组蛋白的Triton/乙酸/尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳分析实验
试剂、试剂盒冰醋酸TEMED (NNN’N’-四甲基乙二胺)尿素10% 过硫酸铵(APS; 配胶时新鲜配置)10% Triton X-100 (蛋白级;Calbiochem)63. 5% 丙烯酰胺 0. 4% 亚甲双丙烯酰胺电泳缓冲液(0.9 mol L 乙酸)还原剂(2-巯基乙胺)仪器、耗材抽滤瓶制胶装置适合 16 cm×22 cm 玻璃板的垂直板电泳装置有两条导线可提供恒电流电泳的电源1.5 mm 厚 16 齿梳带有 23-G 针头的一次性注射器带有弯曲为 U 型的 18-G 针头的一次性注射器Hamilton 注射器实验步骤1. 在 1000 ml 抽滤瓶中加入:3.62 ml 冰醋酸1.88 ml 水0.329 ml TEMED2. 轻轻地旋转摇动混合,然后加入:44. 21 ml 9. 5 mol/L 尿素0.875 ml 10% APS3. 将溶液完全抽气。4. 在瓶中加入 2.59 ml 10% Triton X-......阅读全文
组蛋白的Triton/乙酸/尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳分析实验
实验方法原理 试剂、试剂盒 冰醋酸TEMED (NNN’N’-四甲基乙二胺)尿素10% 过硫酸铵(APS; 配胶时新鲜配置)10% Triton X-100 (蛋白级;Calbiochem)63. 5% 丙烯酰胺 0. 4% 亚甲双丙烯酰胺电泳缓冲液(0.9 mol L 乙酸)还原剂(2-巯
组蛋白的Triton/乙酸/尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳分析实验
试剂、试剂盒冰醋酸TEMED (NNN’N’-四甲基乙二胺)尿素10% 过硫酸铵(APS; 配胶时新鲜配置)10% Triton X-100 (蛋白级;Calbiochem)63. 5% 丙烯酰胺 0. 4% 亚甲双丙烯酰胺电泳缓冲液(0.9 mol L 乙酸)还原剂(2-巯基乙胺)仪器、耗材抽滤瓶
尿素梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳与折叠分析实验
Goldenberg 和 Creighfn(1984) 引入用含尿素浓度梯度的聚丙烯酰胺凝胶来分析蛋白质的折叠状态。对该操作程序的进一步描述连同技术考虑和理论解释均可见于 Goldenberg(1989) 的文献。下面的操作程序是根据 Goldenberg 和 Creighton(1984) 及 G
尿素梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳与折叠分析实验
尿素梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳与折叠分析实验 试剂、试剂盒 丙烯酰胺 双丙烯酰胺 Tris-乙酸
尿素梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳与折叠分析实验
试剂、试剂盒 丙烯酰胺双丙烯酰胺Tris-乙酸缓冲液核黄素尿素NNN'N'-四甲基乙二胺(TEMED)丁醇甘油溴酚蓝考马斯亮蓝染料仪器、耗材 具搅拌平台的线性梯度混合器蠕动泵平板注胶架注胶用玻板隔条荧光灯平板凝胶电泳装置 电源实验步骤 材料与设备丙烯酰胺双丙烯酰胺Tris-乙酸缓冲液
培养箱Triton
培养箱Triton(code 67180) Triton35L培养箱以其可靠性和坚固性保证得到较高的加热的准确性和精确度。它是中低端日常微生物分析的理想选择。 培养箱 技术特点: 不锈钢结构,内胆搪瓷,双玻璃门 3边不锈钢托盘支架,带2个不锈钢托盘 有内灯,
尿素气体分析
方案优势 在尿素合成的整个工艺过程中提供气体分析,为工艺过程控制提供准确的数据。 采用标准 相关标准 方法/原理/步骤 合成氨生产为NH3和CO2直接合成尿素提供
分析苯基尿素类杀虫剂的实验方法
色谱流动相的制备: 1M甲酸铵溶液:称取63g甲酸铵,溶于1L HPLC级的水中。 流动相A:在1L水 (HPLC级) 中加入5mL 1M 甲酸铵溶液。 流动相B:在1L甲醇 (HPLC级) 中加入5mL 1M 甲酸铵溶液。 样品制备(水果与蔬菜基质) 基于An
分析苯基尿素类杀虫剂的实验方法
色谱流动相的制备: 1M甲酸铵溶液:称取63g甲酸铵,溶于1L HPLC级的水中。 流动相A:在1L水 (HPLC级) 中加入5mL 1M 甲酸铵溶液。 流动相B:在1L甲醇 (HPLC级) 中加入5mL 1M 甲酸铵溶液。 样品制备(水果与蔬菜基质) 基
乙酸激酶的测定实验
实验方法原理ATP:乙酸磷酸转移酯(AK)乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP这个反应可以与丙酮酸激酶(PK)偶联,乳酸脱氢酶(LDH)反应如下:实验材料酶样品试剂、试剂盒三乙醇胺-HCl KOH乙酸钠ATPMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸LDHPK仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.
