一种异常结构,是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。微核往往是各种理化因子,如辐射、化学药剂对分裂细胞作用而产生的。微核测试用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、食品添加剂的安全评价,以及染色体遗传疾病和癌症前

细胞核的组成物质

  前言  在HE染色切片上,细胞核以其强嗜碱性而成为细胞内最醒目的结构。由于它含有DNA--遗传信息,因此,借DNA复制与选择性转录,细胞核成为细胞增殖、分化、代谢等活动中关键环节之一。人体绝大多数种类的细胞具有单个细胞核,少数无核、双核或多核。核的形态在细胞周期各阶段不同,间期核的形态在不同细胞