组蛋白的Triton/乙酸/尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳分析实验
试剂、试剂盒冰醋酸TEMED (NNN’N’-四甲基乙二胺)尿素10% 过硫酸铵(APS; 配胶时新鲜配置)10% Triton X-100 (蛋白级;Calbiochem)63. 5% 丙烯酰胺 0. 4% 亚甲双丙烯酰胺电泳缓冲液(0.9 mol L 乙酸)还原剂(2-巯基乙胺)仪器、耗材抽滤瓶制胶装置适合 16 cm×22 cm 玻璃板的垂直板电泳装置有两条导线可提供恒电流电泳的电源1.5 mm 厚 16 齿梳带有 23-G 针头的一次性注射器带有弯曲为 U 型的 18-G 针头的一次性注射器Hamilton 注射器实验步骤1. 在 1000 ml 抽滤瓶中加入:3.62 ml 冰醋酸1.88 ml 水0.329 ml TEMED2. 轻轻地旋转摇动混合,然后加入:44. 21 ml 9. 5 mol/L 尿素0.875 ml 10% APS3. 将溶液完全抽气。4. 在瓶中加入 2.59 ml 10% Triton X-......阅读全文
细菌中重组蛋白的大量提取实验
实验方法原理 利用细菌获得用于纯化的重组蛋白是非常方便的。适用于细菌细胞蛋白提取的方法包括超声波处理、玻璃珠研磨、钒土或石英砂研磨、French加压罐高压剪切细胞和溶菌酶处理。这些方法适用于从各种革兰阴性菌和革兰阳性菌中制备蛋白提取物。通常是使用酶的方法破坏细胞,因为细胞在悬浮液中能获得相对均一的处
细菌中重组蛋白的大量提取实验
基本方案 实验方法原理 利用细菌获得用于纯化的重组蛋白是非常方便的。适用于细菌细胞蛋白提取的方法包括超声波处理、玻璃珠研磨、钒土或石英砂研磨、French加压
乙酸酐的实验室制法
从乙酸生产乙酸酐的方法主要有下列几种:① 丙酮和乙酸加热分解成乙烯酮(CH2=CO),再把乙烯酮跟乙酸起反应生产乙酸酐,目前这是主要方法。② 把乙醛的乙酸溶液用臭氧氧化生成过乙酸(CH3COOOH),然后再跟乙醛反应,生成约70%乙酸酐和30%的乙酸。
大分子物质的水解实验——尿素试验
实验方法原理尿素是由大多数哺乳动物消化蛋白质后被分泌在尿中的废物。 尿素酶能分解尿素释放出氨,这是一个分辨细菌很有用的诊断实验。尽管许多微生物都可以产生尿素酶,但它们利用尿素的速度比变形杆菌属的细菌要慢,因此尿素酶试验被用来从其他非发酵乳糖的肠道微生物中快速区分这个属的成员,尿素琼脂含有蛋白胨, 葡
血尿素氮偏低病因分析
1、肾功能失调。尿素氮偏低,可能与蛋白质吃得太少、怀孕、肝衰竭有关。 2、肝功能衰竭。肝脏是人体重要的代谢器官,肝功能衰竭,造成营养物质不能正常吸收。另一个原因是患者蛋白质摄入不够,再加上因肝功能不正常而大量消耗。 造成尿素氮偏低的原因有多个,因此,患者如果出现了尿素氮偏低,一定要到正规医院
人尿素(Urea)酶联免疫分析
人尿素(Urea)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中尿素(Urea)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人尿素(Urea)的水平。用纯化的人尿素(Urea)抗体包被微孔板,制成固相抗体,
影响凝胶聚合的因素
1) Acr及Bis的纯度:应选用分析纯的Acr及Bis,如试剂不纯,含有杂质或丙烯酸时,则凝胶聚合不均一,或聚合时间延长甚至不聚合, 因而需进一步纯化。 Acr和Bis贮液的pH值为4.9-5.2,当pH值的改变大于0.4pH单位则不能使用,因在偏酸或偏碱的环境中,它们可不断水解放出丙烯酸和N
影响凝胶聚合的因素
1) Acr及Bis的纯度:应选用分析纯的Acr及Bis,如试剂不纯,含有杂质或丙烯酸时,则凝胶聚合不均一,或聚合时间延长甚至不聚合, 因而需进一步纯化。 Acr和Bis贮液的pH值为4.9-5.2,当pH值的改变大于0.4pH单位则不能使用,因在偏酸或偏碱的环境中,它们可不断水解放出丙烯酸和N
加热乙酸法检测尿蛋白实验