乙酸激酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 ATP:乙酸磷酸转移酯(AK)乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP这个反应可以与丙酮酸激酶(PK)偶联,乳酸脱氢酶(LDH)反应如下:
从包涵体中纯化表达蛋白
实验方法原理 蛋白质在大肠杆菌中的高水平表达,常常导致形成相差显微镜下可见的细胞质颗粒或包涵体。这些由表达蛋白聚集成的包涵体很容易与可溶性蛋白和膜结合蛋白分离。高水平表达外源蛋白的细菌经离心浓缩后,可通过机械法、超声处理法或溶菌酶加去污剂的方
从包涵体中纯化表达蛋白
实验方法原理蛋白质在大肠杆菌中的高水平表达,常常导致形成相差显微镜下可见的细胞质颗粒或包涵体。这些由表达蛋白聚集成的包涵体很容易与可溶性蛋白和膜结合蛋白分离。高水平表达外源蛋白的细菌经离心浓缩后,可通过机械法、超声处理法或溶菌酶加去污剂的方法进行裂解。包涵体经离心沉淀后,可用Triton X-100
三氯乙酸沉淀实验
试剂、试剂盒 丙酮分子量标准TCA+DOC加与不加2-巯基乙醇的样品缓冲液仪器、耗材 聚丙烯微量离心管实验步骤 材料与设备丙酮(Aldrich Chemical Co.Inc.)注:保存于室温。不能放入冰箱。聚丙烯微量离心管 (1.5-ml)注:1. 用前将离心管洗干净。2. 分析极少量蛋白质(
三氯乙酸沉淀实验
实验方法原理 1. 三氯乙酸为酸性化合物,是阴离子型沉淀剂,在低于蛋白质等电点的PH值时,酸根与带正点荷的蛋白质形成不溶性盐而沉淀;2. 作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀。3. 随着蛋白质分子量的增
三氯乙酸沉淀实验
三氯乙酸沉淀实验主要用于(1)蛋白质的沉淀纯化;(2)试样化合物的提取。实验方法原理1. 三氯乙酸为酸性化合物,是阴离子型沉淀剂,在低于蛋白质等电点的PH值时,酸根与带正点荷的蛋白质形成不溶性盐而沉淀;2. 作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀。3. 随着蛋白
TritonPrep-Method-for-bacterial-DNA-Purification
Triton-Prep Method for bacterial DNA PurificationGrow 5 ( large scale-15ml culture). Harvest in single eppendorf tube (or 15 ml disposable tube).Resus
使用超高效合相色谱分析Triton-X100
简介 Triton X-100等非离子表面活性剂被用于化妆品、工业材料和其它许多产品中,其乙氧基链长度的差别会影响到混合物的粘度、极性和其它特性,因此必须对其组成进行检测。 检测方法常用的有:HPLC、SFC和GC,GC和HPLC分析方法非常耗费时间,非UV吸收的表面活性剂还需进行衍生
补骨脂素介导光交联反应研究RNA与蛋白质分子间作用实验
基于补骨脂素光化学反应的 RNA-蛋白分子复合物分析法,能够在数据相对缺乏的情况下分析生理条件下的 RNA-蛋白复合物的拓扑构象。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验材料蛋白酶K试剂、试剂盒变性胶电泳缓冲液非变性胶电泳缓冲液结合缓冲液水解缓冲液丙烯酰胺储存液RNA 洗脱缓冲液四甲基乙
乙酸乙酯的制取实验
乙醇乙酸意缱绻, 催化吸水求硫酸。 常加碎瓷防暴沸, 除酸除醇靠纯碱。 解释: 1、乙醇乙酸意缱绻,催化吸水求硫酸:这句的意思是说乙酸乙醇在浓硫酸的催化作用下发生酯化反应生成乙酸乙酯,在该反应中浓硫酸既是催化剂又是吸水剂(因为该反应是可逆反应,生成的水被浓硫酸吸收掉,降低了生成物水的浓