实验方法原理加热可使蛋白质变性凝固,加酸可使蛋白质接近等电点,促使蛋白质沉淀.此外,加酸还可以溶解碱性盐类沉淀.实验材料清晰尿试剂、试剂盒稀乙酸液饱和氨化钢花仪器、耗材试管酒精灯实验步骤实验试剂:①、稀乙酸液:取冰乙酸5ml加水至100ml②、饱和氨化钢花实验方法:1、取约10ml新鲜清晰尿于一耐热
加热乙酸法检测尿蛋白实验
实验方法原理 加热可使蛋白质变性凝固,加酸可使蛋白质接近等电点,促使蛋白质沉淀.此外,加酸还可以溶解碱性盐类沉淀.实验材料 清晰尿试剂、试剂盒 稀乙酸液饱和氨化钢花仪器、耗材 试管酒精灯实验步骤 实验试剂:①、稀乙酸液:取冰乙酸5ml加水至100ml②、饱和氨化钢花实验方法:1、取约10ml新鲜清晰
从包涵体中纯化表达蛋白
实验材料 表达靶蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒 细胞裂解缓冲液 I细胞裂解缓冲液Ⅱ脱氧胆酸浓盐酸包涵体溶解缓冲液 I包涵体溶解缓冲液ⅡKOHPMSFSDS 凝胶加样缓冲液含尿素的 Tris-ClDNaseI溶菌酶SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材 Sorvall GSA 转头或相当的转头pH 试纸磨光
血尿素氮和尿素的区别
血尿素氮仅仅指的是血液当中存在的一个生化指标。而尿素是在血液当中、尿液当中等,都是存在的,它都体现出了人体排泄出的一种废物。如果患者存在指标的异常,或者存在身体的不适感,建议到医院进行详细的检查,明确诊断,然后在专业医师的指导下制定合理的治疗方案。 如果血尿素氮仅仅是轻度增高的,则不必过于担心
NP40以及菌体/细胞裂解法1
细胞裂解分析化学,论坛,化学分析,仪器分析,分析测试,色谱,电泳,光谱u5kLlIOT采用温和的裂解条件,不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质分析化学论坛~O/b:te} 相互作用,多采用非离子变性剂(NP40或Triton X-100)。每种细胞的裂解条件是不一样的,通过经验确定。 不能用高
重组蛋白质的代谢标记实验
由于重组蛋白质表达的时候,宿主蛋白质的合成基本终止,因此体内代谢标记是检测重组蛋白质的敏感方法。实验材料蛋白质试剂、试剂盒胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸仪器、耗材培养瓶离心机转子实验步骤1. 接种2.5×106细胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培养液的60 mm 肌组织培养皿中。对每一假定重组病
重组蛋白质的代谢标记实验
基本方案 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
重组蛋白质的大规模生产实验
基本方案 碱处理法 实验材料 重组蛋白质 仪器、耗材
重组蛋白质的代谢标记实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸仪器、耗材 培养瓶离心机转子实验步骤 1. 接种2.5×106细胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培养液的60 mm 肌组织培养皿中。对每一假定重组病毒分别准备一个平皿供感染用,并准备一个对照平皿供野生型杆状病毒感染。于27℃温育
利用核苷酸交换和剪切技术进行DNA碎裂和定向进化实验-2
3.3 酶解反应和化学切割将尿苷酸交换 PCR 纯化后的产物进行 UDG 酶解反应,在交换核苷酸位置切割 DNA。该酶对双链和单链 DNA 均有效,通过对双脱氧尿苷 C1' 位点的亲核攻击引发水解反应,高特异的去除尿嘧啶基团 [12] 。哌啶用于经 UDG 酶切割去除尿嘧啶后的骨架部分
双向电泳实验
试剂、试剂盒 尿素去污剂仪器、耗材 聚丙烯酰胺凝胶实验步骤 一、第一向1. 等电聚焦凝胶的准备双向电泳通常用聚丙烯酰胺凝胶作介质,但需含有 8 mol/L 尿素、0.5%~2% 非离子或两性离子去污剂。为了增加样品的可溶性,可加 0.5% CHAPS。在第一向电泳中,最重要的是用载体两性电解
Triton160等离子清洗机
上海螣芯电子科技有限公司 ☎13122976482Triton 160:一体式等离子处理系统设备面向大半导体市场工业级客户与研发型客户使用需求设计的范用型等离子处理设备,适用于等离子清洗、活化以及刻蚀等多种应用。设备可在严苛环境下稳定运行,获得高度均一化的处理效果。应用领域I 金属键合(wire-b
尿素的用途
它可以大量作为三聚氰胺、脲醛树酯、水合阱、四环素、苯巴比妥、咖啡因、还原棕BR、酞青蓝B、酞青蓝Bx、味精等多种产品的生产原料。 一、调节花量 为了克服苹果地大小年,遇小年时,于花后5-6周(苹果花芽分化的临界期,新梢生长缓慢或停止,叶片含氮量呈下降趋势)叶面喷施0.5%尿素水溶液,连喷2次,可以提
尿素的作用
尿素循环是哺乳动物和两栖动物排泄含氮代谢废物的主要途径。但别种生物亦然,如鸟类、无脊椎动物、昆虫、植物、酵母、真菌和微生物。尿素对生物基本是废物,但仍有正面价值。比如,肾小管里的尿素被引入肾皮质以提高其渗透浓度,促使水份从肾小管渗透回身体再利用。
血清尿素氮偏高病因分析介绍
1、器质性肾功能损害: ⑴各种原发性肾小球肾炎、肾盂肾炎、间质性肾炎、肾肿瘤、多囊肾等所致的慢性肾衰竭。 ⑵急性肾衰竭肾功能轻度受损时,BUN可无变化,但GFR(肾小球滤过率)下降至50%以下,BUN才能升高。因此血BUN测定不能作为早期肾功能指标。但对慢性肾衰竭,尤其是尿毒症BUN增高的程
简述血清尿素氮偏低病因分析
1、肾功能失调。尿素氮偏低,可能与蛋白质吃得太少、怀孕、肝衰竭有关。 2、肝功能衰竭。肝脏是人体重要的代谢器官,肝功能衰竭,造成营养物质不能正常吸收。另一个原因是患者蛋白质摄入不够,再加上因肝功能不正常而大量消耗。 造成尿素氮偏低的原因有多个,因此,患者如果出现了尿素氮偏低,一定要到正规医院
包涵体的纯化
关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌? 细胞的破碎方法 1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器
包涵体蛋白的纯化和复性实验过程(一)
一.菌体的收集和破碎用50 ml离心管分别收集诱导表达后的培养物,8000 rpm 4℃离心10 min。沉淀用适量的超声破菌缓冲液重悬。【备注】超声破菌缓冲液(20 mmol/L Tris-HCl pH8.0、0.5 mol/L NaCl、1 mmol/L EDTA、1 mg/mL溶菌酶)重悬后的
从果蝇胚胎中纯化核心组蛋白实验
实验方法原理 实验材料 0~12 h 果蜗胚胎试剂、试剂盒 脱色洗液胚胎洗液缓冲液 B缓冲液 ANaOH CaCl2 EDTA SDSNaCl氯仿 异戊醇T50E4 缓冲液核心组蛋白储存液仪器、耗材 羟磷灰石树脂BCA 分析试剂盒细尼龙网Yamato LH-21 匀浆器Beckman 超速离心机 M
从果蝇胚胎中纯化核心组蛋白实验
实验材料0~12 h 果蜗胚胎试剂、试剂盒脱色洗液胚胎洗液缓冲液 B缓冲液 ANaOHCaCl2EDTASDSNaCl氯仿 异戊醇T50E4 缓冲液核心组蛋白储存液仪器、耗材羟磷灰石树脂BCA 分析试剂盒细尼龙网Yamato LH-21 匀浆器Beckman 超速离心机MWCO 透析管实验步骤1.
免疫学实验抗组蛋白抗体介绍
抗组蛋白抗体介绍: 组蛋白是核内最丰富的蛋白质,它与DNA构成的复合物称为染色质。染色质最基本的亚单位结构是核小体(nucleosome),它由146个碱基对组成的DNA链缠绕8个组蛋白分子(2个H2A-H2B杂二聚体之间夹着2个杂二聚体H2-H4)2圈构成的核心和核心外的组蛋白H1与连结DNA(
前剪接体和剪接体的分离及分析实验
实验方法原理 剪接体是由 RNA 和蛋白质构成的核糖核蛋白体(RNP),它在前体 mRNA 的剪接过程中可去除前体 mRNA 的内含子。snRNP 是由 snRNA 及其结合蛋白组成,在前体 mRNA 的剪接过程起着重要作用。实验材料 PIP 10 载体核苷酸焦磷酸酶RNasinT7 RNA 聚合酶