乙酸乙酯的制备实验
实验方法原理实验步骤仪器:加热套;250 mL三口瓶;75°弯头;直形冷凝管;真空接尾管;150 mL锥形瓶;真空塞;125 mL滴液漏斗(以上均为19#);温度计(200℃、100℃); 500 mL烧杯2个;量筒(10mL、100mL);125mL分液漏斗;蒸馏头19#。药品:95%乙醇;浓硫酸
乙酸乙酯的制备实验
实验方法原理实验步骤仪器:加热套;250 mL三口瓶;75°弯头;直形冷凝管;真空接尾管;150 mL锥形瓶;真空塞;125 mL滴液漏斗(以上均为19#);温度计(200℃、100℃); 500 mL烧杯2个;量筒(10mL、100mL);125mL分液漏斗;蒸馏头19#。药品:95%乙醇;浓硫酸
RNA分离与分析实验_用丙烯酰胺尿素凝胶纯化RNA
实验材料RNA试剂、试剂盒TBE 缓冲液丙烯酰铵溶液过硫酸铵水溶液RNA 染色液仪器、耗材玻璃板实验步骤1. 准备下列溶液:TBE 缓冲液:Tris 碱 54 g,硼酸 27.5 g,0.5 mol/L EDTA ( pH 8.0) 20 ml,溶解并加水至 1000 ml。当发现贮存液有白色沉淀
补骨脂素介导的光交联反应研究RNA与蛋白质分子间的作...
补骨脂素介导的光交联反应研究RNA与蛋白质分子间的作用实验实验材料 蛋白酶K试剂、试剂盒 变性胶电泳缓冲液非变性胶电泳缓冲液结合缓冲液水解缓冲液丙烯酰胺储存液RNA 洗脱缓冲液四甲基乙二胺过硫酸铵AMV 反转录酶及反应缓冲液磷酸钠8-羟基补骨脂素13-二碘丙烷碳酸钾丙酮石油醚乙酸乙酯硫酸钠硅胶三氟乙
酵母转化实验_乙酸锂转化
实验材料酵母试剂、试剂盒YPDYPAD腺嘌呤半硫酸TE乙酸锂仪器、耗材摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤1. 在开始实验前2天,接种待转化的酵母菌株的单菌落于5 ml YPD培养基中,于30℃恒温摇床,培养过夜。 2. 转化的前一天晚上,往1 L 无菌烧瓶中加入300 ml YPAD培养基,然后
血尿素氮偏高的病因分析
1、器质性肾功能损害:⑴各种原发性肾小球肾炎、肾盂肾炎、间质性肾炎、肾肿瘤、多囊肾等所致的慢性肾衰竭。⑵急性肾衰竭肾功能轻度受损时,BUN可无变化,但GFR(肾小球滤过率)下降至50%以下,BUN才能升高。因此血BUN测定不能作为早期肾功能指标。但对慢性肾衰竭,尤其是尿毒症BUN增高的程度一般与
补骨脂素介导光交联反应研究RNA与蛋白质分子间的作用
实验材料 蛋白酶K 试剂、试剂盒 变性胶电泳缓冲液 非变性胶电泳缓冲液 结合缓冲液
尿素与尿素氮的区别
尿素是蛋白质及其组成成份氨基酸分解代谢的最终产物。在蛋白质分解代谢中,蛋白质被分解为氨基酸,经脱氨基作用形成氨的在肝脏中被结合生成尿素,这是人体内清除多余氮的最重要途径。同时,尿素是体内含量最高的非蛋白质含氮物质。 尿素测定是肾功能评价应用最广的实验,它经常和肌酐联合使用来鉴别诊断
尿素与尿素氮的区别
尿素是蛋白质及其组成成份氨基酸分解代谢的最终产物。在蛋白质分解代谢中,蛋白质被分解为氨基酸,经脱氨基作用形成氨的在肝脏中被结合生成尿素,这是人体内清除多余氮的最重要途径。同时,尿素是体内含量最高的非蛋白质含氮物质。 尿素测定是肾功能评价应用最广的实验,它经常和肌酐联合使用来鉴别诊断肾前性高
大分子物质的水解实验——尿素试验
实验方法原理尿素是由大多数哺乳动物消化蛋白质后被分泌在尿中的废物。 尿素酶能分解尿素释放出氨,这是一个分辨细菌很有用的诊断实验。尽管许多微生物都可以产生尿素酶,但它们利用尿素的速度比变形杆菌属的细菌要慢,因此尿素酶试验被用来从其他非发酵乳糖的肠道微生物中快速区分这个属的成员,尿素琼脂含有蛋白胨, 葡